黄云梅 作品数:60 被引量:318 H指数:10 供职机构: 福建中医药大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 福建省自然科学基金 陈可冀中西医结合发展基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
解毒消癥饮诱导胃癌细胞凋亡相关基因表达的研究 被引量:9 2010年 目的:探讨中药复方解毒消癥饮对人胃癌细胞凋亡相关基因表达的影响。方法:将人胃癌细胞株BGC-823分成空白对照组及药物干预低、中、高剂量组,分别加入空白对照血清和相应剂量的解毒消癥饮大鼠含药血清,培养24h、48h和72h;免疫荧光染色法检测细胞凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Fas及Fas-L的表达,应用激光共聚焦显微镜观察并做半定量分析;另行电镜制样、观察。结果:胃癌细胞经解毒消癥饮含药血清干预后,Bax、Fas表达明显增加(P<0.05),且随药物浓度增加该趋势更加明显,Fas-L则随药物浓度的增加表达明显减弱(P<0.05);Bcl-2表达量无明显变化。电镜见胃癌细胞出现早期凋亡现象,主要为细胞核异染色质边聚;线粒体嵴消失、基质深染。结论:解毒消癥饮可能通过调控胃癌细胞Bax、Fas及Fas-L等基因,从而促进细胞凋亡,并降低细胞免疫逃逸的功能。 黄云梅 陈文列 胡海霞 黄祖芳 林如辉 黄美雅 郑良朴 杜建关键词:胃癌细胞 凋亡 FAS FAS-L 激光共聚焦显微镜 成骨细胞与破骨细胞共培养及其应用研究进展 被引量:15 2013年 成骨细胞与破骨细胞并非孤立存在,两种细胞存在直接接触、分泌旁分泌因子、细胞与骨基质3种相互作用。成骨细胞与破骨细胞共培养技术有直接接触式、间接接触式2类方式,它能最大程度地模拟体内微环境,有利于研究两细胞间的相互作用,探讨两者失衡在骨质疏松症等骨代谢疾病形成中的作用;细胞共培养应根据病理状态下两细胞的比例选用种属来源一致的细胞。目前该技术主要用于探讨药物防治骨质疏松症的作用机制,已有淫羊藿、三七、补骨脂、雷奈酸锶等既促进成骨细胞骨形成,又抑制破骨细胞骨吸收活性的双重药理作用研究等报道。成骨细胞与破骨细胞共培养的一个新的应用方向,将是应用于软骨下骨重建功能活动的探讨以及中西药干预骨性关节炎的研究。 廖乃顺 陈文列 黄云梅 陈赛楠关键词:成骨细胞 破骨细胞 共培养体系 骨重建 药理作用 健骨颗粒含药血清对体外破骨细胞CAⅡ、CK、MMP-9mRNA表达的影响 被引量:6 2015年 目的通过观察补肾健脾中药健骨颗粒含药血清对体外破骨细胞CAⅡ、CK、MMP-9mRNA表达的影响,进一步揭示健骨颗粒有效防治绝经后骨质疏松症的作用机制。方法用M-CSF和RANKL诱导破骨前体细胞RAW264.7分化为成熟破骨细胞,alamar Blue法检测破骨细胞血清干预的最佳浓度,于破骨细胞培养第7天开始干预,分别用25%浓度的健骨颗粒含药血清和25%浓度的生理盐水血清干预,培养48小时后抽提总RNA,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、实时荧光定量SYBR GREEN法检测CAⅡ、CK、MMP-9mRNA表达,并取骨片行甲苯胺蓝染色,计算分析骨陷窝数和骨吸收面积,同时运用氧化显色法检测破骨细胞培养液中TRAP含量,ELISA法检测骨磨片培养液中CTx含量。结果健骨颗粒含药血清组破骨细胞CAⅡ、CK、MMP-9mRNA表达水平明显低于生理盐水血清组(P<0.05),含药血清组骨磨片的骨陷窝数和骨吸收面积以及TRAP和CTx含量均低于生理盐水血清组(P<0.05)。结论健骨颗粒能有效抑制破骨细胞CAⅡ、CK、MMP-9mRNA表达,降低破骨细胞功能活性,抑制破骨细胞对骨基质的分解,从而抑制骨吸收。 张媛媛 何嘉承 林煜 张文明 黄云梅 吴银生 陈翔 贾晓康 林燕萍关键词:健骨颗粒 破骨细胞 骨吸收 组织蛋白酶K 透骨消痛胶囊的急性毒性实验 被引量:3 2012年 目的观察透骨消痛胶囊的急性毒性反应。方法将小鼠一次性给予不同浓度药物的混悬液,对照组给予同体积的生理盐水。连续观察、记录小鼠的毒性反应情况,于第7 d、14 d取血清进行生化分析,病理检查脏器。结果小鼠的耐受剂量相当于临床剂量的366倍。结论说明透骨消痛胶囊安全性较好。 廖乃顺 陈文列 郑良朴 黄云梅 李孝栋 黄美雅 林如辉 李钻芳 刘献祥关键词:透骨消痛胶囊 急性毒性 肝功能 肾功能 小鼠 健骨颗粒对大鼠骨组织端粒酶逆转录酶增龄性变化的干预作用 被引量:2 2016年 目的:探讨健骨颗粒对雌激素介导的骨组织端粒酶逆转录酶增龄性变化的干预作用。方法:6、7、10、15月龄SD大鼠雌雄各半,6月龄组直接处死取材,其余各组均随机分为健骨颗粒组和生理盐水组,雌雄各半,灌胃3个月后处死取材。左侧股骨行X线摄片。第5腰椎行HE染色及图像分析。ELISA法检测血清中的BGP、TRACP5b、E2、T和TNF-α含量。SYBR GREEN法检测第1腰椎中TERT、ER和NF-κB m RNA表达。Western blot法检测第2腰椎TERT、ERα蛋白的表达。结果:血清中BGP、TRACP5b、E2、T随月龄增大降低,且生理盐水组低于健骨颗粒组(P<0.01,P<0.05)。TNF-α随着月龄增大逐渐升高,生理盐水组高于健骨颗粒组(P<0.01,P<0.05)。骨组织中ERα、TERT m RNA与蛋白表达均随月龄的增长而降低,生理盐水组明显低于健骨颗粒组(P<0.01,P<0.05)。NF-κB的m RNA表达随月龄增长逐渐升高,且生理盐水组明显高于健骨颗粒组(P<0.01)。腰椎椎体及股骨头骨小梁随月龄增加逐渐出现骨质疏松的病理形态改变,且生理盐水组较健骨颗粒组明显(P<0.01)。结论:健骨颗粒能在一定程度上提高大鼠体内E2、T水平,从而有效激活骨组织TERT使成骨细胞端粒酶活性增加,减缓成骨细胞凋亡进程。 林煜 张怡元 黄云梅 吴银生 林燕萍关键词:健骨颗粒 端粒酶逆转录酶 雌激素受体Α 增龄 壮骨关节丸干预骨性关节炎模型的超微结构观察 目的:骨性关节炎为中老年常见骨关节疾病,通过观察中成药壮骨关节丸干预骨性关节炎模型的超微结构的变化,探讨壮骨关节丸治疗骨性关节炎的作用机理。方法:通过采用改良Hulth法造大白兔膝关节骨性关节炎模型。实验分组及干预措施:... 林如辉 陈文列 刘献祥 黄云梅 肖承滢 黄美雅关键词:骨性关节炎 壮骨关节丸 软骨 软骨下骨 超微结构 文献传递 透骨消痛胶囊对早期骨关节炎软骨细胞超微结构与软骨基质的影响 被引量:6 2017年 目的:观察透骨消痛胶囊对大鼠早期骨关节炎模型软骨细胞超微结构及软骨基质的影响。方法:24只雄性大鼠按照体质量随机分成正常组、模型组、中药组,每组8只。采用膝关节腔注射木瓜蛋白酶建立骨关节炎大鼠模型,给予透骨消痛胶囊水溶液干预4周后处死大鼠,取股骨髁关节软骨进行电镜和光镜制样,观察软骨细胞显微、超微结构;组织化学法定量软骨基质蛋白多糖、Ⅱ型胶原含量。结果:软骨细胞超微结构观察,与正常组比较,模型组软骨细胞增生、簇聚,细胞器大量减少或肿胀;与模型组比较,中药组软骨细胞聚集减少,粗面内质网、高尔基复合体、线粒体等细胞器数量增多。软骨基质含量检测发现,与正常组比较,模型组蛋白多糖和Ⅱ型胶原含量均显著降低(P<0.01);与模型组比较,中药组蛋白多糖和Ⅱ型胶原含量均显著升高(P<0.01)。结论:透骨消痛胶囊可减轻早期骨关节炎软骨细胞变性、内质网和线粒体等损伤,增加软骨基质合成,从而延缓骨关节炎软骨退变。 卢小冬 林如辉 陈文列 冯芳芳 黄云梅 黄美雅关键词:透骨消痛胶囊 骨关节炎 软骨细胞 细胞器 软骨基质 比较3种形态学方法观察成骨细胞矿化结节的应用价值 被引量:8 2014年 背景:矿化结节是成骨细胞分化成熟的标志,以往观察方法多采用茜素红等特殊染色法。目的:比较茜素红染色-光镜、四环素荧光标记-激光扫描共聚焦显微镜、扫描电镜3种形态学观察成骨细胞矿化结节的方法,分析各自的特点及在骨病研究中的应用价值。方法:将大鼠成骨细胞株UMR-106正常培养、每天换液,连续培养14 d,分别采用茜素红染色-光镜、四环素荧光标记-激光扫描共聚焦显微镜、扫描电镜观察矿化结节的形态结构,并利用扫描电镜结合能谱仪原位定量分析钙元素;此外,在培养中加入可抑制成骨细胞增殖、分化的肿瘤坏死因子α作为对照实验。结果与结论:3种观察方法均可观察到正常成骨细胞矿化结节的形态结构。对于肿瘤坏死因子α抑制成骨细胞产生矿化结节的情况,经茜素红染色-光镜观察法,未见明显的矿化结节;而四环素荧光染色-激光扫描共聚焦显微镜观察法,可见清晰、稀少的矿化结节;扫描电镜观察法明显可见较少而细小的矿化结节,提示后二种方法灵敏度较高。此外,扫描电镜可将观察成骨细胞分泌钙质、形成矿化结节的亚细胞结构,与能谱元素分析结合,可实现矿化结节的定位与定量,在骨病研究中值得推广应用。 廖乃顺 李钻芳 林如辉 陈文列 黄云梅 黄美雅关键词:成骨细胞 矿化结节 扫描电镜术 能谱分析 国家自然科学基金 补肾壮筋汤抑制炎性细胞因子表达延缓骨关节炎软骨退变的研究 被引量:38 2014年 目的:探讨补肾壮筋汤抑制炎性细胞因子表达延缓骨关节炎软骨退变的作用机制。方法:8周龄SD大鼠40只,随机分为正常组(10只)和造模组(30只)。造模组予质量分数4%木瓜蛋白酶复制骨关节炎模型后,随机分为模型对照组、补肾壮筋汤组、阳性对照组,每组10只。正常组常规喂养,模型对照组以生理盐水灌胃,补肾壮筋汤组以10.5 g·kg-1·d-1补肾壮筋汤灌胃,阳性对照组以150 mg·kg-1·d-1盐酸氨基葡萄糖胶囊溶液灌胃,每日1次,持续给药12周。采用HE、番红O-固绿染色观察软骨形态结构的变化,ELISA法检测关节液中基质金属蛋白酶-3、白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α、透明质酸含量的变化。结果:软骨基质中蛋白多糖含量、胶原纤维的变性程度、软骨退变程度,补肾壮筋汤组与阳性对照组明显好于模型对照组。关节液中白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α、基质金属蛋白酶-3的含量,补肾壮筋汤组与阳性对照组明显低于模型对照组(P<0.05);关节液中透明质酸的含量,补肾壮筋汤组与阳性对照组明显高于模型对照组(P<0.05)。结论:补肾壮筋汤通过抑制炎性细胞因子表达,延缓骨关节炎的软骨退变。 李西海 梁文娜 党传鹏 叶蕻芝 郑春松 吴广文 许惠凤 朱晓勤 郑良朴 黄云梅 陈文列 刘献祥关键词:骨关节炎 软骨退变 炎性细胞因子 补肾壮筋汤 健骨颗粒通过G_1/S期调控蛋白对成骨细胞增殖的影响 被引量:3 2016年 目的观察健骨颗粒对成骨细胞G_1/S期调控的影响,探讨健骨颗粒促进成骨细胞增殖的作用机制。方法制备健骨颗粒血清组、模型血清组和雌二醇血清组。采用酶消化法培养SD大鼠成骨细胞,健骨颗粒含药血清干预,以模型血清和雌二醇血清为对照。运用流式细胞术检测成骨细胞增殖周期,荧光定量PCR法检测成骨细胞G_1/S期调控蛋白Cyclin E、CDK2、p21和转录因子E2F-1 m RNA的表达。结果 15%的雌二醇血清与健骨颗粒血清干预48 h,成骨细胞增殖速度均明显快于模型血清组(P<0.01);G_0/G_1期成骨细胞比例明显降低(P<0.01),S期、G_2/M期细胞比例及增殖指数则明显高于模型血清组(P<0.01);与模型血清组比较,雌二醇血清组与健骨颗粒血清组能提高成骨细胞Cyclin E、CDK2及转录因子E2F-1 m RNA的表达(P<0.01),而降低p21的表达(P<0.01)。结论健骨颗粒通过调节成骨细胞G_1/S期调控机制,推进成骨细胞顺利通过G_1/S检测点,促进成骨细胞增殖。 贾晓康 黄云梅 李超雄 林煜 林向全 黄美雅 吴银生关键词:绝经后骨质疏松症 成骨细胞 健骨颗粒