逯茵茵
- 作品数：6 被引量：19H指数：2
- 供职机构：吉林大学白求恩医学部基础医学院病原生物学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目吉林省产业技术研究与开发项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 超滤过结合密度梯度离心纯化鲍曼不动杆菌噬菌体方法的建立被引量：5
- 2013年
- 目的探讨获得低浓度内毒素和高滴度鲍曼不动杆菌噬菌体的方法,为制备安全的噬菌体生物制剂提供参考。方法用可截留100 kD以上分子量的超滤离心管浓缩噬菌体裂解液并滤出分子量约为10 kD的内毒素,然后用蔗糖密度梯度离心纯化噬菌体浓缩液;分别测定超滤前、超滤后和纯化后的噬菌体滴度,采用鲎试验测定超滤前后内毒素的浓度,通过SDS-PAGE分析超滤前后和纯化后噬菌体蛋白的纯度。结果经超滤离心法噬菌体滴度从3.9×1010PFU/mL提高至1.68×1012PFU/mL,并可去除99.2%的内毒素;超滤过结合密度梯度离心后的SDS-PAGE可清晰呈现7种蛋白,分子量为29～100 kD。结论超滤过结合密度梯度离心是一种简便、快速浓缩和纯化噬菌体的方法,并可有效地去除裂解液中的内毒素。
- 史红艳余静丹王丹逯茵茵孙延波
- 关键词：噬菌体内毒素
- 肺炎克雷伯菌裂解性噬菌体的分离和鉴定
- 肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）属肠杆菌科细菌、革兰染色阴性杆菌，是引起医院内感染的病原菌之。肺炎克雷伯菌引起的侵袭性感染可导致器官（如肾脏、脾脏、大脑和前列腺）和组织的脓肿，特别是近年来，由肺...
- 逯茵茵
- 关键词：噬菌体肺炎克雷伯菌多重耐药性
- 文献传递
- 噬菌体对鲍曼不动杆菌所致小鼠肠源性脓毒症的治疗效果
- 2014年
- 目的 观察噬菌体对鲍曼不动杆菌引起的小鼠肠源性脓毒症的治疗效果.方法 采用双层琼脂法从环境中分离鲍曼不动杆菌噬菌体.通过腹腔注射氨苄青霉素和环磷酰胺的方法,同时经口感染耐氨苄青霉素鲍曼不动杆菌,建立小鼠肠源性脓毒症模型.在细菌感染前1d、感染结束后2d,以及感染结束后6d给予噬菌体治疗,观察小鼠的存活情况.另取未给予噬菌体治疗小鼠作为对照.各组分别设6只小鼠.采用成组设计的两样本均数t检验比较噬菌体治疗组和对照组小鼠外周血和肝脏内炎症因子水平,以及肝脏和脾脏内的细菌数量.结果 鲍曼不动杆菌引起肠源性脓毒症小鼠全部死亡的最小致死量为1×107 CFU/mL.在感染前、结束后2d和6 d给予噬菌体治疗,分别有2,4,3只小鼠存活,对照组全部死亡.噬菌体治疗组小鼠外周血白细胞介素（IL）-1β、肿瘤坏子因子（TNF）-α和IL-6水平分别为（105±6） ng/L,（105±11）ng/L和（104±12） ng/L,明显低于对照组（t=5.04,9.05和9.33,P＜0.01）;噬菌体治疗组小鼠肝脏内的IL-1 β和TNF-α水平分别为（104 ±9） ng/L和（104±11）ng/L,亦低于对照组（t=13.70和12.80,P＜0.01）,但IL-6水平治疗组与对照组比较差异无统计学意义（t=1.06,P＞0.05）;噬菌体治疗组小鼠肝脏和脾脏内细菌数量分别为（2.9±1.3）×103CFU/g和（8.3±7.6）×102 CFU/g,明显低于对照组（=9.16和8.96,P＜0.01）.结论 噬菌体治疗鲍曼不动杆菌引起的肠源性脓毒症确切有效.
- 李菁华余静丹史红艳王丹逯茵茵张哲孙延波
- 关键词：细菌噬菌体鲍氏不动杆菌脓毒症
- 粪肠球菌裂解性噬菌体φEn-ZZ8生物学特性的初步分析被引量：11
- 2015年
- 本研究旨在通过分离粪肠球菌裂解性噬菌体并分析其生物学特性，为噬菌体疗法应用于肠球菌感染提供依据。以粪肠球菌为宿主菌，用双层琼脂法从环境污水中分离出1株裂解性噬菌体（命名为（pEn—ZZ8），对其生物学特性进行初步分析。透射电镜观察发现，φEn-ZZ8头部呈二十面体立体对称，直径约40nm；尾部呈丝状，长约200nm。吸附实验表明，在10min内超过90％的噬菌体可吸附至宿主菌细胞。一步生长曲线显示，yEn．ZZ8的潜伏期为15min，爆发期为40min，爆发量为150pfu／cell。yEn-ZZ8基因组对内切酶HindIU、EcoRV、NdeI、PstI、XbaI和SacⅡ敏感；基因组大小约为42kb。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳至少可见14条蛋白带，相对分子质量为10000130000。φEn—ZZ8对26株粪肠球菌的裂解率达30．8％，其裂解活性在pH5～8和50-70℃条件下仍稳定。结果提示，φEn-ZZ8是一种裂解性强、裂解谱较宽、对温度具有耐受性的裂解性噬菌体，有望成为抗耐药性肠球菌感染的噬菌体生物制剂。
- 张哲李菁华逯茵茵韩放李诗恒孙延波
- 关键词：粪肠球菌耐万古霉素肠球菌噬菌体
- 人乳头瘤病毒16型E7密码子优化后的原核表达及免疫原性研究
- 2014年
- 目的构建人乳头瘤病毒16型(HPV16)E7基因密码子优化后的原核表达系统,通过特异性抗体制备评价E7融合蛋白的免疫原性。方法人工合成优化后的HPV16 E7基因,利用特异引物扩增HPV16 E7基因。将E7基因连接至原核表达载体构建重组表达质粒pMAl-c2X-E7,转化至感受态细胞DE3后,经IPTG诱导,SDS-PAGE分析表达产物E7融合蛋白。纯化后的E7融合蛋白免疫动物,采用ELISA检测动物血清效价。结果 E7基因PCR产物的测序结果与优化后的目的基因序列比对一致。表达的E7融合蛋白经SDS-PAGE分析表明:在相对分子质量50 000处有特异性表达带,与预期相符。以E7融合蛋白制备的多克隆抗体其血清效价可达1∶64 000。结论成功构建的重组表达质粒pMAl-c2X-E7可有效表达MBP-E7融合蛋白,E7融合蛋白具有良好的免疫原性。
- 李菁华史红艳韩放逯茵茵徐国全于丽孙延波
- 关键词：人乳头瘤病毒16型原核表达多克隆抗体
- 噬菌体对黏质沙雷菌感染BALB/c小鼠的保护作用被引量：2
- 2015年
- 本文旨在观察噬菌体对黏质沙雷菌感染小鼠的治疗作用,为噬菌体疗法应用于细菌性感染提供依据。以黏质沙雷菌为宿主菌,采用双层琼脂噬斑法从污水中分离和纯化裂解性噬菌体。将最小致死量的黏质沙雷菌经腹腔感染BALB/c小鼠后,立即腹腔注射不同剂量的噬菌体,观察动物的生存率并确定噬菌体的保护剂量。在动物感染后的不同时间(0、20、40、60和180min)观察噬菌体疗法对动物存活率的影响。将噬菌体和细菌同时或分别注射动物后,分析噬菌体在动物体内的药代动力学。结果显示,经噬斑法从污水中分离出1株裂解性噬菌体(命名为φSM9-3Y),电镜观察发现该噬菌体属有尾噬菌体目肌尾噬菌体科。动物腹腔感染黏质沙雷菌并立即给予噬菌体后发现,当噬菌体的保护剂量为108 PFU/ml时,动物的存活率为100%。动物感染后40和60min给予噬菌体(1010 PFU/ml)治疗,动物的存活率为60%。药代动力学表明,将噬菌体和细菌同时注入动物体内,在6h内噬菌体的滴度维持在1010 PFU/ml。结果提示,噬菌体对黏质沙雷菌所致动物腹腔内感染的治疗是有效的,提示针对细菌性感染的噬菌体疗法具有潜在的应用价值。
- 徐花李毅逯茵茵周佳琦韩放李诗恒孙延波
- 关键词：黏质沙雷菌噬菌体
