邵丽丽
- 作品数:13 被引量:27H指数:4
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- 转染IL-27基因对人胰腺癌细胞抗肿瘤活性研究
- 目的构建表达 IL-27基因的人胰腺癌细胞株,研究 IL-27基因诱导细胞凋亡及其抗肿瘤活性作用。方法将 IL-27基因转染人胰腺癌细胞 Aspc1,经 G418筛选获得表达 IL-27的阳性细胞克隆(Aspcl/IL-...
- 邵丽丽单保恩
- 关键词:IL-27基因转染人胰腺癌细胞抗肿瘤作用IFN-
- 文献传递
- 转染IL-27基因对人胰腺癌细胞抗肿瘤活性研究
- 目的:构建表达IL-27基因的人胰腺癌细胞株,研究IL-27基因诱导细胞凋亡及其抗肿瘤活性作用。方法:将IL-27基因转染人胰腺癌细胞Aspc1,经G418筛选获得表达IL-27的阳性细胞克隆(Aspc1/IL-27),...
- 邵丽丽单保恩
- 文献传递
- IL-27促进人胰腺癌Aspc1细胞凋亡被引量:2
- 2010年
- 目的:探讨IL-27基因对人胰腺癌Aspc1细胞凋亡的影响及其体内抗肿瘤作用。方法:重组载体PA317/IL-27转染Aspc1细胞,G418筛选稳定转染IL-27基因的Aspc1细胞(Aspc1/IL-27)。ELISA、细胞计数法和流式细胞术分别检测IL-27对Aspc1细胞IL-27表达、细胞增殖和MHC-Ⅰ类分子表达的影响。将Aspc1/IL-27、Aspc1/LXSN(稳定转染空质粒的Aspc1细胞)和Aspc1细胞接种于裸鼠右背部皮下,观察Aspc1细胞移植瘤的生长情况和小鼠的生存期;TUNEL法检测移植瘤细胞的凋亡,电镜观察移植瘤细胞的超微结构变化。结果:成功建立稳定转染PA317/IL-27载体的Aspc1/IL-27细胞株。Aspc1/IL-27细胞高表达IL-27,而Aspc1/LXSN和Aspc1细胞不表达IL-27(P<0.01)。PA317/IL-27载体转染不影响Aspc1细胞表面MHC-Ⅰ类分子的表达(P>0.05)。Aspc1/IL-27组裸鼠移植瘤生长速度明显慢于Aspc1/LXSN组及Aspc1组(P<0.05),且生存期延长(P<0.05)。Aspc1/IL-27组移植瘤细胞凋亡率明显高于Aspc1/LXSN和Aspc1组[(19.5±2.4)%vs(8.5±0.3)%、(9.1±0.8)%,P<0.01]。结论:IL-27基因转染胰腺癌Aspc1细胞后通过诱导肿瘤细胞凋亡发挥抗肿瘤作用。
- 刘丽华郝国贞张璁艾军邵丽丽单保恩
- 关键词:胰腺肿瘤凋亡增殖
- IL-27基因对Eca109细胞在裸鼠体内的成瘤抑制作用及其机制被引量:5
- 2008年
- 背景与目的:细胞因子为主的肿瘤生物治疗已成为肿瘤研究领域热点之一。本研究观察白细胞介素(interleukin,IL)-27基因转染人食管癌Eca109细胞株后在裸鼠体内的成瘤抑制作用及其机制。方法:以逆转录病毒为载体,采用基因转染的方法用G418梯度筛选法建立转染IL-27基因的Eca109细胞,RT-PCR检测其基因导入情况,ELISA法检测IL-27的分泌和其诱导外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)产生γ-干扰素(interferon,IFN)的能力,MTT法观察Eca109/IL-27细胞生长情况。将Eca109/IL-27、Eca109/LXSN和Eca109细胞接种于裸鼠皮下,观察其成瘤性、移植瘤的生长情况并计算抑瘤率。流式细胞技术检测移植瘤组织肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocyte,TIL)中CD16、FasL的表达和肿瘤细胞上Fas的表达。结果:RT-PCR示Eca109/IL-27细胞中有IL-27p28和IL-27EBI3亚基基因表达,Eca109/LXSN和Eca109细胞中未见表达(P<0.01),从而成功建立稳定转染的Eca109/IL-27细胞株,ELISA检测Eca109/IL-27中IL-27的分泌量高于Eca109/LXSN和Eca109细胞(P<0.01)。IL-27基因转染不影响人食管癌细胞株的体外生长(P>0.05),Eca109/IL-27诱导PBMC产生IFN-γ含量高于Eca109/LXSN和Eca109[(56.28±1.61)pg/mL vs.(12.70±0.82)pg/mL]和(11.06±0.64)pg/mL,P<0.01),Eca109/IL-27移植瘤体积较Eca109和Eca109/LXSN减小,瘤重减轻,有抑瘤作用(P<0.05);Eca109/IL-27细胞接种的肿瘤组织TIL中CD16阳性率升高,FasL的表达增高(P<0.05),肿瘤细胞表面Fas表达增加(P<0.05)。结论:IL-27基因修饰Eca109细胞在裸鼠体内产生了抑制肿瘤生长的作用,其机制可能是通过活化自然杀伤细胞,以Fas/FasL的途径产生的。
- 刘丽华单保恩邵丽丽王士杰
- 关键词:ECA109细胞裸鼠移植瘤抑瘤
- IL-27基因转染人食管癌细胞诱导PBMC产生IFN-γ和IL-12的研究被引量:9
- 2008年
- 目的:探讨小鼠白介素(mIL-27)基因转染人食管癌细胞株诱导正常人外周血单个核细胞(PBMC)产生IFN-γ和IL-12的作用。方法:以逆转录病毒作为载体,将mIL-27基因转染入人食管癌细胞株Eca109获得表达mIL-27的阳性细胞克隆(Eca109/mIL-27),RT-PCR检测目的基因的表达,用MTT法检测转基因mIL-27对细胞增殖的影响,用ELISA法检测其诱导正常人PBMC产生IFN-γ和IL-12的能力。结果:建立了表达mIL-27基因的人食管癌细胞株,Eca109/mIL-27细胞中有mIL-27p28和EBI3亚基基因表达,而Eca109/LXSN和Eca109细胞中未见表达,P<0.01;Eca109/mIL-27与Eca109/LXSN和Eca109体外的体外增殖差异无统计学意义,P>0.05;Eca109/mIL-27诱导正常人PB-MC产生IFN-γ和IL-12的含量高于Eca109/LXSN和Eca109,P<0.01。结论:IL-27基因转染人食管癌细胞后可以诱导PB-MC产生IFN-γ和IL-12的能力提高,提示可以用于肿瘤的免疫治疗。
- 刘丽华单保恩邵丽丽王士杰
- 关键词:单核细胞
- IL-27的抗肿瘤作用及对裸鼠肿瘤血管生成作用的影响
- 目的研究IL-27抗肿瘤作用及对裸鼠肿瘤血管生成作用的影响,探讨IL-27的抗肿瘤作用机理。方法IL-27基因转染的人食管癌细胞(Eca109/IL-27)接种于裸鼠腹腔,建立荷瘤裸鼠模型,观察裸鼠生存期。用免疫组化法检...
- 刘丽华王士杰单保恩艾军邵丽丽李巧霞张超
- 关键词:IL-27抗血管生成抗肿瘤
- 文献传递
- 白细胞介素27转染人食管鳞癌细胞在裸鼠体内诱导抗肿瘤免疫应答的研究
- 目的研究IL-27基因转染人食管鳞癌Eca109细胞后在裸鼠体内诱导机体产生免疫反应及抗肿瘤效应的能力。方法1.以逆转录病毒为载体采用基因转染的方法,经G418筛选后建立稳定表达IL-27基因的人食管鳞癌细胞株(Eca1...
- 刘丽华王士杰单保恩艾军邵丽丽李巧霞张超
- 关键词:IL-27基因转染抗肿瘤
- 文献传递
- 转染IL-27基因的食管癌细胞在裸鼠体内的抗肿瘤作用被引量:2
- 2008年
- 目的:将小鼠IL-27基因转染人食管癌细胞株,研究其在裸鼠体内的抗肿瘤活性。方法:以逆转录病毒为载体,将IL-27基因转染人食管癌细胞株Eca109,获得表达IL-27的阳性细胞克隆(Eca109/IL-27),用ELISA法检测细胞IL-27的分泌。将Eca109/IL-27移植裸鼠腹腔,观察瘤细胞的成瘤性和裸鼠的生存期。用RT-PCR检测IL-27基因在裸鼠体内瘤组织中的表达,用流式细胞仪检测CD204表达、细胞周期和细胞凋亡变化。结果:成功建立了表达IL-27基因的人食管癌细胞株Eca109/IL-27,该细胞培养上清中IL-27含量为(137.73±7.00)pg/ml,而Eca109/LXSN和Eca109细胞培养上清中未检出IL-27(P<0.01),但Eca109/IL-27与Eca109/LXSN和Eca109细胞周期和细胞凋亡率无明显差异(P>0.05)。将Eca109/IL-27、Eca109/LXSN和Eca109细胞分别接种裸鼠腹腔15天后,各组裸鼠均于腹腔形成多数瘤结节,Eca109/IL-27组明显少于Eca109/LXSN和Eca109细胞组(P<0.05);Eca109/IL-27组裸鼠的生存期(35天时均无死亡)明显长于Eca109/LXSN和Eca109细胞组[分别为(23.33±1.52)、(24.00±1.37)天](P<0.01);Eca109/IL-27组肿瘤组织中有p28和EBI3亚基基因表达,而Eca109/LXSN和Eca109细胞组瘤组织中未见表达(P<0.01);其CD204表达水平、细胞凋亡率也明显高于接种Eca109/LXSN与Eca109细胞组(P<0.05);G0/G1和G2/M期细胞增多,S期细胞明显减少,与接种Eca109/LXSN和Eca109细胞组比较均有显著差异(P<0.05)。结论:IL-27可于体内促进肿瘤细胞凋亡,阻滞细胞周期发展,提高CD204的表达,延长生存期,发挥抗肿瘤免疫活性。
- 刘丽华单保恩邵丽丽艾军王士杰
- 关键词:IL-27人食管癌细胞裸鼠
- 白细胞介素23在小鼠乳腺癌中的抗肿瘤作用及其免疫机制被引量:5
- 2008年
- 目的:研究白细胞介素23(IL-23)在小鼠乳腺癌中的抗肿瘤作用及其免疫功能变化。方法:将逆转录病毒介导转染IL-23基因的小鼠乳腺癌细胞(IL-23/MA-891)、转染逆转录病毒空载体的小鼠乳腺癌细胞(LXSN/MA-891)及亲代小鼠乳腺癌细胞(MA-891)分别接种于小鼠皮下,观察小鼠成瘤及肿瘤生长情况;30 d时取3组小鼠脾脏和肿瘤组织,用ELISA法检测3组小鼠脾细胞在MA-891诱导下IFN-γ、TNF-α、IL-12和IL-4的产生情况;用流式细胞术(FCM)检测肿瘤组织细胞表面分子MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、CD80、CD86的表达,检测脾细胞中CD11c阳性细胞的比率,并对脾细胞中CD4+、CD8+淋巴细胞进行分选;用免疫组织化学技术对3组肿瘤组织中CD4+、CD8+淋巴细胞浸润情况进行检测。结果:IL-23基因转染组小鼠皮下结节生长速度明显慢于接种空载体转染组及未转染组;接种IL-23/MA-891细胞的小鼠脾细胞可产生较水平的IFN-γ、TNF-α和IL-12等Th1类及相关细胞因子,与接种LXSN/MA-891细胞和MA-891细胞2组小鼠的脾细胞相比明显增高(P<0.01),而Th2类细胞因子IL-4的水平却无统计学意义(P>0.05);接种IL-23/MA-891细胞组小鼠脾细胞中CD11c阳性细胞率、CD4+、CD8+淋巴细胞比率以及肿瘤组织中CD4+、CD8+淋巴细胞浸润程度均较LXSN/MA-891、MA-891组明显增加(P<0.01);IL-23/MA-891细胞组小鼠肿瘤组织细胞表面MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、CD80、CD86分子的表达明显提高(P<0.01)。结论:转染IL-23基因的小鼠乳腺癌细胞所分泌的IL-23具有生物学活性,增强了细胞免疫功能,在小鼠体内发挥了明显的抗肿瘤作用。
- 冯永路刘爽邵丽丽单保恩
- 关键词:白细胞介素23抗肿瘤免疫机制
- 转染IL—27基因对人胰腺癌细胞抗肿瘤活性研究
- 目的构建表达IL-27基因的人胰腺癌细胞株,研究IL-27基因诱导细胞凋亡及其抗肿瘤活性作用。方法将IL-27基因转染人胰腺癌细胞Aspc1,经G418筛选获得表达IL-27的阳性细胞克隆(Aspc1/IL-27), M...
- 邵丽丽单保恩
- 关键词:IL-27基因转染人胰腺癌细胞IFN-Γ
- 文献传递