陈飞兰
- 作品数：9 被引量：47H指数：4
- 供职机构：第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市科技攻关计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人脐静脉血内皮祖细胞的分离、扩增和生物学特征被引量：1
- 2008年
- 目的:探索人脐静脉血内皮祖细胞的分离和扩增条件,并观测其生物学特性。方法:采集人脐静脉血,应用密度梯度离心法,分离其中单个核细胞,流式细胞术检测CD133+CD34+阳性率;利用差速贴壁法(48h内贴壁和48h后贴壁)联合内皮细胞专用培养基EGM-2培养细胞,接种于预先包埋了明胶培养瓶或培养板,倒置显微镜观察细胞生长形态和形成集落能力,免疫细胞化学法检测其免疫表型,摄取Ac-LDL和连接UEA-1功能,在生长因子培养体系中诱导其向成熟内皮细胞分化。结果:所获单个核细胞中CD133+CD34+百分比为1.06%;在EGM-2培养体系下可获得2种亚型的内皮祖细胞,即早期内皮祖细胞和晚期增殖性内皮祖细胞。其中48h后贴壁细胞属于早期内皮祖细胞,增殖能力较弱,免疫荧光检测,显示CD14和CD34KDR胞浆呈阳性表达,Ac-LDL+UEA-1+功能特征;而48h内贴壁细胞在10～17d时可见由单个细胞增殖形成的克隆,呈铺路石样单层排列,增殖力旺盛形成融合状态,形成次集集落;经免疫荧光检测,显示CD133CD34和CD34KDR细胞质呈阳性表达,Ac-LDL+UEA-1+功能特征,传代后vWF,CD31呈强阳性表达,是晚期增殖性内皮祖细胞。结论:经人脐静脉血可分离培养获得2种亚型的内皮祖细胞,在特定的培养体系中细胞可由祖细胞表型向成熟内皮细胞分化。
- 陈飞兰张华蓉徐承平卞修武
- 关键词：内皮祖细胞CD34CD133KDRCD14
- 人脐血源性内皮祖细胞血管发生活性及其参与人恶性胶质瘤细胞异种移植瘤血管新生的作用被引量：2
- 2008年
- 目的观察人脐血源性内皮祖细胞（EPC）血管发生能力和在恶性胶质瘤血管新生过程中的作用。方法应用密度梯度离心法分离新鲜人脐血的单个核细胞，接种于EGM-2培养液中培养获得EPC。取生长到第7～10天的细胞进行CD34和VEGFR-2免疫荧光双标染色。检测血管内皮生长因子（VEGF）刺激下EPC增殖活性、迁移能力和体外形成小管样结构的能力。采用人恶性胶质瘤细胞系U87在免疫缺陷小鼠进行皮下移植，于接种肿瘤后第7天经尾静脉注射EPC（每只5×10^5），并于接种肿瘤后第28天取材检测肿瘤微血管和EPC组织分布及定位，采用抗人CD31和抗鼠CD31免疫荧光双标记肿瘤微血管，计算人源性EPC来源的血管占肿瘤血管网的比例。结果培养的细胞在第7～10天时可见条索样结构，生长并逐渐融合形成铺路石样排列的单层细胞，表达内皮细胞标记物CD34和VEGFR-2。在VEGF刺激下EPC具有较强的增殖活性、迁移能力和体外形成小管样结构的能力。外源性EPC能特异性归巢到异种移植瘤组织并形成新生血管，占肿瘤血管网的（18．68±1．32）％。结论EPC在体内外具有形成血管能力，并参与异种移植瘤血管新生，提示其在恶性肿瘤血管新生过程中具有重要作用，并可能参与肿瘤微血管构筑表型异质性。
- 张华蓉陈飞兰徐承平卞修武
- 关键词：肿瘤移植
- 内皮祖细胞在胶质瘤新生血管中的募集和整合作用被引量：4
- 2008年
- 目的探讨内皮祖细胞(EPCs)在胶质瘤血管新生化过程中的作用。方法采用密度梯度离心法分离人脐血EPCs。应用人脑胶质瘤细胞系U87细胞建立原位移植动物模型,于瘤细胞接种后第7天将EPCs经尾静脉注入荷瘤鼠,并分别于尾静脉注射后7、14、21d观察EPCs植入后在移植瘤血管新生过程中的募集、整合作用以及对肿瘤生长的影响。结果胶质瘤原位移植模型成瘤率为100%。在EPCs植入后14、21d被募集和整合到肿瘤血管中的EPCs数量显著多于第7天(P<0.05),肿瘤微血管密度和移植瘤体积也显著高于对照组(P<0.05)。结论人脐血EPCs能够被募集并整合到肿瘤血管中促进胶质瘤生长,提示其在胶质瘤血管新生化过程中可能具有重要作用。
- 徐承平张华蓉陈飞兰章容卞修武
- 关键词：内皮祖细胞胶质瘤肿瘤移植
- 大鼠脑胶质瘤分化特征和诺帝对C6原位移植瘤诱导分化治疗作用
- 诱导分化治疗是目前肿瘤治疗的重要新策略。我们既往研究显示，我室自行合成的NDGA类化合物诺帝(Nordy)，具有抑制体内外恶性胶质瘤细胞增殖、诱导分化作用，但具体作用机制还不清楚。诱发性和移植性胶质瘤模型广泛应用于胶质瘤...
- 陈飞兰
- 关键词：胶质瘤原位移植瘤诱导分化治疗中间丝蛋白信号转导分子诺帝
- 文献传递
- 内皮祖细胞（EPCs）在胶质瘤微血管构筑表型异质性形成中的作用及其机制研究
- 恶性实体瘤(malignantsolidtumors)的生长和转移有赖于肿瘤内血管新生(neovascularization)。肿瘤血管新生机制涉及由原血管床成熟内皮芽生的血管生成(angiogenesis)和由骨髓动员...
- 陈飞兰
- 关键词：内皮祖细胞
- 文献传递
- SDF-1/CXCR4轴活化诱导人内皮祖细胞增殖、迁移及管型形成被引量：15
- 2008年
- 目的观察趋化因子SDF-1促内皮祖细胞增殖、迁移和管型形成的作用。方法用免疫细胞化学检测内皮祖细胞SDF-1和CXCR4表达;用MTT法、Millicell趋化法及Matrigel体外三维成型法分别检测不同浓度的趋化因子SDF-1促内皮祖细胞增殖、迁移和管型形成。并应用CXCR4受体抑制剂AMD3100观察上述指标的变化。结果免疫细胞化学显示内皮祖细胞表达SDF-1和CXCR4蛋白。SDF-1可促进内皮祖细胞的增殖、迁移和体外小管样结构的形成。AMD3100可抑制SDF-1的诱导作用。结论SDF-1/CXCR4轴在内皮祖细胞参与血管新生中可能发挥重要作用。
- 陈飞兰张华蓉徐承平卞修武
- 关键词：内皮祖细胞趋化因子SDF-1
- 诺帝对大鼠C6脑胶质瘤的诱导分化治疗作用及对信号转导分子STAT3和p-STAT3蛋白表达的影响被引量：14
- 2005年
- 目的研究诺帝对大鼠C6脑胶质瘤GFAP、Vimentin及信号传导和转录激活因子3(STAT3)和酪氨酸磷酸化STAT3(pSTAT3)表达水平影响,探讨恶性胶质瘤发生机制及诺帝诱导分化作用的分子机制。方法立体定向接种法将C6胶质瘤细胞悬液接种于雄性Wistar大鼠右脑尾状核,采用本室专利方法合成的抗胶质瘤新药诺帝(27和54mg/kg体重腹腔注射)作为治疗方法,观察移植瘤病理组织学和超微结构变化,检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和vimentin两种分化标志物的表达,并观测细胞信号转导分子STAT3及其磷酸化状态pSTAT3蛋白表达水平。结果诺帝治疗组的抑瘤率分别为79.83%～97.74%,移植瘤体积明显减小,肿瘤无论在形态上还是免疫表型上均呈现诱导分化现象,GFAP表达增强,而vimentin表达降低,STAT3和pSTAT3平均光密度值也减低。结论诺帝对C6细胞的原位移植瘤具有诱导分化治疗作用,抑制STAT3表达及其酪氨酸磷酸化活性从而上调GFAP表达可能是其诱导分化治疗作用的机制之一。
- 陈飞兰张华蓉卞修武陈剑鸿蒋雪峰王清良
- 关键词：STAT3信号转导分子C6脑胶质瘤VIMENTINVIMENTIN
- 立体定向接种胶质瘤细胞系C6形成大鼠脑内原位移植瘤的生长特性被引量：10
- 2005年
- 目的 通过立体定向技术建立大鼠脑原位移植瘤模型,观察其生长特性。方法 在立体定向仪引导下,将体外培养的大鼠C6胶质瘤单细胞悬液(1×10 6/10 μl)接种于2 7只Wistar大鼠右尾状核区。以接种C6细胞后大鼠的允许生存期,将大鼠分成2组,观察大鼠生存状态、成瘤情况、肿瘤体积、脏器转移灶、组织学形态、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、血管内皮生长因子(VEGF)、兔抗人因子Ⅷ相关抗原免疫组化染色。结果 大鼠成瘤率为10 0 % ,无颅外转移。荷瘤大鼠平均生存期为(2 5 5 0±5 75 )d。肿瘤体积在第3～4周时肿瘤迅速增大。肿瘤呈浸润性生长,甚至侵袭颅骨;瘤细胞病理性核分裂像多见,GFAP蛋白呈散在阳性表达,VEGF蛋白强阳性表达;瘤组织内有典型的栅栏状坏死和丰富的微血管。结论 C6细胞在大鼠脑内原位移植瘤与人脑胶质母细胞形态和生长特性十分相似,具有分化程度低、微血管丰富、生长速度快且高度侵袭等特点。
- 张华蓉陈飞兰陈剑鸿蒋雪峰王清良赵雯卞修武
- 关键词：胶质瘤原位移植瘤肿瘤血管生成
- 诺帝对血管内皮生长因子诱导的人脐血源性内皮祖细胞功能的影响被引量：4
- 2008年
- 探讨手性化合物诺帝（Nordy）对血管内皮生长因子（VEGF）诱导的人脐血源性内皮祖细胞（EPCs）功能的影响及其意义。应用密度梯度离心法分离新鲜人脐血的单个核细胞,接种于EGM-2培养液中培养7-10d获得内皮祖细胞（EPCs）。分别采用MTT法、Millicell-PCF培养小室系统和Matrigel内小管形成试验检测诺帝对VEGF刺激下EPCs增殖活性、迁移能力和体外形成小管样结构能力的影响。结果表明,100μmol·L^-1诺帝作用24h明显抑制EPCs增殖活性（P〈0.05）,诺帝（25-50μmol·L^-1）作用48-72h也明显抑制EPCs增殖活性（P〈0.05）。诺帝（25-100μmol·L^-1）显著抑制VEGF诱导的EPCs迁移活性和体外形成小管样结构的能力（P〈0.05）。诺帝能抑制体外VEGF诱导的人脐血源性EPCs增殖、迁移和体外小管形成能力,提示其具有抗EPCs效应。
- 张华蓉徐承平陈飞兰卞修武
- 关键词：内皮祖细胞血管内皮生长因子诺帝
