辛忠涛
- 作品数:24 被引量:69H指数:5
- 供职机构:军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金总后勤部科研项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学建筑科学环境科学与工程更多>>
- 应用细菌表面展示技术快速筛选抗原表位及研制应急疫苗
- 细菌表面展示技术作为噬菌体表面展示技术的有益补充,已被广泛用于生命科学各个领域。而构建基因工程减毒活疫苗是研究细菌展示系统的最初动因,也是这一系统最活跃的研究方向。但以往研究多是将已知抗原片段或表位展示于细菌表面用作实验...
- 辛忠涛
- 关键词:抗原表位疫苗
- 文献传递
- 两种反转录聚合酶链反应检测甲型肝炎病毒被引量:2
- 2001年
- 目的 建立一种灵敏、特异的 RT- PCR方法检测环境中的 HAV。方法 对两种 RT- PCR,即常规两步法 RT-PCR和一步法 RT- PCR检测 HAV的效果进行了观察 ,并采用半套式 PCR对扩增产物的特异性进行验证。结果 两种RT- PCR与半套式 PCR检测 HAV均得到预期条带 ,所设计的引物对其它的肠道病毒扩增呈阴性 ;在同等反应条件下 ,一步 RT- PCR的反应效率远高于常规 RT- PCR,二者的检测灵敏度也有显著性差异 ,一步 RT- PCR的检测灵敏度为 10TCID5 0 / ml,两步法 RT- PCR检测灵敏度为 10 3TCID5 0 / ml。结论 一步 RT- PCR较常规 RT- PCR易于操作 ,重复性好 ,不易污染 ,具有更高的反应效率和灵敏度。
- 辛忠涛李君文王新为宋农郑金来王中民靳连群
- 关键词:反转录聚合酶链反应甲型肝炎病毒环境监测
- 氯和二氧化氯灭活甲型肝炎病毒机理的研究被引量:10
- 2003年
- 为探讨氯和二氧化氯灭活HAV机理及用PCR评价消毒效果的可行性,采用细胞培养、ELISA及大片段逐步步移RT-PCR方法对消毒前后HAV感染性、HAAg抗原性及HAV核酸全序列进行检测。结果,以含有效氯10 mg/L消毒液作用30 min,或含二氧化氯7.5 mg/L的消毒液作用10 min,对HAV感染性的灭活率均为100%,均可破坏HAV核酸5’非编码区;但检测两者HAAg抗原性P/N值分别为3.21(阳性)与2.02(阴性)。结果表明,HAV感染性的灭活与HAV核酸5’非编码区破坏是一致的,可用PCR技术检测HAV核酸5’非编码区以判定HAV灭活与否。
- 李君文辛忠涛王新为宋农郑金来
- 关键词:氯二氧化氯病毒灭活甲型肝炎病毒消毒效果
- PCR检测甲型肝炎病毒研究进展被引量:1
- 2000年
- 辛忠涛李君文
- 关键词:甲型肝炎HAV聚合酶链反应
- 一步多重PCR同时检测甲型肝炎和脊髓灰质炎病毒研究被引量:2
- 2000年
- 建立的一步PCR方法即反转录和PCR在同一管中进行 ,同时检测甲型肝炎和脊髓灰质炎病毒病毒RNA。实验中对不同的反转录温度以及一步多重PCR的特异性和灵敏度进行了探讨。结果表明 :42℃、5 0℃反转录时polio有非特异性条带出现 ,6 0℃反转录特异性较好 ,而HAV在三种不同的反转录温度下均得到特异性较好的条带 ;应用一步PCR同时检测两种病毒所得到的条带分别与检测单一病毒所得条带一致 ,半套式PCR也得到了预期的条带 ;应用一步PCR同时检测两种病毒与检测单一病毒的灵敏度基本一致 ,但在同等反应条件下后者的反应效率高于前者 ,特别是在检测HAV时。
- 辛忠涛李君文王新为宋农郑金来王中民靳连群
- 关键词:甲型肝炎病毒脊髓灰质炎病毒
- 胸腺素α原对老龄鼠血清中甲状腺激素、糖皮质激素及雌二醇水平的影响
- 2000年
- 采用放射免疫分析检测胸腺素α原对老龄鼠甲状腺激素、糖皮质激素和雌二醇血清水平的影响。结果表明 ,与对照组相比 ,胸腺素α原可明显提高老龄鼠T3 、T4 、E2 、ACTH的血清水平 ,降低TSH和GC的水平。总之 ,胸腺素α原可以通过某一未明的机制调节某些激素的血清水平。
- 郑金来刘佃辛李君文高兰兴张符光王新为宋农辛忠涛
- 关键词:胸腺素Α原老龄甲状腺激素糖皮质激素雌二醇
- 利用细菌鞭毛展示的随机肽库筛选HBV-PreS2蛋白表位被引量:3
- 2003年
- 目的建立、改进并完善从细菌表面展示随机肽库中进行抗原表位筛选及鉴定的方法。方法以1株抗HBV-PreS2的单克隆抗体3B9为靶标,对FliTrxTM随机肽库进行筛选;监测每轮与抗体特异性结合的细菌克隆富集情况;通过逐轮增加洗涤强度筛选高亲和力克隆;对筛选出的克隆进行序列测定和Westernblot鉴定。结果筛选过程中与抗体特异性结合的细菌克隆逐轮得到富集,对16个克隆进行序列测定,共获得10种序列,其中7个序列含典型的RXR(K)GXY保守序列,与病毒PreS蛋白135~140位氨基酸高度同源,Westernblot反应为阳性;另外3个序列均不含典型的RXR(K)GXY结构,Westernblot反应结果不一。结论细菌表面展示的随机肽库是一种简捷、快速的抗原表位筛选方法。
- 辛忠涛薛沿宁高亚萍茆灿泉柳川
- 关键词:随机肽库HBV抗原表位
- 丁胺卡那去除甲肝病毒培养细胞中支原体的效果观察
- 2000年
- 探索丁胺卡那去除HAV培养细胞中污染支原体的效果 ,发现常规剂量 (10 0U/ml)的丁胺卡那效果不显著 ,而采用突击处理 (30 0U/ml)与常规处理协同应用 ,取得显著效果 :细胞形态恢复正常 ,种植病毒后维持时间延长 ,且不影响细胞对病毒的敏感性。
- 辛忠涛李君文王新为宋农郑金来芮期义
- 关键词:丁胺卡那培养细胞甲型肝炎病毒
- 免疫磁性粒子的制备及性能初步观察被引量:8
- 2000年
- 目的 :将免疫磁性分离技术应用到水和食品致病微生物检验工作中 ,达到快速地从样品中分离致病微生物的目的 ,以提高检测速度。方法 :对磁性粒子首先进行高分子物质的包被 ,继而进行了三种磁性粒子对细菌的非特异性吸附现象和免疫磁性粒子对细菌特异性结合能力的观察。结果 :未经包被的磁性粒子对细菌有很强的非特异性吸附 ,免疫磁性粒子对相应细菌特异性结合能力较强 ,并基本不受杂菌对分离效果的影响。结论 :免疫磁性分离技术比常规分离方法节省很多时间 ,可快速从样品中分离出致病微生物。
- 王新为李君文晁福寰宋农郑金来辛忠涛
- 关键词:肠道致病菌食品
- 大肠杆菌O157:H7分子生物学检测方法的研究被引量:3
- 1999年
- 王新为李君文宋农郑金来辛忠涛晁福环
- 关键词:大肠杆菌O157:H7分子生物学检测