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陈健: 作品数：13 被引量：110H指数：5; 供职机构：广州中医药大学基础医学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>

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人ApoC-Ⅰ基因的克隆、原核表达与纯化: 2015年; 【目的】进行含信号肽ApoC-Ⅰ(signal-ApoC-Ⅰ)和ApoC-Ⅰ成熟肽(mature-ApoC-Ⅰ)的基因克隆、原核表达和纯化。【方法】取肝癌切除手术患者的癌旁组织,提取总RNA后,逆转录成c DNA,并设计带酶切位点的特异引物分别扩增出signal-Apo C-Ⅰ、mature-Apo C-Ⅰ基因;将扩增出的基因通过T克隆入PMDTM19-T载体;T克隆经测序验证后,双酶切出目的基因,连入同样双酶切后的PET28a载体,构建原核表达质粒;再次测序验证后,将质粒转入BL21Star(DE3)中,表达条件优化后进行融合表达;将表达后产物用Ni-NTA树脂亲和层析进行重组蛋白纯化;纯化产物采用Western blot进行验证。【结果】构建了PET28a-signal-ApoC-Ⅰ、PET28a-mature-Apo C-Ⅰ表达质粒,重组质粒都经过测序鉴定正确;PET28a-signalApoC-Ⅰ诱导表达后能抑制宿主菌生长,但经过条件优化2个表达质粒都在BL21Star(DE3)菌中经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导大量表达和纯化,Western blot证实了表达的结果。【结论】含信号肽ApoC-Ⅰ、ApoC-Ⅰ成熟肽的基因克隆、原核表达和纯化成功,为进一步研究重组人Apo C-Ⅰ的作用奠定了基础。; 谢伟群邝枣园孙砚辉张晓圆陈健刘思颖张韧; 关键词：基因克隆基因表达蛋白纯化

广州北部山区果叶兼用枇杷GAP示范种植: 徐社金刘军民陈世斌陈健丁平欧阳涓阮贤聪徐鸿华谢细东陈春锋; 建广州果叶兼用枇杷GAP示范基地500亩资源圃20亩，选2个良种，制《果叶兼用枇杷GAP标准操作规程(SOP)》发论文3篇。成果用于枇杷叶果生产，为药企建立枇杷叶药材基地和国家中药材GAP认证做准备。; 关键词：; 关键词：枇杷

铁皮石斛多糖在制备促毛发生长的药物中的应用: 本发明涉及铁皮石斛多糖在制备促毛发生长的药物中的应用，其中所述药物中铁皮石斛多糖的质量百分含量为0.1～5%。本发明所述药物中的铁皮石斛多糖能上调皮肤角质形成细胞（HaCaT细胞）血管内皮生长因子（VEGF）基因的表达，...; 魏小勇陈健; 文献传递

黄芩苷对脂多糖诱导的肠道上皮细胞凋亡及迁移能力的影响被引量：7: 2015年; 【目的】探讨黄芩苷对脂多糖(LPS)诱导的IEC-6细胞凋亡及迁移能力的影响。【方法】以LPS诱导IEC-6细胞建立细胞损伤模型,采用四甲基偶唑盐(MTT)法和酶联免疫吸附(ELISA)法试剂盒分别检测LPS对IEC-6增殖及分泌炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的影响;应用Hoechst 33258染色和流式细胞术观察和分析黄芩苷低、中、高剂量组(剂量分别为2.5、5.0、10.0μg/m L)对LPS诱导的IEC-6细胞核凋亡形态学改变及凋亡率的影响;应用细胞划痕实验检测黄芩苷对LPS诱导的IEC-6细胞迁移能力的影响。【结果】与对照组比较,1.0μg/m L LPS组IEC-6细胞生存率显著降低,TNF-α、IL-6分泌量及细胞凋亡率显著增加,细胞迁移能力显著下降(均P<0.05);与模型组比较,黄芩苷低、中、高剂量组凋亡细胞均不同程度减少,高剂量组细胞凋亡率显著降低(P<0.05),细胞迁移显著提高(均P<0.01)。【结论】黄芩苷可抑制LPS诱导的肠道上皮细胞的凋亡,并能提高其迁移能力。; 陈健黄玲李岩刘思颖邝枣园; 关键词：细胞凋亡细胞迁移细胞培养

黄芩苷对LPS诱导的肠上皮细胞损伤的保护及机制探讨: 目的：由单层的肠上皮细胞及细胞间的连接组成的机械屏障是肠黏膜屏障中重要的组成部分，可抵御外来微生物及毒素的入侵。其中紧密连接是细胞间重要的连接方式，紧密连接的完整性对维持肠黏膜功能具有至关重要的作用。机体内脂多糖(lip...; 陈健; 关键词：肠道感染中药治疗实验药理; 文献传递

黄芩苷对代谢性炎症及肠道菌群的调节作用探讨被引量：40: 2016年; 【目的】探讨黄芩苷对高脂血症模型代谢性炎症及肠道菌群的调节作用。【方法】选取32只C57BL/6J雄性小鼠随机平均分为正常组、模型组、黄芩苷高剂量组(剂量为50 mg·kg-1·d-1)、黄芩苷低剂量组(剂量为25 mg·kg-1·d-1)。高脂饲料喂养3周后,2个黄芩苷用药组分别给予不同浓度黄芩苷灌胃5周。采用酶联免疫吸附法检测各组小鼠血清血脂水平以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)及内毒素水平,采用Miseq平台对小鼠肠道粪便微生物进行基因测序。【结果】与正常组比较,模型组总胆固醇及低密度脂蛋白水平显著升高(P<0.01),高密度脂蛋白水平显著降低(P<0.01),血清TNF-α、IL-6和内毒素水平显著升高(P<0.01);黄芩苷高剂量组的TNF-α、IL-6、内毒素水平均较模型组显著降低(P<0.05或P<0.01),黄芩苷低剂量组内毒素水平亦较模型组显著降低(P<0.01)。测序生物信息学分析发现,在门的水平,模型组脱铁杆菌门和变形杆菌门数目较正常组显著增多,疣微菌门数目较正常组显著减少。在属的水平,模型组Christensenella、uncultured_Peptococcaceae、脱硫弧菌属数目较正常组显著增多,而粪球菌属、Akkermansia及uncultured_Lachnospiraceae数目较正常组显著减少;黄芩苷高、低剂量组脱硫弧菌属丰度均较模型组降低。各组革兰氏阴性菌与革兰氏阳性菌数目之比,模型组较正常组显著升高(P<0.05),黄芩苷低剂量组较模型组显著降低(P<0.05)。【结论】黄芩苷能治疗高脂饮食引起的代谢性炎症,这可能与黄芩苷能调节肠道菌群的结构有关。; 刘思颖邝枣园张韧谢伟群陈健; 关键词：黄芩苷肠道菌群革兰氏阴性菌

厚朴酚衍生物CT2-3对结肠癌细胞的抑制作用及其机制被引量：1: 2020年; 目的:研究厚朴酚衍生物CT2-3对结肠癌细胞的抑制作用及其机制,为CT2-3在治疗结肠癌中的应用奠定基础。方法:体外培养SW480和LoVo细胞,不同浓度(10,20,40,80μmol·L-1)CT2-3和厚朴酚分别干预24,48 h,采用细胞增殖-毒性检测(CCK-8)法检测CT2-3和厚朴酚对结肠癌细胞增殖的影响;采用平板克隆形成实验检测CT2-3对结肠癌细胞克隆形成能力的影响;进一步采用流式细胞术和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测CT2-3对结肠癌细胞凋亡和DNA损伤标志物磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)蛋白表达的影响;采用活性氧(ROS)试剂盒检测CT2-3对结肠癌细胞内ROS产生的影响;最后用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测CT2-3对结肠癌细胞内线粒体凋亡相关基因B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X基因(Bax)表达的影响。结果:给药24,48 h,厚朴酚对两株结肠癌细胞SW 480和LoVo的半数抑制浓度(IC50)均>80μmol·L-1,CT2-3对SW480细胞的IC50分别为(54.59±1.73)μmol·L-1和(29.82±1.13)μmol·L-1,对LoVo细胞的IC50分别为(66.68±2.11)μmol·L-1和(46.70±1.81)μmol·L-1;与空白组比较,CT2-3(20,40μmol·L-1)组结肠癌细胞克隆形成能力显著下降(P<0.01),且呈浓度依赖性。CT2-3组凋亡细胞显著增加(P<0.01),γH2AX蛋白相对表达显著增加(P<0.01);CT2-3组细胞内ROS水平显著增加(P<0.01);CT2-3组细胞Bcl-2 mRNA相对表达显著下调(P<0.01),Bax mRNA相对表达显著上调(P<0.01)。结论:CT2-3对结肠癌细胞具有显著抑制作用,其机制可能是通过激活Bcl-2/Bax信号通路使线粒体功能受损,促进ROS的产生,进一步诱导DNA损伤,从而导致结肠癌细胞凋亡。; 黄小飞陈子德陶成陈健; 关键词：厚朴酚结肠癌活性氧

油茶活性成分作为护肤因子在化妆品领域的研究进展被引量：6: 2013年; 油茶（Camellia oleifera Abel）是山茶科（Theaceae）山茶属（Camellia Linn）植物，主要分布于热带及亚热带地区。我国的油茶资源非常丰富，主要分布在南方18个省，其中湖南、江西、广西、浙江等省为主要产区，年产茶籽80万吨，产油20多万吨。近年来，具有“东方橄榄油”美誉的油茶因其含有多种活性成分如油茶皂素、茶多酚、黄酮类化合物、油酸、角鲨烯、槲皮素和3-0-酰基槲皮素等具有抗皮肤过氧化与延缓衰老、美白、抗辐射、防晒、抗炎、抗过敏、抑菌等护肤作用越来越受到人们的青睐，被广泛应用于化妆品领域。本文就油茶中的活性成分作为护肤因子应用于化妆品领域的最新研究进展作一综述。1; 陈健戚辉易燕群陈丹魏小勇; 关键词：油茶皂素活性成分化妆品亚热带地区黄酮类化合物

抗糖性白内障候选Ⅰ类新药石斛滴眼液临床前质量控制、急毒及刺激性实验研究被引量：4: 2013年; 该研究旨在建立石斛滴眼液的质量控制方法,并对其进行急性毒性、刺激性及过敏性评价,为其开发利用奠定基础。采用高效液相色谱法测定石斛滴眼液的主要成分石斛酚和丁香酸的含量,石斛酚和丁香酸质量浓度线性范围分别是0.0408～1.5300g·L-1(r=0.9999),0.1008～0.5040g·L-1(r=0.9999),平均回收率分别为100.8%,99.84%,RSD分别为1.4%,1.8%(n=9),样品溶液在室温72h内稳定。小鼠急性毒性实验结果显示石斛滴眼液对小鼠无毒性反应;单次给药和连续给药1周对家兔眼和皮肤的刺激性实验及豚鼠过敏性实验结果显示石斛滴眼液无眼刺激性和无皮肤刺激性及过敏性,表明石斛滴眼液安全、稳定,具有较好的成药性。; 易燕群杨巧红苏俊芳陈健戚辉陈丹魏小勇; 关键词：刺激性

补益肝肾法结合虫类药治疗腰椎管狭窄症的临床研究: 目的：　　本研究通过观察补益肝肾法结合虫类药对腰椎管狭窄症患者的临床疗效，以客观评价补益肝肾法结合虫类药的有效性及安全性，为腰椎管狭窄症的中医药治疗提供一定的依据，并进一步阐明中医药在治疗腰椎管狭窄症方面的独特优势。　　...; 陈健; 关键词：腰椎管狭窄症补益肝肾法虫类药治疗临床疗效

陈健

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