陈笑宜
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
- 供职机构：重庆医科大学生命科学研究院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
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- PPARγ激动剂体外筛选模型的建立
- 2013年
- 目的:构建一种过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator-activated receptor,PPAR)γ激动剂体外筛选模型,为筛选具有潜在治疗效果的PPARγ激动剂提供研究手段。方法:用脂质体2000(LipofectamineTM2000)将含有PPARγ基因质粒(pIRES2-PPARγ)、萤火虫荧光素酶报告基因质粒(pPPRE×3-TK-Luciferase)以及内参照质粒(pRL-TK)按不同比例共转染入人胚胎肾细胞HEK293细胞,并对3种质粒比例进行优化;以不同配体处理转染3种质粒的HEK293细胞,通过检测荧光素酶相对活性来确定加入配体对PPARγ的激动效应;采用经典的PPARγ激动剂和PPARγ特异性拮抗剂,其他核受体激动剂以及PPARα激动剂考察不同化合物对PPARγ的激动作用程度,确定模型的特异性;以Z’值考察模型重复性;并观察了PPARγ激动剂的作用时间特点。结果:PPARγ质粒、报告基因质粒以及内参照质粒比例为2∶6∶1时相对荧光素酶活性最高;PPARγ激动剂罗格列酮可显著增加相对荧光素酶的活性而PPARγ特异性拮抗剂GW9662可抑制这种作用,且相对荧光素酶的活性随着处理时间的增加而升高;地塞米松,全反式维甲酸,雌二醇和非诺贝特无上述活性;重复9次实验后计算得Z’=0.70。结论:本研究成功建立了一种PPARγ激动剂筛选模型,且模型特异性和重复性较好,为进一步筛选具有PPARγ激动剂提供了理想的研究手段。
- 刘治国李继斌李靖娜陈笑宜明月崔欢欢彭川肖晓秋
- 关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体罗格列酮报告基因
- 早期营养过剩所致母鼠肥胖对子代小鼠代谢特征的影响被引量：1
- 2013年
- 目的探讨母鼠肥胖及高脂饮食对子代小鼠代谢特征的影响。方法将正常体质量ICR母鼠(对照组,即CTR组)及采用早期营养过剩方法建立的肥胖母鼠(早期营养过剩组,即CPO组)分别与同龄正常雄性ICR小鼠交配。将两组雄性子代断乳后随机分为高脂饲料组(CTR-H组和CPO-H组)和标准饲料组(CTR-S组和CPO-S组),分别饲喂高脂饲料或标准饲料至5月龄。哺乳结束(21 d)测定母鼠体质量、肝/体质量和腹部脂肪/体质量。不同饲料喂养10周后,对子代小鼠进行葡萄糖耐量试验,5月龄时测定空腹血糖及血清胰岛素水平,计算胰岛素抵抗指数(IRI)。苏木精-伊红(HE)染色后观察子代小鼠腹部脂肪组织细胞形态,比较脂肪细胞面积。结果 CPO组母鼠体质量、肝/体质量及腹部脂肪/体质量均显著高于CTR组(P<0.05)。不同饲料喂养10周后,CPO组子代小鼠存在糖耐量受损情况,CPO-H组糖耐量损伤更严重。CTR-H组和CPO-H组小鼠空腹血糖水平和IRI分别高于CTR-S组和CPO-S组(P<0.01);CPO-H组小鼠血清胰岛素水平高于其他组(P<0.01)。CTR-H组和CPO-H组小鼠腹部脂肪细胞面积分别大于CTR-S组和CPO-S组(P<0.01),CPO-S组大于CTR-S组(P<0.01),CPO-H组大于CTR-H组(P<0.01)。结论母鼠肥胖能够增加子代小鼠肥胖和发生代谢紊乱的风险,在高脂饲料喂养时更为显著。
- 陈笑宜李继斌叶泽慧刘丹肖晓秋
- 关键词：肥胖代谢性疾病
- 肥胖对小鼠肺部炎症和肺功能的影响被引量：3
- 2013年
- 目的:探讨肥胖对小鼠肺部炎症及肺功能的影响。方法:建立肥胖小鼠模型,雄性ICR小鼠母乳喂养21 d离乳,随机分为高脂组与正常组,分别给予高脂与标准饲料喂养150 d。将高脂组中超过正常体质量的10%～20%定义为超重组,超过正常体质量的20%定为肥胖组。进行基础肺功能测定,肺组织HE染色、巨噬细胞特异性标记抗原F4/80免疫组化。结果:(1)肺组织HE染色和免疫组化F4/80示肥胖组支气管周围、肺泡间隔炎性细胞浸润较正常组、超重组明显增多,以巨噬细胞增多为主。(2)肺功能测定显示肥胖组最大吸气流速、最大呼气流速、呼出50%潮气量时呼气流速相对于正常组和超重组无统计学差异(P>0.05)。结论:肥胖可促进肺部炎性细胞浸润,但对通气功能影响较小。
- 叶泽慧黄英肖晓秋刘丹陈笑宜黄道超赵丽
- 关键词：肥胖炎症肺功能
- 早期营养过剩所致母亲肥胖对子代的影响
- 目的:探讨母鼠肥胖及高脂饮食对子代的影响。
方法:正常体质量ICR母鼠（对照组）及采用生命早期营养过剩方法建立的肥胖母鼠（早期营养过剩组）分别与同龄正常雄性小鼠交配，两组子代新生鼠断奶后分别饲喂标准饲料或高脂饲料至...
- 陈笑宜
- 关键词：营养过剩代谢性疾病代谢紊乱胰岛素
- 链脲佐菌素诱导的雄性大鼠高血糖对子代生长发育及代谢的影响
- 2013年
- 目的观察链脲佐菌素(Streptozocin,STZ)诱导的雄性大鼠高血糖对子代生长发育及代谢的影响。方法将健康雄性SD大鼠随机分为对照组(CON)和STZ组,STZ组经腹腔注射STZ(35 mg/kg)建立雄性大鼠糖尿病模型,CON组经腹腔注射pH 4.2的枸橼酸钠缓冲溶液。两组雄鼠分别与健康SD雌鼠按1∶2比例交配。雌鼠分娩后,称量两组子代出生体重,并连续监测体重变化和进食量;采用自动血糖仪和血糖试纸检测空腹血糖水平;18和22周时进行葡萄糖耐量试验(Glucose tolerance test,GTT)和胰岛素耐量试验(Insulin tolerance test,ITT);计算肝重/体重指数;全自动生化分析仪检测血脂水平。结果 STZ组子代出生体重和后期体重及每日进食量均始终显著低于CON组(P<0.05或P<0.01);第18周,STZ组与CON组子代葡萄糖耐量及胰岛素耐量差异均无统计学意义(P>0.05);第22周时,STZ组子代葡萄糖耐量在第15、30、60 min显著高于CON组(P<0.05),胰岛素耐量在各检测时间点均显著高于CON组(P<0.05);STZ组与CON组子代肝重/体重指数差异无统计学意义(P>0.05);STZ组子代血清中甘油三酯含量明显低于CON组(P<0.05)。结论父代高血糖对子代的出生体重和生长趋势有显著影响,且能显著改善子代的胰岛素耐量。
- 李靖娜宋勇李继斌刘治国陈笑宜张琪娟肖晓秋
- 关键词：子代葡萄糖耐量试验
