陈怡君
- 作品数：17 被引量：50H指数：5
- 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程更多>>
- 冰片对斑马鱼血脑屏障通透机制的研究
- 目的：以斑马鱼为模式生物研究冰片通透血脑屏障(Blood-Brain Barrier,BBB)的机制。方法：渗漏实验观察冰片能否促进罗丹明偶联的大分子荧光物质入脑；利用透射电镜观察冰片作用后斑马鱼BBB 超微结构的变化；...
- 陈怡君潘微彤桑杰王丽兴李春杰刘萍赵宝全
- 关键词：斑马鱼冰片血脑屏障CLAUDINS
- 麝香酮对斑马鱼血脑屏障超微结构及Claudins基因表达的影响被引量：2
- 2020年
- 目的研究麝香酮对斑马鱼(担尼鱼)血脑屏障(BBB)超微结构及其紧密连接蛋白Claudins基因表达的影响,以阐明麝香酮开启BBB的机制。方法给成年斑马鱼腹腔注射麝香酮溶液,计算半数致死剂量(LD50),利用LD50的1/5剂量进行后续实验;利用透射电子显微镜观察给予麝香酮30 min、1 h、4 h、8 h后,BBB超微结构的变化;选取与BBB密切相关的Clau⁃dins,利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测麝香酮作用1 h时的mRNA表达的变化,从中选取对麝香酮较为敏感的基因,进一步对敏感基因在不同时间点(0 min、15 min、30 min、1 h、2 h、4 h)的表达进行检测,验证其时效性。结果斑马鱼腹腔注射麝香酮溶液24 h的LD50是65.20μmol/g体质量,后续实验采用13.04μmol/g体质量的剂量给斑马鱼腹腔注射给药;给予麝香酮后,随时间推移BBB的基膜出现断裂、膨大的现象,紧密连接结构疏松,内皮细胞出现皱缩,给药1 h时最为严重,之后随时间延长BBB超微结构逐渐恢复,给药4 h后BBB的结构逐渐恢复正常;RT-qPCR检测结果表明,给药1 h时BBB相关的Claudins大部分基因mRNA表达下调,其中Claudin-2、-5a、-7b下调最明显(P值分别为0.005、0.002、0.002)。对Claudin-2、-5a、-7b基因不同时间点的表达情况进行检测,结果表明,给药15 min时,各基因均出现了表达的上调,30 min时表达回落,1 h时其表达下调到最低点,然后逐渐上升恢复。其中Claudin-2在4 h时表达略高于正常水平,差异不显著(P>0.05),Claudin-5a在4 h时表达基本恢复至正常水平(P>0.05),Claudin-7b在4 h时表达未恢复至正常水平,有极显著性差异(P<0.01)。结论麝香酮能使Claudins基因表达下调,致使紧密连接结构疏松,加之基膜结构破坏,内皮细胞皱缩,使得BBB的屏障作用减弱,从而开启BBB。基因可逆性的下调以及BBB结构可逆性的改变说明麝香酮对BBB的开启是生理性的,对脑部不会带来病理性损伤。
- 陈怡君桑洁赵宝全刘萍
- 关键词：麝香酮血脑屏障超微结构CLAUDINS
- 基于斑马鱼模式生物的新药靶点发现研究
- 2013年
- 斑马鱼在新药靶点发现研究中具有其它生物不可比拟的优势：1．斑马鱼胚胎及幼鱼透明，给药后直接观察发育过程，可观察到细胞运动、脑区形成和心跳等胚胎发育情况，易于发现发育异常的突变体；2．斑马鱼基因与人类同源度高达87％，尤其是中枢神经系统、内脏器官、
- 王丽兴浦韵竹李春杰陈怡君王卓徐艳华赵宝全
- 关键词：模式生物斑马鱼发育过程细胞运动发育情况发育异常
- ITS2序列分析在白花蛇舌草鉴定中的应用研究被引量：4
- 2016年
- 目的对白花蛇舌草和它的混伪品进行分子生物鉴定,保证该药材的临床药效和使用安全。方法提取白花蛇舌草及其混伪品的DNA,使用引物进行PCR扩增,获取ITS2序列的片段,将扩增得到的产物进行双向测序,运用Condon Code Aligner软件进行校对拼接,去除低质量区。用HMMer注释法保留ITS2序列全长。运用MEGA5.1软件对真伪品序列进行分析,计算真伪品的遗传距离,构建邻接(NJ)树评估真伪品之间的亲缘关系。采用ITS2数据库预测ITS2二级结构。结果白花蛇舌草与混伪品的ITS2序列存在明显差异。结论运用ITS2序列能准确有效鉴别出白花蛇舌草和混淆品。
- 陈怡君郭晓辉高芳雪王爱华李鋆李外刘萍
- 关键词：白花蛇舌草混伪品ITS2分子鉴定
- 麝香酮对斑马鱼血脑屏障及其组成蛋白claudin 5a的影响
- 陈怡君周文斌赵宝全刘萍
- 冰片对斑马鱼胚胎发育的安全性评价被引量：9
- 2014年
- 目的:研究冰片对斑马鱼胚胎发育的影响。方法:以斑马鱼胚胎为模型,二甲基亚砜为助溶剂,制备冰片溶液(33.6、67.1、134.3、268.5、537.0、1 074.0μmol/L,即冰片①、②、③、④、⑤、⑥组),并且设空白对照组,以受精后小时(hpf)为时间段,对3hpf胚胎进行暴露染毒处理,每24 h更换1次冰片溶液,分别在8、24、48、72、96 hpf时间点以显微镜观察班马鱼胚胎发育形态,测定24 hpf斑马鱼胚胎自主抽动次数、48 hpf心率、孵化率、畸形率和死亡率。实时荧光定量聚合酶链反应法检测斑马鱼胚胎Sepn1基因表达的情况。结果:与空白对照组比较,冰片④、⑤、⑥组斑马鱼胚胎48 hpf出现脊柱弯曲、心囊水肿、卵黄囊水肿,游泳异常的毒性症状;冰片②、③、④、⑤、⑥组斑马鱼胚胎24 hpf自动抽动次数减少;冰片④、⑤、⑥组斑马鱼胚胎24 hpf心率减少;在48 hpf时,冰片①、②、③、④、⑤、⑥组斑马鱼胚胎孵化率降低;在72 hpf时,冰片②、③、④、⑤、⑥组斑马鱼胚胎孵化率降低;在96 hpf时,冰片⑤、⑥组斑马鱼胚胎孵化率降低;冰片④、⑤、⑥组斑马鱼胚胎96 hpf畸形率增加;24 hpf后,冰片④、⑤、⑥组斑马鱼胚胎死亡率降低;冰片④组Sepn1 mRNA表达增强,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论:高剂量冰片对斑马鱼胚胎发育有明显影响,且呈现一定的时间依赖性。建议婴幼儿、孕妇和哺乳期的妇女长时间或大剂量使用含冰片的药物均应谨慎。
- 陈怡君蒲韵竹颜慧钟玉绪王卓李春杰查晓丹赵宝全刘萍
- 关键词：冰片斑马鱼胚胎发育
- 基于斑马鱼模式生物的新药靶点发现研究
- 斑马鱼在新药靶点发现研究中具有其它生物不可比拟的优势:1.斑马鱼胚胎及幼鱼透明,给药后直接观察发育过程,可观察到细胞运动、脑区形成和心跳等胚胎发育情况,易于发现发育异常的突变体;2.斑马鱼基因与人类同源度高达87％,尤其...
- 王丽兴浦韵竹李春杰陈怡君王卓徐艳华赵宝全
- 麝香酮对斑马鱼血脑屏障及其组成蛋白claudin 5a的影响
- ＜正＞麝香酮（muscone）为开窍药麝香的重要有效成分,入心经,具有辛香走窜之性,有开窍醒神之功效,能使昏迷患者神志苏醒,主治闭目神昏,在中医治疗急重症中应用广泛。有学者认为,开窍药物能通过血脑屏障（BBB）,也就是此...
- 陈怡君周文斌赵宝全刘萍
- 文献传递
- 芳香开窍药对斑马鱼胚胎发育毒性研究
- ＜正＞芳香开窍药是我国中医药宝库中的瑰宝,具有醒神回苏之功效,是治疗痹症神昏之要药。他能够使药物通过血脑屏障（blood-brain barrier,BBB）进入脑内,对跨血脑屏障药物递送这一世界难题研究具有重要意义。但...
- 赵宝全桑洁陈怡君尚艳楠吴思彤马德慧刘萍胡步荣王永安
- 文献传递
- 细辛脑对斑马鱼胚胎发育及运动行为的影响被引量：7
- 2015年
- 目的研究细辛脑对斑马鱼胚胎发育及运动行为的影响。方法以受精后3h(hpf)斑马鱼胚胎为实验模型,分别暴露于不同浓度(25、50、100、200和400μmol/L)细辛脑溶液中,以不加细辛脑为对照组,每隔24 h更换1次细辛脑溶液,分别在24、48、72和96 hpf等时间点用显微镜观察班马鱼胚胎发育形态,记录24 hpf胚胎自主抽动次数,48 hpf心率、畸形率和死亡率,72和96 hpf孵化率和死亡率,利用RT-q PCR检测96 hpf斑马鱼胚胎Sepn1基因表达情况,采用Noldus斑马鱼幼鱼行为视频跟踪系统评价细辛脑暴露对幼鱼运动行为的影响。结果细辛脑各实验组斑马鱼胚胎自主抽动次数随浓度增加而降低,100、200和400μmol/L组与对照组相比有极显著性统计学差异(P<0.01);细辛脑各实验组斑马鱼48 hpf心率显著降低,与对照组相比均有显著统计学差异(P<0.01);72和96 hpf斑马鱼幼鱼出现了脊柱弯曲、心包水肿、卵黄囊水肿等畸形形态;与对照组相比,100、200和400μmol/L组96 hpf孵化率均下降,具有显著性统计学差异(P<0.01);与对照组相比,400μmol/L组死亡率降低,有统计学差异(P<0.05);随着细辛脑浓度增加,96 hpf斑马鱼幼鱼运动速度和距离明显减小,200和400μmol/L组与对照组相比均有统计学差异(P<0.05);同时200和400μmol/L浓度组活跃度降低,与对照组相比具有显著差异(P<0.01);96 hpf时,细辛脑各浓度组胚胎Sepn1基因表达下降,其中100μmol/L组与对照组相比有统计学差异(P<0.05),而200和400μmol/L组与对照组相比差异更显著(P<0.01)。结论细辛脑对斑马鱼胚胎和幼鱼有致畸作用,并且影响其运动行为,建议婴幼儿慎用细辛脑。
- 尚艳楠蒲韵竹李小满陈怡君刘萍薛江东李前黄春倩马德慧赵宝全
- 关键词：细辛脑斑马鱼胚胎发育
