龙菊英
- 作品数：12 被引量：36H指数：4
- 供职机构：南京农业大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 水稻黄单胞细菌的无毒基因被引量：5
- 2004年
- 水稻黄单胞细菌白叶枯致病变种与水稻品种的互作关系符合基因 基因假说。病菌无毒基因 (A)与寄主抗病基因(R)显性互作表现抗性反应。许多黄单胞细菌的无毒基因属于avrBs3/ pth家族。已报道的avrxa5、avrXa7、avrXa10以及本实验室从水稻白叶枯病菌菌株JXOⅢ克隆的avrXa3均属于avrBs3/ pth家族。最近的研究还发现 ,PR6菌株中有2个硫同化基因簇成员raxP和raxQ对决定avrXa2 1活性是必需的。笔者在研究无毒基因avrXa3时 ,从JXOⅢ的基因组文库克隆中发现一个与甘蓝黑腐黄单胞菌烯醇化酶 磷酸酶基因的同源序列也具有无毒基因活性。在介绍黄单胞细菌无毒基因类群和avrBs3/ pth家族基因结构与功能的同时 。
- 李平龙菊英张燕高学文王金生
- 关键词：水稻植物病原细菌水稻白叶枯病菌无毒基因
- 水稻条斑病菌和白叶枯病菌致病相关基因的敲除被引量：7
- 2006年
- wxocA、wxocB、wxocD、wxocE和wzt是水稻条斑病菌(Xanthom onas oryzaepv.oryzicola,Xooc)的脂多糖(lipopo-lysaccharide,LPS)合成基因,avrXa3是水稻白叶枯病菌(Xanthom onas oryzaepv.oryzae,Xoo)的一个无毒基因。利用pBCSK(-)和pKNG101两个质粒的复制起点不被水稻黄单胞菌识别的特点,把wxocA、wxocD、wxocE和wzt的中心区域克隆在pBCSK(-)上,获得突变转化单元pBCSK∷ΔwxocA、pBCSK∷ΔwxocD、pBCSK∷ΔwxocE和pBCSK∷Δwzt。把wxocB和avrXa3基因的旁侧序列和一个氯霉素抗性基因cm构建在pKNG101上,获得突变转化单元pKNG101∷ΔwxocB和pKNG101∷Δavr。以电转化方式把这些LPS合成基因突变转化单元DNA转入Xooc菌株RS105,把无毒基因突变转化单元转入Xoo菌株PXO99,通过同源重组分别获得了RS105中5个lps相应基因突变体MwxocA、MwxocB、MwxocD、MwxocE、Mwzt和一个无毒基因的突变体PXO99Δavr。SDS-PAGE分析发现,lps突变体的O抗原或核心寡糖的合成被破坏。致病性分析结果显示,基因wxocB、wxocE和wzt与致病性有关,前两基因的突变导致细菌完全失去毒性,而后一基因的突变导致细菌部分丧失毒性。与PXO99相比无毒基因突变体PXO99Δavr改变了原有的毒性表型,在IRBB50(Xa4/xa5)和Asom inori(Xa17)上由较感转变为较抗表型。因此,本试验证明,以pBCSK(-)和pKNG101为载体敲除水稻条斑病菌和白叶枯病菌致病相关基因是可行的。
- 龙菊英张桂英王金生
- 关键词：水稻条斑病菌水稻白叶枯病菌基因敲除无毒基因
- 水稻条斑病细菌(Xanthomolias oryzae pv.oryzicola)Wzt基因参与LPS O-抗原合成和影响细菌致病性被引量：1
- 2005年
- ABC-转运系统将同质O-抗原多糖链从细胞质内膜转运到细胞周质空间合成脂多糖(LPS)。通过功能互补和亚克隆序列分析在X. oryzae pv. oryzicola的基因组文库中发现了一个Wzt基因, 该基因编码产物是运输O-抗原的ABC-转运系统的疏水组成部分,为ATP-结合蛋白。为区别基因来源将该基因命名为Wzt_(Xooc). Wzt_(Xooc)编码一个35.9 ku的蛋白质。通过分析发现,Wzt_(Xooc)与数据库中的其他细菌包括水稻白叶枯病菌的ABC-转运系统的ATP结合蛋白质不同。在Wzt_(Xooc)序列中仅发现ATP-结合蛋白中4个保守基序的3个,没有发现ATP-结合位点Walker A(ATP/GTP binding site motif A)。通过基因插入突变得到Wzt_(Xooc)基因突变体Mwzt。LPS分析表明:由于该基因突变使O- 抗原链不能转运通过细胞质膜,不能形成完整的LPS分子,突变体菌落表面丧失了产生大量胞外多糖的能力;突变细菌不产生鞭毛,丧失了游动性和生物膜形成的能力。重要的是突变体在水稻上的繁殖能力和致病性明显下降,证明Wzt_(Xooc)基因与LPS合成及致病性有关。
- 龙菊英张佳环王金生
- 关键词：XANTHOMONASORYZAE水稻白叶枯病菌基因组文库O-抗原LPS
- 无毒基因avrXa3介导的水稻白叶枯病菌在不同水稻品种上的致病适应性分析被引量：1
- 2010年
- 水稻白叶枯病菌[Xanthomonas oryzaepv.oryzae(Ishiyama)Dye]是水稻上重要的细菌病害之一,探明无毒基因avrXa3和含不同抗病基因水稻品种间的互作对于制定有效的病害防治措施有着重要的意义。根据无毒基因avrXa3的序列,构建了水稻白叶枯PXO99A菌株缺失5个串联的无毒基因的突变体PXO99△avr。将avrXa3导入PXO99A和PXO99△avr后,得到衍生菌株PXO99A/avrXa3,PXO99△avr/avrXa3,与36个含不同抗病基因的水稻品种进行互作分析。结果显示,导入avrXa3后的菌株在不同的水稻品种上表现出明显的寄生适应性变化。进一步分析证明无毒基因avrXa3在Wase Aikoku 3、IRBB2、IRBB3、IRBB203、IRBB204、IRBB205、IRBB211、IRBB53、IR24、TN-1等11个水稻品种上病斑缩短,表现明显的无毒活性;在IRBB21、IRBB10、IRBB14、IR26、Cas209、Java14这6个品种上病斑明显变长,体现无毒基因的毒性功能。表明无毒基因avrXa3对PXO99A中其他无毒基因的表达有明显的干扰作用,单个效应分子的变化也会使细菌在不同水稻品种上的寄生适应性发生复杂的改变。
- 张桂英王晓宇龙菊英张燕张佳环王金生
- 关键词：XANTHOMONASORYZAEORYZAE
- 水稻白叶枯病菌PXO99^A无毒基因缺失突变的研究
- 2010年
- 对同源重组获得的水稻白叶枯病菌PXO99A菌株的无毒基因突变体PXO99Δavr进行Southern杂交验证、突变序列分析和致病性测定。结果表明:该突变体缺失了5个无毒基因,同源重组发生在PXO99A全基因组中一个有5个无毒基因串联的位点上;与PXO99A相比,突变体在IRBB10等15个水稻品种上引致的病斑明显缩短,而在IRBB14、IRBB21和IRBB55上的病斑则变长;缺失的5个无毒基因的综合表现为毒性因子功能。推断:在缺失的基因中含有无毒基因avrXa14、avrXa21、avrxa13以及与抗病基因Xa3、Xa4、xa5、Xa10、Xa17亲和互作有关的毒性因子。
- 张桂英龙菊英张燕王晓宇张佳环王金生
- 关键词：基因敲除无毒基因
- 水稻黄单胞细菌Harpin蛋白的遗传多样性及其诱导烟草过敏反应和抗病性功能被引量：14
- 2004年
- 利用PCR方法从水稻黄单胞细菌(Xanthomonasoryzae)两个致病变种(pv.oryzae和pv.oryzicola)的12个菌株中,扩增出了编码诱导植物过敏反应蛋白激发子Harpin的3类hrfA(hypersensitiveresponsefunctioningfactorA)同源基因hrf1,hrf2和hrf3.同源性分析表明,这些同源基因推测的编码产物均富含甘氨酸,缺乏酪氨酸,在序列的第45位附近的氨基酸都有一个半胱氨酸.HarpinXoo由来源于水稻白叶枯病菌的hrfA基因编码,产物包括两类,一类代表菌株为JxoⅢ,其中GGG-GG基序的重复数为3个,分子量为15.6kD;另一类代表菌株为Pxo112,产物中GGG-GG基序的重复数为4个,分子量为15.9kD,这两个基因分别命名为hrf1和hrf3.HarpinXooc由来源于水稻条斑病细菌的hrfA基因编码,代表菌株为RS105,其中GGG-GG重复数为2个,分子量为15.3kD,水稻黄单胞菌Harpin分子中的一个半胱氨酸残基是其特有的.将这3类基因与已报道的hpa1和xop1基因编码的氨基酸序列进行聚类分析,结果可以将其分为4类,来源于水稻黄单胞菌的HarpinXoo和HarpinXooc被分在相邻的两类中.对3种产物进行比较研究结果,在相同条件下3个代表菌株JxoⅢ,RS105和Pxo112的hrfA基因(hrf1,hrf2和hrf3)表达蛋白的相对浓度分别为:0.389,0.530,0.083mg/mL.hrf1,hrf2和hrf3在大肠杆菌(Bl21)
- 李平陆徐忠邵敏龙菊英王金生
- 关键词：HARPIN蛋白过敏性反应系统获得抗性烟草
- 水稻细条斑病菌HpaG<Sub>xooc</Sub>基因片段hpaG<Sub>28-126</Sub>的应用
- 本发明属于分子生物学领域，公开了水稻细条斑病菌HpaG<Sub>xooc</Sub>基因片段hpaG<Sub>28-126</Sub>的应用。本发明提供了水稻细条斑病菌HpaG<Sub>xooc</Sub>基因片段hpa...
- 董汉松刘昌来王颖龙菊英陈蕾钱君邹保红李小杰蔡洪生
- 从水稻白叶枯病菌分离的avr Bs3家族新成员avr Xa3是具双重功能的无毒基因被引量：10
- 2004年
- 以转座子标签法从水稻白叶枯病菌 (XanthomonasoryzaepvoryzaeDye ,Xoo)JXOⅢ基因组文库中筛选到两个阳性克隆 pUAV4 5和pUAV4 7,其中 pUAV4 5与avrXa10探针进行Southern印迹杂交后显示出同源性 .pUAV4 5携带2 5 .4kb的Xoo基因组DNA .将具有与avrXa10有杂交信号的亚克隆 pUAV5K(5 .7kb)转入PXO99中发现 ,接合子PXO99/ pUAV5K与PXO99/ pUAV4 5一样在水稻WaseAikoku 3(Xa3)上表现为致病性明显降低 ;而在含Xa10抗病基因的水稻Cas2 0 9上 ,则致病性增强 .携 5 .7kb的亚克隆 pUAV5K经序列测定和分析后发现 ,其中含有一个全长2 5 98bp的开放阅读框 (ORF) ,包含有 8.5个 34个氨基酸的直接重复单元 ,1个亮氨酸拉链结构域(LZ) ,3个细胞核定位信号 (NLSs)序列以及C端的酸性转录激活区域 (AAD) ,与avrXa10高度同源 .据此认为 ,该ORF是水稻白叶枯病菌JXOⅢ菌株中具双重功能即无毒性功能和侵袭力 (症状表达 )功能的无毒基因avrXa3,为avrBs3(avr/ pth)家族的一个新成员 .
- 李平龙菊英黄迎春张燕王金生
- 关键词：水稻白叶枯病菌转座子标签法
- 水稻黄单胞Xanthomonas oryzae pv. oryzicola RS105 LPS合成基因簇的功能分析
- 水稻白叶枯病菌Xanthimonas oryzae pv．oryzae/(Xoo/)和水稻细菌性条斑病菌Xanthimonas oryzae pv．oryzicola/(Xooc/)是水稻上的两个致病变种。Xoo在亚热带...
- 龙菊英
- 关键词：水稻白叶枯病菌水稻细菌性条斑病菌脂多糖
- 文献传递
- 水稻细条斑病菌HpaG<Sub>xooc</Sub>基因片段hpaG<Sub>28-126</Sub>的应用
- 本发明属于分子生物学领域，公开了水稻细条斑病菌HpaG<Sub>xooc</Sub>基因片段hpaG<Sub>28-126</Sub>的应用。本发明提供了水稻细条斑病菌HpaG<Sub>xooc</Sub>基因片段hpa...
- 董汉松刘昌来王颖龙菊英陈蕾钱君邹保红李小杰蔡洪生
- 文献传递
