乔惠丽 作品数:28 被引量:58 H指数:5 供职机构: 南阳师范学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 河南省高等学校青年骨干教师资助计划项目 河南省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 医药卫生 文化科学 更多>>
RNA干涉家蚕细胞Ago蛋白家族基因的表达研究 被引量:4 2012年 分别构建RNAi(RNA interference,RNAi)载体干扰家蚕细胞BmN中Argonaute1(Ago1)和Argonaute2(Ago2)基因的表达。首先利用PFBDM和pBac[A3-EGFPafm]载体构建Ago1和Ago2基因的RNA干涉载体,通过转染家蚕细胞发现,Ago1和Ago2基因表达明显下降。并观察细胞形态发现,转染RNAi载体96h后,家蚕BmN细胞逐渐失去正常的梭形状态,体积变大,形态变圆。该研究为进一步研究家蚕中small RNA的产生及作用机制提供了较好的基础。 陈敏 李丹丹 乔惠丽 卢楠 文祯中 阚云超关键词:RNA干涉 基因表达 家蚕 家蚕成虫触角感受器的扫描电镜观察 被引量:3 2014年 为了研究家蚕(Bombyx mori)成虫触角的外部形态及其感受器的种类和分布,利用扫描电子显微镜对家蚕成虫触角感器的形态特征进行了观察。结果表明,家蚕雌、雄蛾触角上存在7种感器,即毛形感器、短毛形感器、锥形感器、刺形感器、腔锥形感器、耳形感器和鳞形感器,其中腔锥形感器只存在于雄蛾触角上,毛形感器在雌雄触角中都最发达。该结果为家蚕的形态、生理和化学生态研究奠定了基础。 邢万静 乔惠丽 刘克成 邢秋婷 阚云超关键词:触角感器 扫描电镜 家蚕miR-2769靶基因的鉴定及表达分析 2020年 【目的】MiRNAs在昆虫变态发育过程中发挥非常重要的作用。对家蚕Bombyx mori miRNAs及靶基因的研究将有助于阐明miRNAs参与调控家蚕变态发育的分子机制。【方法】往家蚕5龄第2天幼虫血淋巴注射蜕皮激素20E后,qRT-PCR检测miR-2769在家蚕脂肪体中的表达;通过生物信息学方法预测家蚕miR-2769的靶基因;利用双荧光酶报告载体系统分析miR-2769与预测靶基因BmE75B的互作;qRT-PCR检测miR-2769及其靶基因BmE75不同剪接体在家蚕不同发育时期(幼虫、蛹和成虫)和幼虫不同组织(头、表皮、丝腺、脂肪体、精巢、卵巢、马氏管、中肠和血淋巴)中的表达量。【结果】研究结果表明,miR-2769可通过与家蚕BmE75B的3′UTR区结合位点的互作,显著抑制荧光素酶报告基因的表达。qRT-PCR结果表明,miR-2769和BmE75A/BmE75B在20E诱导家蚕脂肪体中表达趋势相反。时空表达分析结果表明,miR-2769与BmE75的不同剪接体在家蚕不同发育时期和不同组织中均具有特异性表达特征。在家蚕变态发育的不同阶段,miR-2769和BmE75A的表达量均较低,而BmE75B在蛹期表达量较高,BmE75C在5龄末幼虫和蛹早期有极高表达水平。此外,miR-2769与BmE75不同剪接体均存在一定程度的表达负相关。在家蚕5龄幼虫血淋巴中miR-2769可促进BmE75A的表达,在脂肪体中miR-2769可促进BmE75B的表达,而在其他组织中miR-2769抑制BmE75不同剪接体的表达。【结论】家蚕miR-2769可通过与BmE75B的3′UTR区的互作对BmE75不同剪接体的表达进行负调控。 孙妍妍 王景娅 王露 李晓哲 阚云超 乔惠丽关键词:家蚕 变态发育 蜕皮激素 MIRNAS 靶基因 QRT-PCR 家蚕非编码RNA在神经系统中的表达分析 2015年 【目的】非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)在家蚕Bombyx mori发育过程中具有重要调控作用。本研究旨在探索ncRNA参与家蚕神经系统发育的分子机理。【方法】采用实时荧光定量PCR技术对22个中等长度的ncRNA及3个ncRNA的邻近编码基因在家蚕幼虫神经系统中的表达水平进行检测。【结果】8个ncRNA(包括1个C/D box snoRNA,4个H/ACA box snoRNA和3个不能归类的ncRNA)在家蚕5龄幼虫神经组织和非神经组织中均有表达,且在胸腹神经中的表达量明显高于头部神经中的表达量。其中,snoRNA Bm-51,Bm-18和Bm-86在胸腹神经中的表达量分别是头部神经中的23,5和4.7倍。进一步研究发现,这3个内含子起源的ncRNA与其宿主基因在家蚕神经系统中的表达趋势一致,宿主基因在胸腹神经中的表达量也明显高于头部神经中的表达量。【结论】本研究筛选到的在家蚕不同神经部位存在差异表达的ncRNA,特别是在胸腹神经中高表达的ncRNA可能协同其邻近编码基因,参与家蚕神经发育或神经活动过程。该结果为研究ncRNA参与家蚕神经系统发育提供了分子依据,为从非编码RNA角度探索鳞翅目害虫防治提供了新的思路。 王立方 乔惠丽 吴博 张丹 阚云超 李丹丹关键词:家蚕 神经系统 非编码RNA 表达谱 基于OBE理念的“细胞生物学”课程教学改革与实践 被引量:1 2023年 为了提高“细胞生物学”的教学效果,按照模块化教学要求优化教学内容,基于OBE的教学理念改进教学方法,利用网络教学平台,分别在2018级和2019级农学专业学生“细胞生物学”授课中采用线上线下的混合教学模式,在“课前”“课中”和“课后”三个教学环节了解学生学习情况。教学实践结果表明,学生的课堂参与度和综合能力大大提高,学生成绩优秀率(80分以上)提高2倍以上,基本消灭不及格。该教学模式也得到了学生的充分认可,可在今后的“细胞生物学”教学中继续使用。 乔惠丽关键词:教学理念 网络教学平台 教学过程 制药工程专业微生物学教学改革探讨 被引量:4 2014年 微生物学是制药工程专业的一门主干课程,是学生进行后续课程学习和深造必不可少的重要基础。制药工程专业的培养目标和课程结构特点决定微生物学课程在内容和教学方法上要与其他专业有所区别。文章从教材选择、教学内容、教学方法和实践教学等方面对微生物学课程的教学改革进行了探讨,旨在为培养合格的创新型制药工程专业人才打下基础。 乔惠丽 焦铸锦关键词:制药工程 微生物学 教学改革 家蚕内参蛋白GAPDH多克隆抗体及其制备方法 本发明公开了一种家蚕内参蛋白GAPDH多克隆抗体及其制备方法,制备方法包括以下步骤:第一步、GAPDH /pET‑28a原核表达载体构建:(1)家蚕RNA提取;(2)反转录;(3)PCR扩增;(4)GAPDH/pMD‑1... 陈莹 王远卓 杨娟娟 王静 乔惠丽基于CRISPR-Cas13a和RT-RAA的HIV核酸检测方法的建立 被引量:3 2022年 目的探索一种基于成簇的规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)和反转录重组酶介导的等温扩增(RTRAA)技术HIV核酸检测新方法的可行性。方法在HIV网络数据库www.hiv.lanl.gov下载HIV CRF07_BC亚型基因序列,根据保守序列设计RT-RAA引物和crRNA。通过荧光法CRISPR核酸检测筛选crRNA;利用梯度稀释的HIV RNA模板评价荧光法和试纸法CRISPR核酸检测的灵敏度;利用6种病原体核酸和不同亚型的HIV临床样本评价该方法的特异性。结果从5条候选的crRNA中筛选出了1条检测灵敏度较高的crRNA;荧光法和试纸法CRISPR核酸检测HIV RNA的灵敏度均为10拷贝/μL,与RT-qPCR法的灵敏度一致。荧光法和试纸法CRISPR核酸检测均可特异性检出HIV CRF07_BC亚型,与其他病原体核酸无明显交叉反应。在20例HIV临床样本检测中,试纸法CRISPR核酸检测准确检出了10例CRF07_BC以及1例B亚型。结论本研究建立了针对HIV CRF07_BC亚型的CRISPR核酸检测方法,具有便携、快速、高灵敏度和特异性的特点,为HIV感染者的检测和抗病毒治疗过程监测提供新的方法。 李小辉 粟斌 寇志华 吴昊 张彤 孙岩松 韩尧 乔惠丽 李浩 姜太一关键词:艾滋病病毒 核酸检测 一种实验室散热降噪高速离心机 本实用新型涉及一种实验室散热降噪高速离心机,包括机体、电机、转子、通风风扇以及导风消声端盖,所述的机体内部设置有驱动安装腔以及离心腔;所述离心腔的上端设置有开口,离心腔的下端设置有轴孔,轴孔的周沿设置有若干第一通风孔;所... 郭兴国 彭明星 乔惠丽文献传递 家蚕化学感受蛋白CSP16的表达及结合特性分析 被引量:5 2016年 【目的】化学感受蛋白(chemosensory proteins,CSPs)在昆虫化学信号的感受识别和生长发育调节等生理过程具有重要作用。本研究旨在探索CSP16在家蚕Bombyx mori中的功能。【方法】利用RT-q PCR分析csp16在家蚕不同发育时期和不同组织的表达特征,用原核表达系统对家蚕CSP16进行表达纯化,并通过荧光结合实验检测该蛋白与不同配体化合物的结合特性。【结果】RT-q PCR结果表明,csp16在家蚕1-5龄幼虫中呈规律性表达,各龄期眠蚕中表达量最高,5龄第3天幼虫中主要表达于头、表皮、精巢和卵巢等。蜕皮激素(20E)处理后csp16在不同龄期幼虫和5龄幼虫不同组织中的表达量上调。纯化后CSP16的荧光结合实验表明,CSP16与醇类、酯类、醛类、酚类和苯环类等化合物的亲和力都较弱。【结论】csp16在家蚕不同龄期幼虫眠蚕中表达量最高,蜕皮激素使csp16在家蚕取食幼虫中的表达量出现上调,提示其可能参与家蚕幼虫的蜕皮过程。 郭兴国 陈莹 邢秋婷 邢万静 阚云超 乔惠丽关键词:家蚕 化学感受蛋白 蜕皮激素