郭永利
- 作品数：6 被引量：31H指数：4
- 供职机构：厦门大学生命科学学院国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心更多>>
- 发文基金：福建省科技重大专项教育部跨世纪优秀人才培养计划福建省科技重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 适于HIV-1 p24抗原检测试剂的单抗制备与筛选被引量：1
- 2007年
- 目的制备抗HIV-1p24单克隆抗体(单抗,McAb),并利用双抗体夹心ELISA法建立HIV-1p24抗原检测试剂。方法以基因工程原核重组抗原HIV-1p24蛋白免疫BALB/c小鼠,利用常规杂交瘤技术和间接ELISA法制备单克隆抗体,单抗经纯化和HRP标记后,利用双抗体夹心ELISA筛选检测p24蛋白的最佳配伍单抗以期建立HIV-1p24抗原检测试剂。结果成功筛选到16株稳定分泌抗HIV-1p24单抗的杂交瘤细胞株,并从中筛选出最佳单抗配伍组合“16G12+2F2b-HRP”,该组合对p24蛋白的检测灵敏度为20pg/mL,对感染性克隆pNL4-3表达的HIV病毒培养上清检测呈阳性,对100份HIV阴性人血清无非特异性反应,显示出良好的检测灵敏度和特异性。结论本研究初步成功地建立了HIV-1p24抗原的检测试剂,并为最终建立HIV第四代诊断试剂(HIV Ag/Ab Assay)奠定了坚实的基础。
- 郭永利陈毅歆黄德党罗海峰葛胜祥程通张军夏宁邵
- 关键词：HIV-1单克隆抗体夹心ELISA
- 一种新型H5N1禽流感病毒血凝素抗原快速检测试剂的建立被引量：10
- 2006年
- 利用5株广谱特异性抗H5亚型血凝素单克隆抗体和酶联免疫渗滤技术成功地建立了一种适于现场检测H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白的抗原快速检测试剂H5-HA(Ag)Dot-ELISA。该试剂对41株代表当前亚洲地区流行的各种遗传变异亚系H5N1禽流感病毒检测均为阳性,对多数毒株的分析灵敏度优于0.1个血凝滴度(HA titer),其中部分优于0.01个血凝滴度;比较该试剂与早期开发的同类ELISA试剂,发现前者对后者未能检出的H5N1新变异株检测均为阳性;利用该试剂和商品化Directigen Flu A(BD)试剂检测两株H5N1病毒株,提示前者灵敏度高于后者;该试剂对一株H5N1病毒的检测灵敏度与标准RT-PCR相当;该试剂对24株非H5亚型病毒检测均为阴性,显示出良好特异性。以上结果提示,此研究建立的H5N1病毒抗原快速检测试剂在H5禽流感现场检测上具有较好的应用前景。
- 葛胜祥徐飞海罗海峰陈毅歆郭永利陈自敏王嘉罗文新吴婷张军陈鸿霖管轶夏宁邵
- 关键词：禽流感病毒H5N1血凝素单克隆抗体
- HCV core抗原检测系统的初步建立
- 丙型肝炎病毒/(Hepatitis C virus,HCV/)是一种小包膜RNA病毒,主要经血液传播,可引起急、慢性病毒性肝炎,并常导致慢性进行性肝病,肝硬化/(Hepatocellular cirrhosis,HC/)...
- 郭永利
- 关键词：HCV核心蛋白单克隆抗体
- 文献传递
- 一株抗H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白单克隆抗体的广谱中和活性被引量：4
- 2007年
- 以H5N1禽流感病毒株Ck／HK／Yu22／02作为抗原，应用常规杂交瘤技术和血凝抑制实验筛选出抗H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白的单抗8H5，单抗8H5经免疫荧光鉴定具有很好的H5特异性。选择33株2002～2006年不同地域，不同宿主中分离的不同遗传变异亚系的H5N1病毒代表株，对单抗8H5分别进行血凝抑制实验及中和试验分析，结果显示单抗8H5对所有H5亚型病毒均有较强反应，而对非H5亚型标准病毒株均不反应，说明8H5是一株广谱性抗H5特异性中和单抗，并提示单抗8H5的HA识别表位可能是一个相当保守的中和表位。并且单抗8H5双抗夹心系统的初步评价显示了其在诊断应用上的前景。
- 罗海峰陈毅歆陈自敏郭永利王嘉张军陈鸿霖管轶夏宁邵
- 关键词：禽流感病毒H5N1单克隆抗体血凝素
- H5N1禽流感病毒血凝素抗原快速检测试剂对不同现场标本的检测比较被引量：4
- 2007年
- 利用H5亚型禽流感病毒血凝素抗原快速检测试剂“H5-HA（Ag）Dot-ELISA（H5-Dot）”对来自陆禽、水禽的484份气管拭子、泄殖腔拭子和粪便拭子标本进行检测，结果：①不同采集方式的H5N1阳性标本的检出率高低有别，气管拭子的检出率最高，泄殖腔拭子次之，粪便拭子最低（P〈0．05），因此建议现场采样时应尽可能采集气管拭子标本；②陆禽标本检出率显著高于水禽标本（P〈0．05），对病毒培养阳性的陆禽气管拭子检出率达80％（95％CI：70．6％～87．8％），对水禽气管拭子标本的检出率为38％（95％CI：26．9％～49．4％），可能与标本中病毒滴度高低有关；③有症状与无症状陆禽标本的检出率无显著差异。另外，H5-Dot试剂对333份非H5病毒气管拭子标本的特异性为99．4％（95％CI：97．9％～99．9％）。这些结果表明，H5-Dot是一种较为可靠的H5亚型禽流感病毒早期快速检测方法，在缺乏仪器设施和高素质专业技术人员的H5N1禽流感病毒防控第一线具有重要推广价值。
- 陈毅歆罗海峰徐飞海葛胜祥陈自敏郭永利王嘉罗文新吴婷张军陈鸿霖管轶夏宁邵
- 关键词：禽流感病毒H5N1血凝素拭子
- 高致病性H5亚型禽流行性感冒病毒血凝素单克隆抗体的制备与初步应用被引量：20
- 2005年
- 以禽流感病毒株Ck/HK/Yu22/02(H5N1)作为免疫原,利用常规杂交瘤技术和血凝抑制试验法成功地筛选出6株稳定分泌抗高致病性H5亚型禽流感病毒血凝素的单克隆抗体(单抗),分别命名为2F2、3C8、3FC1、7C6、10HD4和13G4。经血凝抑制试验法分析,结果发现这6株单抗具有特异性高、反应性强、识别谱宽且互补等特点。基于单抗2F2,初步建立了三种H5N1病毒诊断方法,经评估证实均具有很好的特异性。由此说明,研究制备的抗H5亚型禽流感病毒血凝素单抗可适用于H5N1病毒的诊断。
- 陈毅歆罗海峰葛胜祥郭永利彭耿王嘉陈鸿霖张军管轶夏宁邵
- 关键词：血凝素单克隆抗体酶联免疫吸附试验
