郝小惠
- 作品数：49 被引量：203H指数：8
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- 二氧化硅刺激A549细胞水通道蛋白4表达研究
- 2014年
- 目的探讨二氧化硅(Si O2)刺激的人肺泡上皮细胞系A549细胞水通道蛋白4(AQP-4)的表达及意义。方法将A549细胞分为0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 h染尘组和抑制剂组,各染尘组分别以质量浓度为50 mg/L的Si O2混悬液刺激相应时间,抑制剂组先以浓度为100μmol/L的AQP-4抑制剂TGN-020孵育2.0 h,再以质量浓度为50mg/L的Si O2混悬液刺激1.0 h,另设不予任何处理的对照组;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测AQP-4 mRNA表达。同时,将A549细胞分为3.0、6.0、12.0、24.0 h染尘组和抑制剂组,各染尘组分别以质量浓度为50 mg/L的Si O2混悬液刺激相应时间,抑制剂组先以浓度为100μmol/L的TGN-020孵育2.0 h,再以质量浓度为50 mg/L的Si O2混悬液刺激6.0 h,另设不予任何处理的对照组;分别采用免疫印迹法和免疫细胞化学法检测AQP-4蛋白表达。结果 RT-PCR分析结果显示:与对照组比较,Si O2刺激后A549细胞AQP-4 mRNA相对表达水平呈现先升高后逐渐下降趋势,于刺激1.0 h后达到高峰值(P<0.05),于刺激8.0 h后趋于正常水平(P>0.05)。免疫印迹法和免疫细胞化学法分析结果均显示:与对照组比较,Si O2刺激后A549细胞AQP-4蛋白呈现先升高后逐渐下降趋势,于刺激6.0 h后达到高峰值(P<0.05),但于刺激24.0 h后仍未下降至正常水平(P<0.01)。抑制剂组AQP-4的mRNA相对表达水平和蛋白表达水平均低于Si O2刺激相同时间的染尘组(P<0.01)。结论 Si O2刺激使A549细胞AQP-4的表达增高,其特异性抑制剂可抑制Si O2刺激引起的AQP-4表达增高,推测AQP-4可能参与了矽肺的发生发展过程。
- 喻昌利张芳郝小惠刘和亮
- 关键词：水通道蛋白4二氧化硅A549细胞矽肺免疫印迹法免疫细胞化学法
- 矽肺模型大鼠各器官硅元素水平测定被引量：3
- 2012年
- ①目的探讨硅元素在矽肺模型大鼠各器官组织中的分布情况。②方法雄性Wistar大鼠按体质量随机分为2组,即对照组、染尘组。染尘组依据染尘时间(1、3、5、7、14、21和28d)分为7个亚组,每组5只大鼠。取大鼠心、肝、脑、脾、肺、肾等器官组织,采用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)测定样品中硅元素的水平,并进行准确度和精确度实验;取每只大鼠右下肺最大横径处肺组织用于石蜡包埋切片,常规行HE染色进行病理学观察。③结果染矽尘大鼠各器官组织中硅元素水平在SiO2进入体内后即可上升,并随时间的推移呈升高趋势且分布存在差异。④结论矽肺模型大鼠各器官组织硅元素水平浓度分布大小依次为肺、心、肝、脾、肾、脑。ICP-MS法可以较好地检测硅元素,具有一定的意义及价值。
- 王宏丽郝小惠白玉萍李清钊刘和亮
- 关键词：二氧化硅矽肺
- 姜黄素对矽肺大鼠肺组织水通道蛋白-1表达影响被引量：6
- 2012年
- 目的探讨姜黄素对矽肺大鼠肺组织水通道蛋白-1(AQP-1)表达的影响及意义。方法雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组、生理氯化钠溶液组、矽肺模型组、姜黄素组和溶剂对照组。后3组均一次性气管内给予质量浓度为50 g/L的矽尘混悬液1 ml,生理氯化钠溶液组一次性气管内注入等体积的生理氯化钠溶液。染尘第2天,姜黄素组给予质量浓度为20 g/L姜黄素300 mg.kg-1.d-1(0.5%羧甲基纤维素钠溶解),溶剂对照组给予质量分数为0.5%羧甲基纤维素钠15 ml.kg-1.d-1。于第29天处死动物,采用免疫组织化学、免疫印迹法、实时荧光定量聚合酶链反应法检测大鼠肺组织AQP-1及mRNA表达。结果矽肺模型组、溶剂对照组肺组织中AQP-1表达较正常对照组和生理氯化钠溶液组减低(P<0.05),姜黄素组肺组织AQP-1表达较矽肺模型组增强(P<0.05)。结论姜黄素可使大鼠矽肺模型肺组织中AQP-1表达增强,提示姜黄素可能通过影响AQP-1的表达,在矽肺的发病过程中具有一定的保护作用。
- 郝小惠王宏丽刘和亮张丽李艳辉
- 关键词：姜黄素二氧化硅矽肺水通道蛋白-1
- 曲古柳菌素A对肺癌A549细胞凋亡的影响被引量：2
- 2009年
- 目的：检测不同浓度的组蛋白去乙酰化酶抑制剂古曲柳菌素A（TSA）对A549细胞周期及细胞凋亡的影响，探讨TSA抑制A549肺癌细胞的分子机制。方法：以流式细胞术分析，AnnexinV／PI法，免疫印迹研究TSA对A549细胞的细胞周期、凋亡及Bax蛋白水平变化的影响。结果：TSA处理后，100nmol／L和400nmol／L引起细胞G0／G1及G2／M期阻滞。Annexinv／PI法显示TSA可诱导细胞凋亡。Bax蛋白的表达随着TSA浓度的增高而增强。结论：不同浓度的TSA对A549细胞周期阻滞影响不同，低浓度可诱导细胞凋亡。
- 郝小惠郭志义裴鑫张业赵侣宇武慧静张旋杨方
- 关键词：肺癌细胞细胞周期BAX蛋白
- SiO2刺激矽肺肺泡巨噬细胞上清介导的人胚肺成纤维细胞基质金属蛋白酶-2／9的表达
- 2010年
- 目的探讨SiO2体外刺激矽肺患者的肺泡巨噬细胞（AM）培养上清对人胚肺成纤维细胞（HELF）基质金属蛋白酶（MMP）-2／9的表达的影响。方法将矽肺患者的AM在体外经SiO2刺激24h后收集其培养上清，与HELF共同孵育12、24、36、48、72h，用免疫细胞化学方法检测各时间点HELF中MMP-2／9蛋白表达；明胶酶谱法检测各时间点HELF培养液的MMP-2／9活力的表达。结果经Si02刺激后，实验组HELF在24、36、48、72hMMP一2活力的表达增强，分别为1．572_＋0．104、1．786±0．125、1．987_＋0．130、2．147±0．156，与同期对照组相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。实验组HELF在24、36、48、72hMMP．9活力的表达增强，与同期对照组相比，差异有统计学意义（P〈O．01）。实验组HELF在24、36、48、72hMMP．2蛋白的表达增强，分别为0．171±0．018、0．200±0．018、0．221±0．023、0．212±0．020，与同期对照组相比，差异有统计学意义（P〈0．05）；实验组HELF在24、36、48、72hMMP-9蛋白的表达增强，与同期对照组相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论SiO：可通过AM介导促进HELF中MMP-2和MMP-9蛋白及活力表达。
- 郝小惠郭志义张丽杨方裴鑫
- 关键词：成纤维细胞基质金属蛋白酶
- 通莲汤对胃癌MGC803细胞周期及NF-κBs信号通路的影响被引量：6
- 2013年
- 目的：研究通莲汤对胃癌MGC803细胞形态、生长周期的调节作用及细胞核转录因子κB（NF-κB）信号通路的影响,以探讨该方抑制胃癌细胞增殖的机制.方法：将MGC803细胞以1×104个细胞/孔的密度接种于96孔细胞培养板,以含5％胎牛血清DMEM培养液培养,37℃,5％饱和湿度的CO2培养箱孵育,细胞贴壁24 h,分别加入浓度为25～800 mg·L-倍比梯度的通莲汤提取液,以10 ～ 160 mg·L-1倍比浓度的氟脲嘧啶为阳性对照组,孵育48 h后,倒置显微镜下观察细胞形态,MTT比色法检测细胞增殖变化,曲线拟合法计算通莲汤和氟脲嘧啶50％抑制浓度（IC50）;以两者48 h IC50浓度处理细胞48 h,流式细胞技术（FCM）测定细胞周期,Western blot法测定细胞IκB激酶β（IKKβ）,NF-κB,phosph-NF-κB蛋白水平.结果：通莲汤和氟脲嘧啶48 h IC50值分别为192.74 mg.L-1,23.61 mg·L-1;与空白对照组相比,通莲汤显著影响MGC803细胞周期中G2期,氟脲嘧啶显著影响MGC803细胞周期中G1期（P＜0.05）;通莲汤和氟脲嘧啶均能显著抑制IKKβ与NF-κB的蛋白表达.结论：通莲汤抑制MGC803细胞生长与抑制细胞于G2期,下调NF-κB通路中IKKβ,NF-κB蛋白的表达有关.
- 王亚贾永森喇孝瑾田炜韩炳生李继安郝小惠Hegyi Gabriella
- 关键词：胃癌MGC803细胞氟脲嘧啶细胞周期核转录因子ΚB
- 尘肺患者血清中TGF-β、PDGF的表达及意义被引量：11
- 2011年
- 目的探讨TGF-β和PDGF在尘肺患者不同阶段不同类型血清中的表达及其意义。方法对70例尘肺组,其中矽肺42例,煤工尘肺28例,Ⅰ期尘肺病例48例,Ⅱ+Ⅲ期为22例,以及同期健康体检者40例对照组,抽取空腹静脉血5 ml,采用ELISA方法进行检测。结果尘肺组血清中TGF-β和PDGF的含量均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);矽肺组血清中TGF-β和PDGF的含量均高于煤工尘肺组,差异有统计学意义(P<0.05),尘肺组中随着期别的升高,血清中TGF-β和PDGF的含量反而降低,差异有统计学意义(P<0.05);对尘肺血清中TGF-β和PDGF的含量进行相关性分析,两者成正相关(r=0.743,P<0.05)。结论 TGF-β、PDGF表达水平与尘肺病的发生、接尘种类和期别存在一定的相关关系,为尘肺病的预警和健康监护提供有意义的生物学指标。
- 李娟范雪云郝小惠李欢
- 关键词：尘肺TGF-ΒPDGF
- IL-12对小鼠哮喘模型气道炎症及TNF-α和IL-10水平的影响被引量：10
- 2012年
- 支气管哮喘（简称哮喘）是由多种细胞和细胞组分参与的气道慢性炎症性疾病[1],被世界卫生组织列为疾病中四大难症之一[2],在世界范围内广泛流行。已成为美国18岁以下人群住院的第3位原因, 仅次于肺炎和外伤。目前全球的哮喘患者已达3亿，我国的哮喘儿童多达2000万。虽然具有极高的发病率和死亡率，但其发病机制仍不十分清楚。
- 王红阳王宏丽王袁郝小惠刘和亮
- 关键词：小鼠哮喘模型肺部炎症白细胞介素10白细胞介素12
- 骨髓基质干细胞复合同种骨移植治疗创伤性股骨头坏死实验研究被引量：3
- 2010年
- 目的探讨骨髓基质干细胞复合同种骨移植在治疗创伤性股骨头坏死中的成骨作用。方法6月龄SD大鼠36只,随机分为模型组、髓芯减压组及复合骨组。每组12只。取4周龄SD大鼠骨髓基质干细胞体外分离培养,取生长状态良好的第三代细胞复合同种骨粉;采用圆韧带离断方法制备大鼠创伤性股骨头坏死动物模型;于术后1、2、4、6周分别处死动物;光镜下观察三组间病理形态学改变;骨形态计量学参数测量及计算新骨生成量,得出骨小梁相对体积(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁分离度(Tb.Sp)。结果成功的复制出大鼠股骨头坏死模型,呈现出典型股骨头坏死不同时期病理改变;术后6周,骨形态计量学参数检测结果:复合骨组新骨生成量均多于模型组及髓芯减压组,其参数BV/TV、Tb.N、Tb.Th、Tb.Sp与其他二组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论BMSCs复合同种骨支架可作为"活骨"用于ONFH模型治疗并在其修复中可提高诱导成骨能力及股骨头坏死的骨修复能力,其作用优于单纯髓芯减压。
- 李琪佳宋会平邓华民郭静郝小惠王志强
- 关键词：骨髓基质干细胞同种骨股骨头坏死骨形态计量学
- DNA甲基化在热休克诱导细胞周期素D1表达水平降低中的转录调控机制被引量：1
- 2012年
- 目的研究DNA甲基化在热休克诱导的人细胞周期素D1基因启动子活性下降调控中的作用。方法 DNA甲基化通过甲基化特异性PCR方法检测。甲基化位点突变采用Stratagene公司定点突变试剂盒。甲基化位点的作用通过报告基因技术分析启动子活性确认。结果热休克处理可能造成细胞周期素D1基因启动子+65/67位点发生DNA甲基化,而突变该位点逆转了由报告基因活性分析研究的热休克效应。结论启动子+65/67位点的DNA甲基化可能调控细胞周期素D1的热休克效应。
- 郭志义郝小惠高雯雯姜雪莲赵丹丹陈远杨方
- 关键词：DNA甲基化甲基化特异性PCR热休克细胞周期素D1
