高书颖
- 作品数：44 被引量：69H指数：5
- 供职机构：遵义医学院珠海校区更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 基于实践的细胞生物学的教学分析
- 2013年
- 细胞生物学一直是我国的一种主要的生命科学,在高中和大学里面被专门教授,经过多年的摸索归纳,我国的生物学教学理论已经趋于完善,但是在实践教学方面还有很大的欠缺,本文以细胞生物学为载体,着重对提高我国生物科学实践教学效果做简要的分析。
- 高书颖
- 关键词：细胞生物学教学效果
- 临床医学专业生物化学的教学实践与体会
- 2015年
- 生物化学作为临床医学专业的一门专业基础课程,其内容抽象繁杂、知识更新速度较快、结构式和代谢通路多,难理解,难记忆,学习难度大,为了提高教学质量,调动学生学习的积极性和主动性,在教材选择、教学内容、学习方法、教学方法等方面谈谈在多年教学工作中的几点体会。
- 邵敏高书颖杨愈丰王燕吕延成钟世军
- 关键词：生物化学教学
- 携带hTERT基因的重组慢病毒载体的构建及鉴定
- 采用Gateway技术构建重组慢病毒载体pLenti6.3/V5-hTERT;将重组慢病毒载体与病毒包装质粒混合物pLPl、pLP2和pLP/VSVG共转染人胚肾293FT细胞,制备重组慢病毒颗粒;将重组慢病毒感染HeL...
- 高书颖于洁
- 关键词：人端粒酶逆转录酶基因重组慢病毒
- 文献传递
- 食管癌细胞中fascin基因启动子区的克隆与初步鉴定被引量：2
- 2007年
- 目的:对食管癌细胞中fascin基因启动子区进行克隆鉴定.方法:应用PCR技术从食管癌细胞系EC109中扩增出fascin基因5′侧翼区5段不同长度的片段,并将其克隆至萤火虫荧光素酶报告基因表达载体pGL3-Basic(pGLB)中,然后将这些质粒与对照质粒pGLB、内参照质粒pRL-TK共转染EC109细胞,48h后用双荧光素酶检测系统分析这些重组子报告基因转染细胞的相对荧光强度,并结合生物信息学分析,以判断fascin基因启动子区所在位置.结果:用DNA重组技术成功构建了5个系列缺失重组荧光素酶报告基因表达载体.相对荧光素酶活性检测表明,与对照组相比,上述一系列重组质粒转染细胞均显示出较高的荧光素酶活性.生物信息学分析发现,在启动子区(-436^+1)有标志性调控元件TATA盒(-34^-29).结论:在食管癌细胞中fascin基因的启动子区可能位于转录起始位点上游约436bp的区段内.
- 杨章民郭张燕许丽艳高书颖谢剑君李恩民
- 关键词：食管肿瘤启动子荧光素酶类报告基因
- hBMP-3m基因在烟草中的表达
- 2003年
- PCR扩增人骨形成蛋白-3成熟肽 hBMP-3m cDNA,纯化后连接入pUC19质粒,构建克隆载体pUC19B3m;用EcoR 和Hind 酶解pUC19B3m和pJIT163,将目的片段插入pJIT163,构建中间载体pJIT163-B3m;再构建植物表达载体pCAMBIA1300-B3m.利用冻融法将质粒pCAMBIA-hBMP3m转入根癌农杆菌 A-grobacteriumtumefaciens LBA4404.以烟草 NicotianatabacumL. 无菌苗叶盘为外植体,通过根癌农杆菌介导法进行遗传转化,获得了在含25mg/L潮霉素 Hygromycin,Hyg 的筛选培养基上再生的抗性植株,经PCR证实其中部分植株已将人骨形成蛋白-3成熟肽基因整合到烟草基因组中,WesternBlot结果表明已有微量BMP表达.
- 高书颖范三红郭蔼光朱帮福陈苏民
- 关键词：基因表达烟草根癌农杆菌介导法
- 携带hTERT基因的重组慢病毒载体的构建
- 端粒酶与肿瘤发生和细胞衰老有关,利用分子生物学技术,将外源人端粒酶逆转录酶(human telomerase rcVcrse transcriptase,hTERT)基因导入低表达或不表达hTERT的细胞中,提高细胞内h...
- 于洁高书颖
- 关键词：人端粒酶逆转录酶基因重组慢病毒
- 文献传递
- 人食管癌细胞ezrin基因上游转录调控元件
- 本发明涉及基因表达调控，公开了一种人食管癌细胞ezrin基因的上游转录调控区。本发明首次将ezrin基因上游序列插入含报告基因的载体构建了一系列真核表达质粒，转染哺乳动物细胞瞬时表达，确定了人ezrin基因上游序列在食管...
- 许丽艳高书颖李恩民
- 文献传递
- 人食管癌细胞ezrin基因上游转录调控元件
- 本发明涉及基因表达调控，公开了一种人食管癌细胞ezrin基因的上游转录调控区。本发明首次将ezrin基因上游序列插入含报告基因的载体构建了一系列真核表达质粒，转染哺乳动物细胞瞬时表达，确定了人ezrin基因上游序列在食管...
- 许丽艳高书颖李恩民
- 文献传递
- 转录因子Sp1和Sp3对食管癌细胞ezrin基因的表达调控作用被引量：3
- 2009年
- 目的:明确转录因子Sp1和Sp3对食管癌细胞ezrin基因的表达调控作用。方法:将转录因子表达载体CMV-Sp1和CMV-Sp3分别转染食管癌EC109细胞,采用定量RT-PCR和Western blot技术检测过表达转录因子Sp1和Sp3对ezrinmR-NA和蛋白表达的影响;将ezrin基因启动子驱动的报告基因表达载体与内参照质粒pRL-TK和转录因子表达载体共转染EC109细胞,采用双荧光素酶报告基因分析系统检测转录因子Sp1和Sp3对ezrin基因启动子的激活作用以及这种激活作用是否依赖于ezrin基因的Sp1结合位点-75/-69。结果:过表达转录因子Sp1和Sp3显著提高EC109细胞ezrinmRNA和蛋白表达水平以及启动子活性。Sp1和Sp3增强ezrin基因启动子活性的作用位点不同,只有Sp1通过-75/-69位点调控ezrin基因启动子活性。结论:转录因子Sp1和Sp3可调控EC109细胞ezrin基因的表达。
- 高书颖李恩民杜则澎陆晓峰许丽艳
- 关键词：EZRIN基因食管癌细胞转录因子
- Ezrin增强子敲除可抑制人食管癌Eca-109细胞的增殖和迁移被引量：3
- 2019年
- 目的:探讨ezrin增强子敲除对食管癌Eca-109细胞ezrin基因表达、细胞增殖和迁移的影响。方法:将靶向ezrin增强子上、下游的CRISPR/Cas9重组质粒共转染食管癌Eca-109细胞,经嘌呤霉素筛选,获得敲除ezrin增强子的细胞株Eca-C2。用qPCR和Western blotting分别检测敲除ezrin增强子的Eca-C2细胞中ezrin mRNA和蛋白的表达,用蛋白芯片技术检测MAPK通路相关蛋白的表达,用WST-1法和细胞划痕愈合实验分别检测ezrin增强子敲除对Eca-C2细胞增殖和迁移能力的影响。结果:成功构建稳定敲除ezrin增强子的食管癌细胞株Eca-C2;与对照细胞相比,ezrin增强子敲除细胞ezrin mRNA和蛋白的表达水平均明显降低(均P<0.05)。Eca-C2细胞中17种被检测的MAPK通路相关蛋白中有9种(AKT、CREB、GSK3b、MKK6、m TOR、P38、P53、P70S6K和RSK1)表达下调,ezrin增强子敲除后细胞的增殖和迁移能力受到明显抑制(均P<0.05)。结论:在人食管癌Eca-109细胞中,敲除ezrin增强子可明显抑制细胞的增殖和迁移。
- 雷悦野庆松卫金岐李文娜莫镇涛张青峰高书颖
- 关键词：食管癌ECA-109细胞增殖迁移
