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重组人前列腺特异性抗原在毕赤酵母中的表达和活性测定: 前列腺特异性抗原(prostate-specificantigen)由KLK3基因编码，KLK3基因位于19q13.2-q13.4，基因全长6KB，含有5个外显子和4个内含子，转录后的mRNA全长1446bp，转录受雄激...; 邹冬辉; 关键词：前列腺特异性抗原毕赤酵母基因表达前列腺癌; 文献传递

短期糖尿病雄鼠睾丸氧自由基和抗氧化水平的研究被引量：23: 2003年; 目的　探讨大鼠睾丸组织在短期糖尿病状态下氧自由基和抗氧化水平的变化。方法　 4 8只Wistar雄性大鼠被随机分为 6组 ,每组 8只 :其中 1组腹腔注射枸橼酸缓冲液作为正常对照组 ,其余 5组腹腔注射链脲菌素 ,分别观察 1,3,5 ,7,14d。观察期满后断头处死 ,取睾丸 ,制备组织匀浆 ,分别检测组织中SOD、MDA、GSH、GST、GSH px、NO和NOS水平。结果　与正常大鼠相比 ,糖尿病大鼠睾丸组织中总SOD活力下降 ,MDA含量上升 ;GSH含量和GSH px 活力无显著性变化 ,GST活力下降 ;NO含量及NOS活力均下降。结论　睾丸组织的氧自由基 ,主要是O2 含量增加以及NO合成受抑制。; 王忠山赵慧邹冬辉许宗革辛暨丽; 关键词：雄鼠睾丸氧自由基抗氧化生殖功能障碍性功能障碍

短期糖尿病大鼠睾丸的细胞学变化被引量：11: 2003年; 目的:探讨糖尿病发病初期大鼠发生性与生殖功能障碍的细胞学机制。方法:通过给成龄雄性大鼠腹腔注射链脲菌素制成糖尿病动物模型,分别观察1d、3d、5d、7d、14d。观察期满后断头处死,取睾丸。应用常规组织学方法观察睾丸组织形态的改变;应用流式细胞分析术检测睾丸间质细胞、支持细胞及各级生精细胞的细胞周期的改变。结果:睾丸间质细胞及生精细胞的形态、数目从致病d7开始有明显变化,支持细胞的形态无明显变化;睾丸中各类细胞在高糖环境下24h即发生增殖减慢、细胞滞留在G1期、DNA合成减少等改变。结论:糖尿病大鼠生殖功能障碍与睾丸间质细胞、生精细胞的形态、数目变化及睾丸各类细胞的增殖改变有关。; 赵慧王忠山邹冬辉许宗革; 关键词：细胞学糖尿病生殖功能障碍细胞周期

重组人前列腺特异性抗原纯化与活性鉴定: 2008年; 目的:纯化和鉴定重组人前列腺特异性抗原(PSA),为PSA的生物学特征研究、临床检测和治疗应用提供关键材料。方法:采用阳离子交换层析技术纯化重组PSA(rPSA),利用Western blotting鉴定其特异性,利用PSA底物S-2586检测rPSA活性。结果:最适甲醇诱导浓度为1.5%,经鉴定纯化的rPSA为人PSA。在不同反应条件下,在3.5h内酶活性与时间成正比,rPSA活性显著高于正常精浆PSA酶活性(P<0.05),酶活性的最适温度为30℃。结论:成功纯化出具有酶活性的rPSA。; 邹冬辉张家颖路英丽郭焱王忠山; 关键词：前列腺特异性抗原酶活性检测分离纯化

短期糖尿病雄鼠前列腺细胞学变化的动态研究: 为探讨短期糖尿病对腹侧前列腺的影响,该实验通过STZ制成糖尿病鼠模型,分别观察1天(D<,1>),3天(D<,3>),5天(D<,5>),7天(D<,7>)和14天(D<,14>).应用常规组织学方法,研究短期糖尿病腹侧...; 邹冬辉; 关键词：糖尿病细胞凋亡细胞周期; 文献传递

重组人前列腺特异性抗原在毕赤酵母中的表达被引量：1: 2005年; 目的建立毕赤酵母表达PSA系统,获高活性人前列腺特异性抗原,为临床相关疾病的监测,诊断和治疗提供关键材料。方法构建表达载体pPICZα-mPSA质粒,采用电转法,将pPICZα-mPSA质粒转染毕赤酵母X33细胞,Zeocin筛选转染细胞,甲醇诱导X33细胞表达rPSA,ELASA试剂盒筛选高表达rPSA的细胞株。结果构建了表达载体pPICZα-mPSA,获得了高表达rPSA的酵母X33细胞株,表达量为1.2mg/L。结论应用酵母表达体系成功表达人前列腺特异性抗原。; 邹冬辉张家颖路英丽左文静张媛媛王忠山; 关键词：前列腺特异性抗原毕赤酵母基因表达

人腺体激肽释放酶基因重组表达载体pPICZαChK2的构建被引量：1: 2004年; 目的 :构建人腺体激肽释放酶 (h K2 )基因的酵母表达载体。方法 :利用 RT- PCR法从人正常前列腺组织中扩增出 h K2基因 ,先将其克隆到 p GEM- T载体 ,进行序列测定和分析 ,然后将 h K2基因亚克隆至酵母p PICZαC表达载体上 ,进行鉴定。结果 :获得一个核苷酸长度为 738bp的基因 ,同源比较结果表明 ,与 Gen Bank(NCBI:AF18874 6 )公布的 h K2的基因序列有 99%的同源性 ,序列分析表明有一个氨基酸出现变异。酶切表明 h K2基因正确插入酵母表达载体 p PICZαC。结论 :成功构建出 h K2基因的酵母表达载体 p PICZαCh K2。; 路英丽张家颖邹冬辉张媛媛李丹地王忠山; 关键词：基因表达

短期糖尿病雄性大鼠前列腺自由基和抗氧化水平变化研究被引量：20: 2003年; 目的 :研究短期糖尿病雄性大鼠前列腺氧自由基和抗氧化物酶的动态变化。方法 :4 8只Wistar雄性大鼠随机分为 6组 (每组 8只 )。1组腹腔注射枸椽酸缓冲液作为正常对照组 ,其余 5组腹腔注射链脲菌素 (STZ)制成糖尿病模型 ,分别观察 1d (D1)、3d (D3 )、5d (D5)、7d (D7)和 14d (D14 ) ,取前列腺组织制备组织匀浆 ,分别测定组织中超氧化物歧化酶 (SOD)、丙二醛 (MDA)、谷胱甘肽 (GSH)、谷胱甘肽转移酶 (GST)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH -px)、一氧化氮 (NO)及一氧化氮合酶 (NOS)的水平。结果 :糖尿病组前列腺MDA ,GSH -px和NO水平显著高于正常组 ;SOD、GSH、GST和NOS水平呈现先升高后下降的趋势。结论 :短期糖尿病雄性大鼠前列腺组织处于氧化应激状态。; 王忠山邹冬辉赵慧许宗革刘颖丽; 关键词：糖尿病前列腺自由基

人前列腺特异性抗原基因重组表达载体pPICZαC-mPSA的构建和表达(英文): 2006年; 目的在毕赤酵母细胞中表达PSA,为临床的检测和治疗提供材料。方法经RT-PCR获得PSA全长cDNA并测序。将编码成熟PSA237氨基酸的cDNA序列插入毕赤酵母表达载体pPICZα-C,该载体含有AOX1启动子和α-factor信号肽序列,构建表达载体体pPICZαC-mPSA。甲醇诱导X33细胞表达rPSA,ELASA试剂盒筛选高表达rPSA的细胞株。结果获得了人PSA全长序列,构建了表达载体pPICZα-mPSA。获得了高表达rPSA的酵母X33细胞株,表达产量为1.2mg/L。结论建立了重组人前列腺特异性抗原的毕赤酵母表达体系,规模化的生产有助于PSA的生物学特性的研究和临床检测和治疗的应用.; 邹冬辉张家颖郭焱路英丽左文静王忠山; 关键词：前列腺特异性抗原毕赤酵母

人腺激肽释放酶2在毕赤酵母中的表达及活性测定: 2007年; 目的:利用在巴氏毕赤酵母细胞表达重组人腺激肽释放酶2(rhK2)。方法:构建表达载体pPICZαC-mhK2及具有3个表达盒子的pPICZαC-3mhK2。采用电转法,将重组表达质粒转染毕赤酵母X33细胞,甲醇诱导表达,离子交换层析纯化rhK2蛋白;检测rhK2的酶活性。结果:获得了高表达rhK2的酵母细胞株,其酶活性接近正常精浆中hK2的活性。结论:毕赤酵母能够成功表达具有天然活性的人腺激肽释放酶2(hK2)。; 路英丽赵慧邹冬辉李丹地郭焱王忠山; 关键词：毕赤酵母

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邹冬辉