马广源
- 作品数：13 被引量：74H指数：5
- 供职机构：山西医科大学基础医学院医学寄生虫学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山西省自然科学基金山西高校科技研究开发项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- STAg联合ESA鼻内免疫小鼠对弓形虫垂直传播的阻断作用被引量：3
- 2008年
- 观察弓形虫可溶性速殖子抗原(Soluble tachyzoite antigen,STAg)与排泄-分泌抗原(Excreted/secreted antigens,ESA)单独或联合鼻内免疫小鼠对弓形虫垂直传播的阻断作用。分别用PBS 20μL和STAg 20μg、ESA 20μg及联合抗原(STAg 10μg+ESA 10μg)鼻内免疫BALB/c处女鼠2次,间隔2周。末次免疫后第13天处女鼠与雄鼠以2∶1同居。妊娠第8天用弓形虫速殖子(8000个/只)灌胃攻击所有孕鼠。妊娠第18天处死,计算活胎率,并测定孕鼠肝、胎盘和胎鼠脑组织弓形虫抗原和孕鼠脾组织内虫荷,同时测定孕鼠小肠冲洗液SIgA、血清IgG水平。结果表明,ESA组和联合抗原组活胎率显著高于PBS组,STAg组、ESA组和联合抗原组胎盘及胚胎感染率均低于PBS组,联合抗原组最低。孕鼠在弓形虫速殖子攻击后,PBS组明显出现竖毛、倦怠、腹部塌陷等异常表现,感染率为100%,死亡率为22.22%,而STAg组、ESA组和联合抗原组有轻微症状,感染率分别为85.71%、57.14%、57.14%,死亡率分别为16.67%、0%、0%。STAg组、ESA组和联合抗原组脾组织内虫荷均显著低于PBS组,减虫率分别为72.19%、72.29%、78.45%,ESA组和联合抗原组小肠冲洗液特异性SIgA均显著高于PBS组,联合抗原组最高,血清特异性IgG抗体水平差异不显著。由此可见,ESA单独或与STAg联合免疫可诱导孕鼠小肠液高水平SIgA,显著降低脾组织虫荷,显著提高胚胎存活率,表现出明显的垂直传播阻断的作用。
- 王海龙唐旭殷国荣孟晓丽马广源
- 关键词：弓形虫可溶性速殖子抗原排泄分泌抗原
- 幽门螺杆菌与胃上皮细胞不同作用时间点蛋白质组的差异分析被引量：5
- 2008年
- 目的:分析幽门螺杆菌(Hpylori)与人胃腺癌上皮细胞(humangastric adenocarcinoma epithelial,AGS)的相互作用蛋白质组学差异.方法:采用双向凝胶电泳分离Hpylori26695株与AGS细胞相互作用0.5、2、4h时间点的细胞和黏附菌的全蛋白样品,考马斯亮兰染色,ImageMster2D图像分析软件比较分析,识别差异蛋白,将差异蛋白点进行胶内酶解,经基质辅助电离解析飞行时间质谱(MALDI-TOF-TOF/MS)获得肽质量指纹图谱(PMF),通过搜寻蛋白质数据库完成对差异蛋白的鉴定.结果:对0.5、2、4h时间点图谱差异蛋白点分析共发现主要差异蛋白点66个,对其中34个(共对应16种蛋白)最终完成准确鉴定,2h后8种蛋白开始上调,其中2种是细胞来源,6种Hpylori来源;4h时4种细胞来源蛋白下调,并有4种新的蛋白开始被观察到.在共感染的早期,细胞的琥珀酸脱氢酶、Hpylori的抗氧化酶类、黏附素以及HSP60表达上调.感染晚期主要是细胞来源的亲环素A、新生多肽相关复合物α多肽开始表达,Hpylori来源的尿素酶、非血红素铁蛋白等蛋白明显出现在黏附菌成分中.结论:Hpylori与AGS细胞相互作用过程中,细菌和细胞蛋白表达均存在明显时序性变化,早期相互作用则主要表现为以与黏附等有关的蛋白表达变化,后期向有利细菌存活和增殖的方向发展,并呈现出与免疫逃逸和病理损伤相关的变化.
- 宋衍燕赵飞肖迪马广源孟凡亮何丽华张建中
- 关键词：幽门螺杆菌共培养蛋白质组
- 蛋白质组学技术及其在弓形虫研究中的应用
- 近十几年来,随着人类基因组序列草图的完成和几十种生物全基因组测序的结束。研究重心将从揭示生命的遗传信息转到对功能方面的研究。本文论述了蛋白质组学的研究方法、蛋白质组学研究的主要内容以及蛋白质组学技术在弓形虫研究中的应用。
- 马广源张建中殷国荣
- 关键词：蛋白质组学技术弓形虫防病机制寄生虫病
- 文献传递
- 弓形虫可溶性速殖子抗原的免疫原性蛋白质组学分析
- 目的:刚地弓形虫是人和动物感染率极高的一种机会致病原虫，其中速殖子阶段是主要的致病阶段。速殖子的大规模全蛋白质组学分析仍然还在进行，但目前尚无弓形虫的完全蛋白质组图。所以本研究应用蛋白质组学技术分析刚地弓形虫可溶性速殖子...
- 马广源
- 关键词：弓形虫蛋白质组学免疫原性
- 文献传递
- 弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫小鼠诱导的特异性抗体动态观察被引量：19
- 2007年
- 目的观察弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫BALB/c小鼠后诱导的血清IgG、粪便和鼻咽冲洗液中IgA特异性抗体动态,探讨其抗弓形虫感染作用机制。方法96只BALB/c小鼠随机分为实验组和对照组,实验组以弓形虫复合黏膜疫苗(20μl/只)滴鼻免疫,对照组以PBS滴鼻。分别于滴鼻2次(间隔2周)后第1、2、3、4、6、8、10和12周处死小鼠,收集血清、粪便及鼻咽冲洗液,采用ELISA法检测血清IgG以及粪便和鼻咽冲洗液中IgA抗体。结果实验组小鼠血清IgG、粪便及鼻咽冲洗液中IgA均高于对照组,血清IgG水平第3周达高峰,第14、6和8周显著高于对照组;粪便IgA抗体第2周达高峰,第2、3和4周显著高于对照组;鼻咽冲洗液中IgA第1周即达高峰,之后逐渐降低,至第12周仍显著高于对照组。结论弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫BALB/c小鼠可诱导高水平的特异性抗体,且可持续较长时间。
- 孟晓丽殷国荣杨亚波唐旭吴静马广源
- 关键词：刚地弓形虫黏膜疫苗滴鼻免疫
- 经口感染弓形虫垂直传播小鼠模型的建立被引量：3
- 2006年
- 目的建立经口感染弓形虫RH株速殖子垂直传播小鼠模型。方法将54只妊娠0天的BALB/c孕鼠随机分为6组,于妊娠第8天,分别用0,1000,2000,4000,8000,16000个弓形虫速殖子灌胃感染,妊娠第18天处死,记录活胎率,测定母鼠肝、胎盘和胎仔脑组织弓形虫抗原。结果经ELISA检测弓形虫循环抗原证实,孕鼠死亡率与胎盘和胚胎感染率均随感染剂量的增加而升高,而活胎率下降。1000,2000组的胎盘、胚胎未发生感染,4000组的胚胎感染率5.13%,16000组的胚胎感染率20.00%,但孕鼠的健康状况差、死亡率高,均不适宜建立弓形虫垂直传播动物模型。综合分析表明,8000组孕鼠既有较高的存活率,又可保证胎盘和胚胎较高的感染率。结论每只孕鼠灌胃感染8000个速殖子为建立弓形虫垂直传播小鼠模型的适宜剂量。
- 唐旭王海龙殷国荣马广源杨亚波陈柳妹张劼
- 关键词：弓形虫病小鼠妊娠
- 弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫小鼠诱导的脾淋巴细胞持续性免疫应答被引量：5
- 2006年
- 目的观察弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫BALB/c小鼠后诱导的脾淋巴细胞的免疫应答及持续时间。方法96只BALB/c小鼠随机分为免疫组和对照组,免疫组以弓形虫复合黏膜疫苗20μl/只(20μg可溶性速殖子抗原+1μg霍乱毒素)滴鼻免疫2次(间隔2周),对照组以PBS滴鼻。分别于末次滴鼻后第1,2,3,4,6,8,10,12周处死小鼠,脾淋巴细胞计数,免疫细胞化学法检测CD4+、CD8+T细胞亚群水平。结果免疫组小鼠于第1,2周脾淋巴细胞明显高于对照组(P<0.01),其中以CD4+T细胞增生为主,第1,2,3,4,6周增生显著(P<0.01),CD8+T细胞水平在第2,3周也有增生(P<0.05),CD4+/CD8+比值第6周高于对照组(P<0.01)。结论弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫BALB/c小鼠可有效诱导脾淋巴细胞增殖性免疫应答,且可持续较长时间。
- 孟晓丽殷国荣吴静唐旭马广源张杰
- 关键词：弓形虫属黏膜疫苗滴鼻免疫霍乱毒素
- 经口感染弓形虫在小鼠组织内的动态分布被引量：3
- 2008年
- 目的观察经口感染弓形虫速殖子在小鼠小肠组织、实质器官内的动态分布。方法BALB/c小鼠96只,随机分为8组,0 d组用0.5 ml PBS/只灌胃,其余组用RH株弓形虫速殖子1×104个灌胃感染,感染后2、4、6、8、10、12、14 d处死小鼠,每次处死12只,取十二指肠、空肠、回肠、肝脏、脾、肾、肺、心和脑做组织印片,吉-瑞氏染色,镜检。结果感染后2 d在十二指肠、空肠、回肠、肺和心,4 d在脾,6 d在肾和肝脏发现虫体,脑内未发现虫体。十二指肠、空肠、回肠组织内虫体数量呈上升趋势,第6天达高峰后稍有下降。肝内虫体数量呈上升趋势,第6天最多;脾内虫体数量在6 d达峰值后保持较高水平;实验期间肾、肺和心内虫体数量保持较低水平。结论弓形虫经口感染小鼠后2 d,小肠组织出现大量速殖子;同时肺和心内有少量速殖子;4 d在脾、6 d在肾和肝脏发现虫体;速殖子在上述组织内增殖,并形成假包囊,脑内未发现虫体。
- 申金雁杨莎莎殷国荣马广源孟晓丽刘红丽
- 关键词：弓形虫经口感染
- 弓形虫复合黏膜疫苗鼻内免疫小鼠抵抗弓形虫感染作用的观察被引量：35
- 2007年
- 目的观察弓形虫复合黏膜疫苗鼻内免疫小鼠诱导的肠黏膜和系统免疫应答及其抗弓形虫感染作用。方法BALB/c小鼠52只随机分为两组(每组26只),免疫组小鼠用弓形虫复合黏膜疫苗(每毫升含可溶性速殖子抗原1mg,霍乱毒素50μg)20μl/只滴鼻免疫2次,间隔2周;对照组用等剂量PBS滴鼻。末次免疫后14d,各组处死6只,摘眼球取血(0.5～1ml);取直肠内粪便(4～5粒),ELISA测定血清IgG和粪IgA抗体;分别计数脾组织、派伊尔集合淋巴结(PP)和肠上皮淋巴细胞(IEL),免疫细胞化学法检测各组织中CD4+、CD8+T细胞亚群水平。用RH株弓形虫速殖子(4×104个/只)灌胃攻击感染各组其余小鼠,30d后颈椎脱位处死,计数肝、脑组织速殖子虫荷。结果免疫后14d,免疫组小鼠血清IgG和粪IgA抗体水平(分别为0.224和0.371),显著高于对照组(分别为0.041和0.037)(P<0.05),脾、PP和IEL中T淋巴细胞与对照组相比明显增生(P<0.01),其中脾、PP中CD4+、CD8+T淋巴细胞增殖显著(P<0.05),IEL中以CD8+T细胞为主,增殖显著(P<0.01),CD4+/CD8+比值降低(P<0.05)。攻击后30d,免疫组小鼠存活率(85.0%)显著高于对照组(45.0%)(P<0.05)。免疫组肝、脑组织速殖子数比对照组分别减少86.3%、86.7%,两组差异有统计学意义(P<0.05)。结论弓形虫复合黏膜疫苗鼻内免疫小鼠,能有效诱导黏膜和系统免疫应答,小鼠存活率显著提高,肝、脑组织虫荷显著降低。
- 殷国荣孟晓丽马广源马晓明
- 关键词：弓形虫黏膜疫苗鼻内免疫可溶性抗原霍乱毒素
- 刚地弓形虫Peroziredozin基因的克隆表达与免疫原性分析
- 目的对刚地弓形虫Peroxiredoxin(TgPrx)基因进行克隆、表达和免疫原性分析。方法收集、纯化RH株弓形虫速殖子，提取总RNA;设计合成引物并引入EcoRI和Xhol酶切位点，RT-PCR扩增编码TgPrx的基...
- 刘转转王海龙殷国荣马广源张建中凡振伟
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