龚桂花
- 作品数:11 被引量:5H指数:2
- 供职机构:上海医药工业研究院更多>>
- 发文基金:上海市自然科学基金国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生自动化与计算机技术化学工程更多>>
- 头孢菌素C酰基转移酶在顶头孢霉中的表达被引量:3
- 2009年
- 以假单胞菌的头孢菌素C(CPC)酰基转移酶为基础,根据顶头孢霉密码子偏爱性及RNΑ二级结构预测分析,设计并合成了全长2349bp的CPC酰基转移酶基因ecs,并将其在大肠杆菌中表达。结果证明,表达蛋白能将CPC转化为7-ΑCΑ。将ecs表达质粒转化CPC产生菌顶头孢霉,通过PCR、Southern blotting以及Western blotting等方法验证,表明ecs基因已成功整合到顶头孢霉染色体上并得到表达,重组菌的发酵也显示部分CPC直接转化成了7-ΑCΑ。
- 刘艳龚桂花胡又佳朱春宝朱宝泉
- 关键词:顶头孢霉头孢菌素C7-氨基头孢烷酸
- 密码子优化小鼠socs-1基因及其在大肠杆菌中的表达
- 2008年
- 根据已报道的小鼠socs-1基因序列,依据大肠杆菌密码子偏爱性,设计并采用重叠PCR法合成了全长693bp的socs-1基因,将其克隆到表达载体pET-22b中构建表达载体pET-SOCS1。经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳显示此密码子优化后的基因可在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达。
- 龚桂花刘艳胡又佳朱春宝朱宝泉
- 关键词:SOCS-1密码子优化重叠PCR
- 一种编码CPC酰基转移酶的核苷酸序列及生产7-ACA的方法
- 本发明公开一种编码头孢菌素C酰基转移酶的核苷酸序列、其重组表达载体及其转化子。该核苷酸序列是选自下组之一的核苷酸序列:a)序列表中SEQ ID NO.1所述的核苷酸序列;b)与序列表中SEQ ID NO.1所述的核苷酸序...
- 胡又佳刘艳龚桂花赵文杰朱春宝
- 文献传递
- RNA干扰类药物开发策略及临床研究进展
- 2009年
- RNA干扰(RNAi)是由双链RNA介导的特异性基因表达沉默。利用RNAi技术可使某些与疾病发生有关的基因沉默或表达水平降低,从而有效治疗疾病。目前RNAi类药物的研究已在多种疾病治疗领域取得了较好进展。本文综述RNAi类药物的开发策略及其临床研究进展。
- 龚桂花张秀红胡又佳
- 关键词:RNA干扰SIRNA基因沉默
- 一种用于生产7-氨基头孢烷酸的发酵培养基及其发酵方法
- 本发明提供一种用于生产如式I所示的7-氨基头孢烷酸(7-ACA)的发酵培养基,以所述发酵培养基的总体积计,它含有:4.2-18%(g/100mL)碳源;10-12%(g/100mL)氮源;和微量元素溶液;以所述微量元素溶...
- 胡又佳刘艳龚桂花朱宝泉刘红
- 文献传递
- 头孢菌素C乙酰化酶在顶头孢霉中的表达
- 7-ACA(7-氨基头孢烷酸)是β-内酰胺类抗生素合成的主要前体,工业上主要以化学裂解法由CPC(头孢菌素C)进行生产,由于化学裂解法环境污染大,原料成本高,现在已有部分厂家采用生物酶催化法进行7-ACA生产。现有生物酶...
- 刘艳龚桂花朱春宝朱宝泉胡又佳
- 文献传递
- 一种顶头孢霉蛋白质组的制备方法
- 本发明公开了一种顶头孢霉蛋白质组的制备方法,包括以下步骤:将顶头孢霉菌体用液氮研磨成粉末状后,用TCA-丙酮沉淀法提取总蛋白样品;将所得的总蛋白样品与水化溶液混合后,水化上样,采用IPG固相胶条,然后进行等电聚焦,等电聚...
- 胡又佳刘艳朱春宝朱宝泉刘红龚桂花
- 文献传递
- 一种顶头孢霉蛋白质组的制备方法
- 本发明公开了一种顶头孢霉蛋白质组的制备方法,包括以下步骤:将顶头孢霉菌体用液氮研磨成粉末状后,用TCA-丙酮沉淀法提取总蛋白样品;将所得的总蛋白样品与水化溶液混合后,水化上样,采用IPG固相胶条,然后进行等电聚焦,等电聚...
- 胡又佳刘艳朱春宝朱宝泉刘红龚桂花
- 一种编码CPC酰基转移酶的核苷酸序列及生产7-ACA的方法
- 本发明公开一种编码头孢菌素C酰基转移酶的核苷酸序列、其重组表达载体及其转化子。该核苷酸序列是选自下组之一的核苷酸序列:a)序列表中SEQ ID NO.1所述的核苷酸序列;b)与序列表中SEQ ID NO.1所述的核苷酸序...
- 胡又佳刘艳龚桂花赵文杰朱春宝
- RNAi技术降低头孢菌素C工业生产菌株中cefG基因的转录被引量:4
- 2010年
- RNAi是近年来新兴的一种通过抑制基因转录水平来实现特定基因表达沉默的技术。本研究尝试在顶头孢霉工业生产菌株中利用RNAi技术沉默cefG基因的转录,构建了一个含可形成cefG双链RNA转录单元的质粒,并将其导入头孢菌素C工业生产菌株中。结果发现其中两个转化子的cefG基因转录水平在发酵第4天较出发菌株降低了80%以上,而它们的头孢菌素C发酵水平较出发菌株则分别降低了34.6%和28.8%。
- 龚桂花刘艳胡又佳朱春宝朱宝泉
- 关键词:RNAI头孢菌素C顶头孢霉