陈大瑜
- 作品数：5 被引量：18H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 促凋亡因子Omi/HtrA2对凋亡抑制蛋白表达及A549细胞凋亡的影响被引量：2
- 2007年
- 目的观察Omi/HtrA2对凋亡抑制蛋白(XIAP)表达的影响和对肺癌A549细胞凋亡的影响。方法将构建的携带绿色荧光蛋白(GFP)和Omi/HtrA2基因的表达载体(PEGFP-N1- Omi)转染至人肺腺癌A549细胞中,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测Omi/ HtrA2对XIAP转录和表达的影响,流式细胞仪检测Omi/HtrA2协同顺铂作用于A549细胞后该细胞的凋亡变化。结果Omi/HtrA2基因转染组XIAP的mRNA表达水平下降37%(P<0.05),XIAP的蛋白表达水平下降69%(P<0.05),顺铂诱导后,基因转染组细胞凋亡率为(36.00±1.95)%,显著高于对照组的细胞凋亡率(17.00±1.12)%(P<0.05)。结论Omi/HtrA2通过抑制XIAP的抗凋亡作用可协同顺铂促进A549细胞凋亡。
- 卢实陈大瑜胡晓勇胡汉黄畦
- 关键词：肺癌基因表达脱噬作用
- Omi／HtrA2短发夹siRNA对肺癌细胞凋亡的影响被引量：5
- 2006年
- 目的检测肺癌组织中促凋亡因子Omi／HtrA2的表达,观察Omi／HtrA2的短发夹状小干扰RNA(shRNA-Omi／HtrA2)载体对肺癌细胞生长的影响。方法采用免疫组织化学SP法检测50例非小细胞肺癌和10例正常肺组织中Omi／HtrA2的表达;将shRNA-Omi／HtrA2载体转染至人肺腺癌细胞株A549,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测其对Omi／HtrA2转录和表达的下调作用,流式细胞术检测Omi／HtrA2下调后A549细胞凋亡的变化。结果Omi／HtrA2在非小细胞肺癌中的表达明显高于正常肺组织(P<0．05)。shRNA-Omi／HtrA2载体能显著抑制A549细胞Omi／HtrA2基因的表达(88％)。转基因组细胞经顺铂处理后凋亡率为(13．00±0．98)％,显著低于对照组的凋亡率(24．00±1．08)％(P<0．05)。结论Omi／HtrA2的高表达参与肺癌的发展,Omi／HtrA2短发夹siRNA可抑制A549细胞的凋亡。
- 黄畦陈大瑜卢实张红菱胡晓勇胡汉
- 关键词：肺癌SIRNA脱噬作用免疫组织化学
- 多层自体胸膜在大泡性肺气肿合并复发性气胸患者手术中的应用被引量：4
- 2008年
- 付向宁黄畦张霓孙威陈大瑜
- 关键词：复发性气胸胸膜自体胸腔闭式引流平均年龄
- MDR1启动子调控CD∷尿嘧啶磷酸核糖转移酶重组腺病毒载体的构建及表达被引量：5
- 2005年
- 目的构建由人MDR1启动子调控CD∷upp融合基因表达的重组腺病毒,为对耐药肿瘤体内外靶向基因治疗奠定基础。方法自行设计一对含XhoⅠ和HindⅢ酶切位点的MDR1引物,从外周血中提取人类基因组DNA,通过PCR扩增MDR1启动子并插入PGL3-enhancer载体上,获得PGL3-MDR1质粒。从PORF-CD∷upp质粒中切下CD∷upp基因,插入PGL3-MDR1中MDR1启动子下游,并从中切下目的基因MDR1-CD∷upp,克隆到腺病毒穿梭质粒中,将带目的基因的穿梭质粒pAdTrack-MDR1-CD∷upp。与含有pAdeasy-1的BJ5183菌电转化,筛选提取>30 kb的阳性克隆,经线性化后转染293细胞,通过观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达及PCR扩增出重组腺病毒中的目的基因MDR1、CD∷upp等方法加以鉴定。结果成功构建了含MDR1-CD∷upp靶向自杀基因的重组腺病毒载体Ad-MDR1-CD∷upp,病毒滴度为3.0×1010pfu/ml。结论该重组腺病毒的构建为下一步研究其对MDR1耐药细胞系的特异性杀伤作用和对耐药肿瘤模型的靶向基因治疗提供基础。
- 卢实黄畦蔡春芳陈大瑜王泽华
- 关键词：胞嘧啶脱氨酶尿嘧啶磷酸核糖转移酶腺病毒重组腺病毒载体启动子CD靶向基因治疗
- 双自杀基因重组腺病毒对肺癌细胞的杀伤作用被引量：3
- 2006年
- 目的构建含CD／UPRT双自杀基因的重组腺病毒Ad-CD/UPRT,观察其对人肺腺癌细胞的杀伤作用。方法用0-100感染复数的重组腺病毒转染肺腺癌A549细胞后加入(0-1 000)mg／L的5-氟胞嘧啶(5-FC),MTT法检测杀伤效率;将转基因细胞与未转基因细胞按不同比例混合,观察旁观者效应。结果 Ad-CD／UPRT转染A549后对细胞生长有显著的抑制作用,细胞杀伤效率随腺病毒滴度及5-FC浓度的增加而增强;转基因细胞占混合细胞10％以上,即可观察到明显的旁观者效应。结论 Ad-CD／UPRT联合5-FC对肺腺癌A549细胞有显著杀伤作用。
- 黄畦陈大瑜付向宁祖育昆
- 关键词：肺癌腺病毒基因治疗
