赵爽 作品数:27 被引量:82 H指数:6 供职机构: 云南中医学院中药学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 云南省自然科学基金 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 建筑科学 更多>>
蔬菜作物抗病毒基因工程研究进展 被引量:3 2006年 阐述了应用在蔬菜作物上的各种抗病毒基因工程方法的研究进展,包括病毒来源基因、植物的抗病基因、核糖体失活蛋白基因、RNA干扰技术等,并介绍了这几种方法的抗病机理及在蔬菜作物上的应用情况。 赵爽 陈国菊 雷建军 曹必好关键词:蔬菜作物 植物病毒 转基因 根癌农杆菌介导天花粉蛋白基因TCS转化茎瘤芥的研究 被引量:2 2010年 以茎瘤芥(Brassica junceavar.tumidaTsen et Lee)的子叶为外植体,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)的介导,将天花粉蛋白(Trichosanthin,TCS)基因导入到茎瘤芥中。对所获得的31株抗性植株进行PCR扩增,其中阳性植株为23株;Northern blot分析结果表明基因TCS在转基因植株中能够正常表达。转基因植株接种病毒试验结果表明,转基因TCS的植株对芜菁花叶病毒TuMV的侵染有一定的抑制作用。 赵爽 郝雪峰关键词:茎瘤芥 农杆菌介导 转基因植株 TUMV 抗性 芥菜遗传转化体系的建立 芥菜(Brassica Juncea Coss)是十字花科芸薹属一年生或二年生草本植物,起源于亚洲。在我国栽培历史悠久,分布广泛,是我国著名的特产蔬菜。芥菜不仅是重要的鲜食蔬菜,更是腌制蔬菜的重要原料,加工业遍及全国多数... 赵爽 雷建军 陈国菊 曹必好文献传递 滇重楼全长cDNA文库的构建及初步分析 被引量:4 2014年 目的:构建滇重楼全长cDNA文库,为进行滇重楼生长发育相关基因及次生代谢产物合成途径相关基因的研究奠定基础。方法:改良Trizol法提取滇重楼根茎总RNA,通过SMART(switching mechanism at 5'end of RNA transcript)构建全长cDNA文库,测定分析文库滴度、重组率及插入片段大小,对文库进行随机测序并通过Blastx分析后在GenBank中进行同源性检索和功能预测。结果:文库的库容为2.5×107cfu/mL,文库重组率98.5%,插入片段大小平均为1.5 kb。随机挑取192个单克隆测序,其中有149条ESTs(Expressed Sequence Tags),其中9条序列与生长发育有关,5条序列与滇重楼次生代谢产物的合成、运输与代谢有关。结论:利用SMART技术成功构建了滇重楼全长cDNA文库,该文库库容量大、重组率高且插入的cDNA片段较长,可以满足滇重楼功能基因的鉴定、筛选及表达调控研究。 赵爽 董栩 马腾关键词:滇重楼 全长CDNA文库 SMART ESTS 毛状根培养技术在中草药中的应用 被引量:6 2011年 阐述了发根农杆菌中R i质粒诱导毛状根形成的机制;分析了毛状根培养技术在中草药有效成分生产、转基因研究、种质保存和良种繁育等方面的应用;探讨了影响毛状根形成的因素;最后预测了毛状根培养技术在中草药中的应用前景。 赵爽 潘少丽关键词:毛状根 发根农杆菌 中草药 从中国商陆分离的PacPAP基因转化番茄对TMV的抗性研究 被引量:4 2008年 以中国商陆(Phytolacca acinosa)叶片为材料,经PCR从基因组扩增克隆缺失无毒型抗病毒蛋白基因。采用叶盘法转化番茄,对转基因植株T1代摩擦接种TMV,50 d后统计发病情况。结果表明:克隆得到缺失无毒型PAP基因PacPAP,大小为714 bp,与美洲商陆抗病毒蛋白基因的同源性为99.7%,GenBank登陆号为AY603353;得到PacPAP整合入番茄基因组中的阳性植株11株,检测的4个转基因番茄株系均达到抗病级别,对照为感病。 陈国菊 赵爽 雷建军 曹必好 曾国平关键词:番茄 滇重楼可溶性无机焦磷酸酶基因的克隆及原核表达研究 被引量:1 2017年 目的为了研究可溶性无机焦磷酸酶(soluble inorganic pyrophosphatase,s PPase)基因在滇重楼生长发育中的功能,对滇重楼的s PPase基因进行了克隆、序列分析和原核表达研究。方法根据滇重楼c DNA文库中筛选到的s PPase的EST序列,克隆了滇重楼可溶性无机焦磷酸酶基因Pps PPase的c DNA全长序列;运用生物信息学的方法对该序列进行相似性比较和同源性分析,预测编码蛋白,并对其进行各种理化性质分析;将Pps PPase插入到原核表达载体p EASY-E1上,并导入到大肠杆菌BL21(DE3)细胞中进行诱导表达。结果滇重楼中Pps PPase的开放阅读框ORF为621bp,编码206个氨基酸,与高粱中s PPase的氨基酸序列相似性最高为94%;Pps PPase编码的蛋白相对分子质量是23.4k Da,理论等电点p I为5.6,特异识别区域即位于98-104位之间即DNDPMDV。成功构建了原核表达载体p EASY-E1-Pps PPase,并导入到大肠杆菌BL21(DE3)细胞中,经SDS-PAGE分析表明Pps PPase在大肠杆菌中能够表达,当IPTG诱导2h时表达量较高。结论首次从滇重楼中克隆得到可溶性无机焦磷酸酶基因Pps PPase,为滇重楼生长发育分子机制的研究提供参考。 赵爽 董栩 许燕 李国栋关键词:滇重楼 基因克隆 原核表达 商陆抗病毒蛋白基因的研究进展 本文阐述了商陆抗病毒蛋白(PAP)基因的来源及作用机理;以及目前通过基因工程获得的转PAP基因的植物及所得的转基因植株所抗病毒的种类,并对商陆抗病毒蛋白基因在植物抗病毒育种上的应用前景进行了展望. 赵爽 陈国菊 曹必好 雷建军关键词:植物基因 抗病育种 抗病毒蛋白 文献传递 药用植物中细胞色素P450基因的研究进展 被引量:5 2016年 细胞色素P450(cytochrome P450)广泛存在于动物、植物、细菌、真菌等细胞内。是一类与内质网、线粒体、质体高尔基体等细胞器结合的以血红素为辅基的B族细胞色素超基因家族蛋白酶,该酶在植物体内担当着相当重要的功能,在植物体中催化着多种初级代谢反应和次级代谢反应,对黄酮类、香豆素、异黄酮类氰苷、生物碱、萜类等的合成以及降解外源化学药物毒性等方面有重要作用。本文通过介绍该基因在药用植物刺五加、北柴胡、蓖麻、茶树、黄花蒿等植物的克隆和表达以及表达量的测定实验技术,为从其他植物中克隆P450基因提供方法和依据,并对后续研究提供参考。 董栩 许燕 李月亭 赵爽关键词:药用植物 P450基因 克隆 实时荧光定量 药用植物中鲨烯环氧酶基因的研究进展 被引量:5 2016年 鲨烯环氧酶(SE)存在于内质网的微粒体中,在鲨烯转变为环氧化鲨烯的生物过程中作为生物催化剂起催化作用。而环氧化鲨烯是从鲨烯生成环阿屯醇、香树素、羊毛甾醇等的过程中重要的中间产物。SE的活性决定了环氧化鲨烯的生物合成的效率,继而,以环氧化鲨烯作为前体的各类甾体皂苷、三萜皂苷、甾醇等化合物的生物合成也随之受其影响,后续产物的产量取决于它的含量和活性。因此SE被认为是甾体皂苷生物合成途径中的一个非常重要的调控酶,已在多种植物中克隆出并进行了初步功能鉴定。该文概述几个重要药用植物的SE基因的克隆及原核表达,为从其他药用植物中克隆SE基因提供一定的参考依据及方法思路。 许燕 赵爽 邸亮关键词:基因克隆 原核表达