韦玮
- 作品数：6 被引量：18H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 类泛素家族SUMO-1和UBC9的克隆、融合表达及纯化被引量：2
- 2008年
- 目的:克隆类泛素化家族SUMO-1和UBC9基因,表达并纯化二者与谷胱甘肽S-转移酶(GST)的融合蛋白。方法:用PCR方法从乳腺文库中扩增SUMO-1和UBC9的编码序列,分别将其以正确相位与pGEX-KG载体中的GST编码序列融合,得到重组质粒pGST-SUMO-1和pGST-UBC9,分别转化大肠杆菌DH5α,表达融合蛋白GST-SUMO-1和GST-UBC9;用谷胱甘肽-Sepharose4B亲和纯化融合蛋白;用Western印迹检测融合蛋白的表达及纯化。结果:分别构建了SUMO-1和UBC9的融合表达载体;Western印迹检测表明,GST-SUMO-1和GST-UBC9融合蛋白获得表达;纯化得到了融合蛋白。结论:克隆、表达并纯化了SUMO-1和UBC9与GST的融合蛋白。
- 韦玮丁丽华张浩杨智洪崔家骏周岩李勤操毛建平叶棋浓
- 关键词：SUMO-1UBC9克隆融合蛋白
- 一种新型与ERβ相互作用蛋白ERIP2的功能研究
- 雌激素受体(estrogen receptor, ER)是核受体超级家族成员之一,主要调节与雌激素相关的基因转录,在乳腺癌的发生发展过程中起着重要作用。目前认为,ER是乳腺癌治疗的靶标和预后的指标之一。ER包括两种亚型:...
- 韦玮
- 关键词：雌激素受体相互作用SUMO转录活性
- 文献传递
- SUMO-1小干扰RNA的构建及其干扰效果检测
- 2010年
- 目的:构建小泛素相关修饰物-1(SUMO-1)基因的小干扰RNA(siRNA),并检测其对SUMO-1基因表达的干扰效果。方法:根据SUMO-1基因序列设计一条合理的SUMO-1siRNA,并将其克隆到pSliencer2.1-U6neo载体中,转化大肠杆菌DH5α,挑取阳性菌落进行酶切和测序鉴定;将构建的SUMO-1siRNA重组质粒单独转染或与带HA标签的SUMO-1表达载体共同转染人胚肾293T细胞,收集细胞裂解物,以抗HA和SUMO-1的抗体用Western印迹检测siRNA的干扰效果。结果:构建了SUMO-1siRNA重组质粒,干扰效果可达80%以上。结论:构建的SUMO-1siRNA为进一步进行蛋白质SUMO-1化修饰的研究奠定了基础。
- 任雯韦玮叶棋浓
- 关键词：SUMO-1小干扰RNA
- 蛋白质SUMO化修饰研究进展被引量：13
- 2008年
- SUMO(small ubiquitin-related modifier)是类泛素蛋白家族的重要成员之一,可与多种蛋白结合发挥相应的功能,其分子结构及SUMO化反应途径都与泛素类似,但二者功能完全不同。SUMO化修饰可参与转录调节、核转运、维持基因组完整性及信号转导等多种细胞内活动,是一种重要的多功能的蛋白质翻译后修饰方式。SUMO化修饰功能的失调可能导致某些疾病的发生。
- 韦玮张浩毛建平叶棋浓
- 关键词：SUMOUBC9PIAS
- 雌激素受体α真核表达载体的构建及其转录活性被引量：1
- 2008年
- 目的:构建雌激素受体α(ERα)高效真核表达载体,并检测其转录活性。方法:用常规PCR方法特异扩增带有Flag标签的人ERα全长编码序列,经双酶切后将其克隆到真核表达载体pIRESpuro2中,构建重组质粒pIRESpuro2-Flag-ERα;用Westernblot鉴定该重组质粒介导的Flag-ERα在人胚肾细胞株293T中的表达情况;用含雌激素应答元件的报告基因系统检测ERα的转录活性。结果:构建了pIRESpuro2-Flag-ERα重组质粒,该质粒介导的融合蛋白在293T细胞中得到表达,并可以激活含雌激素应答元件的报告基因的活性。结论:ERα高效真核表达载体的构建为进一步研究ERα在乳腺癌中的作用奠定了基础。
- 李勤操郑喜邦丁丽华王朝云韦玮周岩张浩叶棋浓
- 关键词：雌激素受体Α真核表达载体转录活性
- 大肠杆菌16S rRNA的核酶设计和初步应用被引量：2
- 2008年
- 针对细菌rRNA研发抑制细菌增殖的新型抗菌素是抗生素研究领域的新课题。细菌rRNA与基因mRNA一样自然形成折叠卷曲高级结构,其结构上可以结合反义核酸的位点即靶点,靶点的阐明是设计有效反义核酸、核酶(ribozyme)和脱氧核酶(DNAzyme)的关键。MAST方法固定16S rRNA,将其与寡核苷酸文库杂交筛选出靶点,获得了大肠杆菌16S rRNA的6个反义核酸结合靶点,并鉴定5个靶点有效,其中1个为高效。5个靶点的反义核酸能在通透性大肠杆菌菌株培养中不同程度地抑制其生长,针对高效靶点的核酶在转化大肠杆菌中表达而抑制其生长。
- 毛建平袁国刚王全会韦玮魏丽晶崔玉芳
- 关键词：RNA反义核酸大肠杆菌RRNA
