魏立
- 作品数:39 被引量:107H指数:6
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- 抑制SDF-1活性对人急性髓性白血病HL-60细胞系增殖的影响被引量:7
- 2004年
- 本研究通过观察抑制SDF 1活性对HL 6 0细胞增殖活性的影响 ,探讨趋化因子SDF 1在维持HL 6 0细胞生存能力中的作用。培养骨髓基质细胞 ,并与HL 6 0细胞共培养 ,采用SDF 1受体CXCR4单克隆抗体阻断SDF 1生物活性后 ,用MTT法检测HL 6 0细胞活力、用流式细胞术观察HL 6 0细胞增殖周期变化、检测细胞膜表面CXCR4表达 ,同时检测CXCR4单克隆抗体应用前后HL 6 0细胞内钙离子浓度变化。结果显示 ,抗CXCR4单克隆抗体可下调HL 6 0细胞膜表面CXCR4的表达 ,同时处于G0 /G1期的细胞增多 ,处于S期的细胞减少 ,而白血病细胞存活率下调 ,细胞内钙离子浓度降低。结论 :抑制SDF
- 魏立孔佩艳陈幸华彭贤贵常城曾东风刘红刘林王庆余张怡
- 关键词:SDF-1HL-60细胞CXCR4白血病
- 抗CXCR4单克隆抗体12G5对HL-60细胞粘附及增殖的影响
- 目的:近年研究发现,骨髓基质细胞分泌的趋化因子SDF-1通过其分布于白血病细胞膜表面的生理性受体CXCR可能参与了白血病细胞的髓内屏蔽,然而,SDF-1/CXCR系统与白血病细胞之间的相互关系尚不清楚,因此,本研究采用抗...
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- 文献传递
- 急性白血病骨髓基质细胞表达SDF-1异常被引量:2
- 2005年
- 杨文博魏立孔佩艳常城曾东风彭贤贵史占忠刘红刘林陈幸华王庆余
- 关键词:急性白血病骨髓基质细胞基质细胞衍生因子-1细胞培养
- HLA-A~*0201/WT1五聚体联合胞内IFNγ染色在检测白血病患者外周血WT1特异性T细胞中的应用
- 2010年
- 本研究探讨五聚体及胞内因子染色在定性定量检测抗原特异性T细胞中的应用价值。用RT-PCR方法检测受试者WT1表达水平;用HLA-A*0201/WT1五聚体及胞内IFNγ染色检测14例表达HLA-A*0201的白血病患者全相合移植前后及其供者外周血中的WT1特异性T细胞。结果表明:14例供者中2例有低水平WT1表达,白血病患者均有不同水平的WT1表达。14例供者均未检测到WT1+CD8+CTL和WT1+IFNγ+细胞;移植前14例患者中2例可检出WT1+CD8+CTL,3例检出WT1+IFNγ+细胞,二者间无明显差异(p=0.357),而移植后均可检出WT1+CD8+CTL和WT1+IFNγ+细胞,明显高于移植前(p值均<0.01)。移植后大部分患者均在30天内检出WT1+CD8+CTL和WT1+IFNγ+细胞,但后者检出率高于前者(p=0.014)。14例患者中WT1+CD8+CTL峰值中位数为0.18%,而WT1+IFNγ+细胞峰值中位数为0.83%,明显高于前者(p=0.005);WT1+CD8+CTL峰值中位时间为移植后75天,WT1+IFNγ+细胞峰值中位时间为移植后105天,但二者间无明显差异(p=0.455)。结论:五聚体及胞内IFNγ染色能有效检测白血病患者外周血中白血病抗原特异性T细胞;两种方法联合检测有助于抗原特异性T细胞的准确定性定量检测。
- 魏立孙雪东左洪莉刘铁强郭梅刘广贤孙琪云乔建辉王丹红余长林胡凯勋董征艾辉胜
- 关键词:白血病
- 异基因非清髓造血干细胞移植后WT1特异性T细胞亚群与移植物抗宿主病的关系被引量:1
- 2011年
- 目的探讨非清髓造血干细胞移植后WT1诱发的各T细胞亚群与移植物抗宿主病(GVHD)之间的关系。方法分析19例表达WTI的白血病患者在全相合非清髓造血干细胞移植后GVHD的发生情况;WT1126—134体外刺激患者外周血单个核细胞,采用胞内因子染色法(ICCS)检测移植前后外周血中Tc1、Tc2、Th1及Th2细胞;对供受者表达HLA—A*0201的14例患者采用HLA—A*0201/WTI五聚体检测外周血中的WT1^+CD8^+细胞毒性T淋巴细胞(CTL)。结果①19例患者中,17例并发GVHD,其中16例在GVHD发生时出现以Tc1及Th1细胞为主的高峰(P=0.039)。②Ⅱ度以上急性GVHD(aGVHD)患者在GVHD发生时Te1及Th1细胞峰值水平均高于Ⅰ度aGVHD者,但差异无统计学意义(P=0.900及P=0.140)。③弥漫型慢性GVHD(cGVHD)患耆Tc1及Th1细胞峰值水平明显高于局限型cGVHD者,但仅Th1细胞峰值水平差异具有统计学意义(P=0.004),而Tc1细胞峰值水平差异无统计学意义(P=0.060)。④未并发GVHD者Tc1、Th1及WT1^+CD8^+CTL峰值水平接近于轻度aGVHD患者的平均水平,但低于中重度aGVHD患者的平均水平。结论GVHD发生时WT1诱发的移植物抗白血病(GVL)效应增强,其强度与GVHD尤其是cGVHD发生的严重程度相关;相对于局限型cGVHD患者,弥漫型cGVHD患者WT1诱发GVL效应的增强可能与Th1细胞有关。
- 魏立左洪莉刘铁强孙雪东郭梅刘广贤孙琪云乔建辉王丹红余长林胡凯勋董征艾辉胜
- 关键词:造血干细胞移植T细胞亚群移植物抗宿主病
- 抗CXCR_4单克隆抗体对与正常骨髓基质细胞共培养的HL-60细胞增殖活性的影响被引量:3
- 2004年
- 目的:本文通过抗CXCR4单克隆抗体12G5阻断SDF-1活性,检测增殖相关指标,探讨SDF-1在维持HL-60细胞存活、增殖中的作用。方法:培养HL-60细胞并与正常骨髓基质细胞共培养,采用12G5(10μg/ml)阻断SDF-1生物学活性。孵育24h后,通过流式细胞仪观察HL-60细胞增殖周期的变化,免疫组化染色检测其PCNA蛋白表达的变化,并通过台盼蓝拒染观察白血病细胞存活、增殖的变化。结果:1)实验纽中G0/G1期细胞比例为(56.71±4.9)%,S期为(32.42±4.1)%,G2/M期为(10.87±5.2)%;对照组中G0/G1期细胞比例为(43.63±2.2)%,S期为(45.86±3.7)%,G2/M期为(10.51±2.6)%。2)台盼蓝拒染显示,12G5抑制HL-60细胞的存活及增殖。3)免疫组化染色结果显示,实验组及对照组中PCNA阳性细胞率分别为(42.1±3.9)%和(67.4±8.5)%。结论:SDF-1可在一定程度上维持HL-60细胞的存活及增殖进程。
- 魏立孔佩艳陈幸华彭贤贵曾东风常城杨文博刘红刘林王庆余张怡
- 关键词:HL-60细胞增殖抗CCXCR4
- 抗CXCR4单克隆抗体对HL-60细胞粘附性及Bcl-2、Fas蛋白表达的影响被引量:11
- 2004年
- 本研究通过观察抗CXCR4单克隆抗体 (12G5 )对HL 6 0细胞粘附性及Bcl 2、Fas蛋白表达的影响 ,探讨趋化因子SDF 1在维持HL 6 0细胞生存中的作用。培养HL 6 0细胞 ,并再与骨髓基质细胞共培养 ,在抗CXCR4单克隆抗体阻断SDF 1生物活性后 ,观察骨髓基质层上HL 6 0细胞的粘附情况并测定其粘附率 ;应用免疫组织化学技术检测HL 6 0细胞Bcl 2及Fas蛋白的表达。结果显示 ,12G5显著降低HL 6 0细胞的粘附率 ,与此同时Bcl 2表达下调 ,Fas表达上调。结论 :抑制SDF 1活性可一定程度地阻抑白血病细胞生存 ,促进凋亡。
- 魏立孔佩艳陈幸华彭贤贵常城曾东风刘红刘林王庆余张怡
- 关键词:SDF-1细胞粘附性
- RNA干扰骨髓基质细胞衍生因子表达对共培养Jurkat细胞增殖及凋亡的影响被引量:5
- 2005年
- 目的探讨阻抑骨髓基质细胞衍生因子(SDF1)表达对与其共培养的Jurkat细胞增殖、凋亡的影响。方法脂质体介导SDF1特异性RNA干扰质粒转染培养的急性白血病骨髓基质细胞,G418筛选阳性克隆(A组),采用ELISA法检测SDF1表达变化;与Jurkat细胞共培养,绘制生长曲线并计算倍增时间,用流式细胞术检测细胞周期,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺失末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡,免疫细胞化学检测增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl2、Bax、Fas、FasL表达。以未转染急性白血病骨髓基质细胞(B组)及正常骨髓基质细胞(C组)作为对照。结果A组骨髓基质细胞培养上清SDF1含量为(384±41)pg/ml,较B组[(2474±271)pg/ml]、C组[(1324±154)pg/ml]明显降低。与之共培养的Jurkat细胞,A组与B组、C组比较,细胞增殖速度减缓,倍增时间延长(A组42h,B组29h,C组33h);细胞周期分析G0/G1期细胞比例增多[A组(28.47±2.39)%,B组(19.43±2.80)%,C组(27.15±2.07)%],S期细胞减少[A组(25.57±1.90)%,B组(74.48±3.23)%,C组(60.99±2.33)%],G2/M期细胞增多[A组(45.96±3.24)%,B组(6.09±1.96)%,C组(11.86±1.98)%];细胞凋亡率增加[A组(15.2±0.8)%,B组(5.4±0.7)%,C组(9.5±0.4)%];PCNA、Bcl2、Fas表达减少,Bax、FasL表达增多。结论阻抑SDF1表达在一定程度上抑制与骨髓基质细胞共培养的Jurkat细胞的增殖活性,并促进其凋亡。
- 杨文博孔佩艳常城魏立曾东风彭贤贵史占忠刘红刘林陈幸华王庆余
- 关键词:骨髓基质细胞基质细胞衍生因子RNA干扰增殖
- 血清LDH水平判断急性白血病疗效的评价分析被引量:3
- 2004年
- 目的 探讨血清中乳酸脱氢酶 (LDH)水平与急性白血病 (AL)疗效的关系。方法 回顾性分析 72例初治急性白血病患者化疗前、缓解后、复发后血清LDH水平的变化及初治时外周血白细胞计数、骨髓原始 +早幼粒细胞或幼稚淋巴细胞比例。结果 初治急性白血病LDH活性明显增高 ,且与外周血白细胞数量、骨髓原始 +早幼粒细胞或幼稚淋巴细胞数呈正相关 ;达完全缓解后血清LDH水平降至正常范围 ,达部分缓解时血清LDH水平较化疗前明显下降 ,复发时血清LDH再次增高。结论 (1 )LDH可作为代表全身白血病细胞负荷的一项重要指标 ;(2 )化疗前AL患者血清LDH水平可作为AL疗效判断的一项可靠参考指标。
- 魏立孔佩艳刘红
- 关键词:急性白血病血清乳酸脱氢酶疗效
- 基质细胞衍生因子-1和受体CXCR4在急性白血病和恶性淋巴瘤中的表达被引量:10
- 2005年
- 目的分析急性白血病(AL)和恶性淋巴瘤(ML)患者外周血血清基质细胞衍生因子1(SDF1)及其骨髓单个核细胞(MNC)表面特异性受体CXCR4的表达,并进行对照研究。方法ELISA法检测血清中SDF1表达,流式细胞术检测骨髓MNC表面CXCR4的表达。结果26例AL患者包含9例急性淋巴细胞白血病和17例急性非淋巴细胞白血病,其SDF1、CXCR4表达分别为(7115.8±946.5)ng/L、(77.2±9.7)%和(4642.2±1146.8)ng/L、(38.9±11.0)%;18例ML患者包含5例霍奇金淋巴瘤和13例非霍奇金淋巴瘤,其SDF1、CXCR4表达分别为(3728.9±690.9)ng/L、(9.2±2.7)%和(4442.1±1073.0)ng/L、(8.5±2.4)%,上述各组SDF1/CXCR4表达均高于对照组水平(2369.3±966.5)ng/L、(2.7±1.5)%(P<0.01)。有髓外浸润的AL患者其SDF1/CXCR4的表达水平高于同组其他患者,有广泛浸润的ML患者其SDF1的表达水平高于同组其他患者。结论CXCR4/SDF1的高表达与AL和ML的发病及其浸润特性存在一定联系,为上述肿瘤的治疗提供了新思路。
- 曾东风孔佩艳陈幸华魏立常诚彭贤贵
- 关键词:基质细胞衍生因子-1受体CXCR4急性白血病恶性淋巴瘤ML间质细胞