黄毓茂
- 作品数:121 被引量:548H指数:11
- 供职机构:华南农业大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江西省教育厅科学技术研究项目广东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 当前猪病毒性腹泻流行特点与防控建议
- 猪病毒性腹泻是指由猪传染性胃肠炎病毒(TGE)、猪流行性腹泻病毒(PED)和轮状病毒(RV)引起的以急性水样腹泻为特征的疾病总称。2010年底以来,猪病毒性腹泻在中国部分猪场流行,引起大量初生仔猪死亡,导致很大的经济损失...
- 黄毓茂
- 关键词:猪病毒性腹泻流行病学临床病理疾病防控
- 文献传递
- 植物乳杆菌内源性质粒序列分析及其表达载体的构建被引量:3
- 2020年
- 目的:构建乳酸杆菌的表达载体,对菌株携带的质粒进行序列测定和功能分析,并利用自身带有的质粒系统构建乳酸杆菌的表达系统,对乳酸菌口服疫苗的制备起到积极的促进作用。方法:从植物乳杆菌LP3中提取质粒并进行序列测定和功能分析。通过质粒pLP3复制子,与pCPSP载体的氯霉素基因CmR、pUC19的复制子构建大肠杆菌-乳酸菌穿梭质粒。在穿梭质粒的基础上加上嗜酸乳杆菌的S层蛋白启动子PslpA和绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,eGFP)基因,进一步构建乳酸菌表达载体D-pLP3-PslpA-eGFP。结果:从植物乳杆菌LP3中得到一个天然隐蔽性质粒pLP3,该质粒大小为2017 bp,GC含量为37.48%。基于质粒pLP3,构建了大肠杆菌-乳酸菌穿梭质粒D-pLP3,并成功转化至不同类型乳酸菌,转化效率介于0.3×102~1.0×103 CFU/μg(DNA质量计)之间。乳酸菌表达载体D-pLP3-PslpA-eGFP转化至植物乳杆菌,成功获得了荧光蛋白的表达。结论:成功构建了乳酸菌表达载体D-pLP3-PslpA,为乳酸菌基因操作提供了新的工具。
- 方来杉赖强钟泽民黄毓茂
- 关键词:穿梭质粒植物乳杆菌
- 伪狂犬病病毒闽A株gE主要抗原表位基因在大肠杆菌中的克隆与表达被引量:1
- 2002年
- 根据伪狂犬病病毒 Rise毒株 g E基因序列 ,设计合成 1对引物 ,采用 PCR方法 ,从伪狂犬病病毒闽 A株 DNA扩增出 5 5 8bp片段。将该片段克隆到 p UC19质粒中 ,测序正确后再将其克隆到表达质粒 p ET- 2 8a中 ,以 BL 2 1(DE3)为宿主菌 ,在 IPTG诱导下获得了高效表达。经 SDS- PAGE及 Western- blotting鉴定分析 ,表达蛋白大小约 2 30 0 0 ,蛋白薄层扫描分析表明 ,该蛋白约占菌体总蛋白的 30 %。
- 黄毓茂黄培堂费恩阁
- 关键词:GE基因大肠杆菌基因表达抗原克隆
- 猪流行性腹泻病毒主要结构蛋白在杆状病毒中的表达及免疫原性分析被引量:5
- 2014年
- 为了研制一种有效控制猪流行性腹泻的疫苗,本试验设计了两对引物,分别扩增猪流行性腹泻病毒(PEDV)主要抗原表位S1(S蛋白中一个有效的抗原位点)和M蛋白的基因。将两段基因克隆到杆状病毒双表达载体pFastBacTMDuai中,构建了重组转移质粒pFBD-S1-M,并将其转化至DH10BacTM感受态细胞中制备重组穿梭质粒Bacmid-S1-M,转染Sf9昆虫细胞后,拯救出能够共表达S1和M蛋白的重组杆状病毒rBacmid-S1-M。表达产物经过SDS-PAGE和Western blot检测,共表达的重组S1和M蛋白产物能够与PEDV多克隆抗体发生特异性反应,表明共表达的蛋白具有良好的反应原性。本研究为PEDV基因工程亚单位疫苗的研制奠定了基础。
- 谭博敏蒋志琼余希尧钟泽民黄毓茂
- 关键词:猪流行性腹泻病毒抗原表位杆状病毒表达
- 广东省猪群口蹄疫免疫抗体水平调查被引量:4
- 2007年
- 采集广东省不同地区11个猪场的不同类型猪的血清样品3 108份,采用液相阻断-酶联免疫吸附法,以口蹄疫结构蛋白抗体滴度作为评估疫苗效力的指标。本试验共采集种公猪血清样品77份,结果显示平均抗体滴度为(1.859 1±0.078 1,1∶72);仔猪血清样品514份,平均抗体滴度为(1.793 3±0.027 9,1∶62);经产母猪血清样品604份,平均抗体滴度为(1.967 2±0.024 2,1∶92);后备母猪血清样品有1 913份,平均抗体滴度为(1.790 8±0.015 2,1∶61)。从统计结果来看,经产母猪的免疫状态是最好的,但总的来说,猪群的整体免疫水平不高,免疫形势不容乐观,口蹄疫的防治水平仍须提高。
- 崔克罗满林贺东生刘镇明黄毓茂
- 关键词:口蹄疫抗体滴度
- O型口蹄疫病毒VP1基因在毕赤酵母中的表达及免疫原性分析被引量:7
- 2010年
- 利用毕赤酵母系统表达O型口蹄疫病毒VP1基因,并对表达的蛋白进行免疫原性鉴定。将VP1基因克隆入毕赤酵母分泌性表达载体pPICZα-C中,获得重组表达载体pPICZαC-VP1。将重组质粒pPICZαC-VP1线性化后,用电穿孔法转入酵母菌X-33,用Zeocin+YPDS平板筛选重组子,经甲醇诱导表达后,SDS-PAGE和Western blot分析表达产物,并用酵母表达的VP1蛋白免疫小鼠,然后通过ELISA检测抗体水平。结果表明,酵母所表达的VP1蛋白能诱导小鼠产生特异性体液免疫应答。
- 焦颖龚劲峰何校澎黄辉荣刘德辉张春红吴锋黄毓茂
- 关键词:口蹄疫病毒VP1毕赤酵母免疫原性
- 猪传染性胃肠炎疫苗的研究进展
- 猪传染性胃肠炎(Transmissible gastroenteritis,TGE)是由冠状病毒科冠状病毒属猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)引发的一种高度接触传染性的病毒性疾病。本文介绍了常规疫苗和基因工程疫苗等猪传染性胃...
- 吴锋黄毓茂
- 关键词:猪传染性胃肠炎常规疫苗基因工程疫苗
- 文献传递
- 我国南方部分猪场发生高热病的疫情调查初报被引量:6
- 2007年
- 邓衔柏廖明李玉谷范小龙张桂红陈金顶宁章勇辛朝安黄毓茂
- 关键词:高热病调查初报猪场疫情间质性肺炎淋巴结肿大
- 一种猪流行性腹泻重组杆状病毒基因工程亚单位疫苗及其制备方法与应用
- 本发明属于生物疫苗制备技术领域,具体涉及一种猪流行性腹泻重组杆状病毒基因工程亚单位疫苗及其制备方法与应用。本发明选取当前PEDV新流行毒株的S1基因和M基因为参考序列,采用杆状病毒表达系统表达S1蛋白或部分S1蛋白和M蛋...
- 黄毓茂谭博敏项林盛
- 文献传递
- 丝状真菌异源蛋白高效表达的研究进展被引量:5
- 2010年
- 丝状真菌作为细胞工厂在生物技术领域被广泛应用于生产药物、化学试剂和酶类。近年来,丝状真菌基因组学领域取得了快速发展,利用丝状真菌表达异源蛋白也越来越受到重视。本文从基因表达与调控、蛋白质分泌途径及丝状真菌菌株等方面对丝状真菌高效表达异源蛋白的最新研究进展作一综述。
- 刘德辉黄毓茂徐蕙
- 关键词:丝状真菌基因组学蛋白质分泌异源蛋白