许志洋
- 作品数：22 被引量：49H指数：4
- 供职机构：南京医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省“青蓝工程”基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 非小细胞肺癌组织磷酸化蛋白p27和钙网蛋白的水平研究被引量：4
- 2013年
- 目的探讨非小细胞肺癌组织磷酸化蛋白p27和钙网蛋白(CRT)的水平及其临床意义。方法采用免疫印迹法(Western blot)检测72例非小细胞肺癌组织及对应癌旁正常组织的p27和CRT蛋白水平,分析其蛋白水平与临床病理特征的关系。结果非小细胞肺癌组织中p27水平低于癌旁正常组织,而CRT水平却高于癌旁正常组织(P<0.05),两种蛋白在不同TNM分期及淋巴结转移情况上的分布差异有统计学意义(P<0.05),且ⅢA(TNM分期)和有淋巴结转移的p27水平较低,而CRT水平较高,且总体上p27和CRT的蛋白水平呈负相关(r=-0.663,P<0.05)。结论非小细胞肺癌中p27水平较低,CRT水平较高,且与TNM分期及淋巴结转移有关。
- 王富强许志洋胡凡夏峥嵘王玲
- 关键词：非小细胞肺癌钙网蛋白
- 一种新DnaJA1的不同剪接在人睾丸和精子中的表达研究
- 应用成人睾丸cDNA芯片,将成人睾丸、胚胎睾丸及人精子探针与人睾丸cDNA芯片进行杂交筛选出杂交信号有差异的克隆。其中一个与睾丸发育/精子发生相关的基因我们将它命名为nDnaJA1。它是一种人.DnaJA1(又称HDJ2...
- 胡艳秋周作民黄晓燕徐珉陆丽许志洋李建民沙家豪
- 文献传递
- 成胶因子、水凝胶以及药物组合物
- 本发明涉及医药技术领域，具体涉及成胶因子、水凝胶以及药物组合物，该成胶因子，其具有序列：Nap‑Phe‑Phe‑Glu‑Tyr‑OH，具体结构如下：<Image file="DDA0001621514020000011....
- 王富强吴金道许志洋赵文娥王自彬陈希辰夏峥嵘胡凡杨柳王玉栎
- 实时荧光PCR检测17-AAG对人RPE细胞Akt等基因表达的调控被引量：3
- 2008年
- 目的:建立检测17-AAG对人RPE细胞不同处理条件下mRNA的SYBR Green实时PCR方法,观察17-AAG对人RPE细胞中Akt,Raf,Hsp90,Hsp70基因表达的调控。方法:体外培养人RPE细胞株。当加入处理因素17-AAG并作用不同浓度及时间梯度后,收集细胞,抽提RNA进行反转录。同时根据Akt,Raf,Hsp90,Hsp70的基因序列,设计Akt1,Raf1,Hsp90,Hsp70的引物,利用ABI 7300PCR仪和SYBR Green,建立实时荧光PCR反应条件,通过比较Ct进行基因表达的相对定量分析。结果:熔解曲线分析和琼脂糖凝胶电泳结果证明了PCR反应的特异性;相对定量结果显示,17-AAG可以下调Akt及Raf基因的表达,上调Hsp90及Hsp70基因表达。结论:应用SYBR Green实时荧光PCR可以特异、准确地分析RPE细胞相关增殖基因表达差异,为系统研究17-AAG治疗PVR的复杂调控机制创造有力条件。
- 许志洋姚家奇刘庆淮李建民
- 关键词：SYBR17-AAG增生性玻璃体视网膜病变热休克蛋白90
- 细胞质膜及其蛋白质复合物分离与定性方法研究
- 2013年
- 目的:探讨细胞质膜及其蛋白质复合物分离与定性的方法。方法:结合差速离心法、密度梯度离心法、双水相法分离得到细胞质膜,并利用透射电镜和Western blot等实验手段验证分离所得细胞质膜的纯度。结果:本文采用了蓝绿温和凝胶电泳法对细胞质膜上的蛋白质复合物进行一维分离,得到23种蛋白质复合物;接着对23种蛋白质复合物进行第二相垂直电泳分离,分离出135种蛋白质;最后鉴定78种是质膜相关蛋白,其余57种来源内膜系统。结论:多种提纯方法的联用可以有效提高蛋白分离率与分离纯度,高纯度的质膜对质膜蛋白质组的研究具有重要意义。
- 胡凡许志洋夏峥嵘王富强王玲
- 关键词：细胞质膜BN-PAGE蛋白质复合物
- 同源重组检测系统的构建及其在乳腺癌细胞中的应用
- 2013年
- 目的:构建能广泛使用的DNA双链损伤(DSB)修复能力的检测系统,以期为肿瘤细胞的检测等提供新的手段。方法:利用分子生物学手段对现有的pEGFP-N1质粒进行改造,从而构建能直观的反映出DNA损伤修复能力的质粒系统。该质粒系统利用脂质体将其转染不同分化程度的乳腺癌组织细胞,进而评估乳腺癌细胞的DSB修复能力和其分化程度的关系。结果:所构建的质粒系统可以很好地检测到细胞中同源重组(HR)修复情况,并且结果直观,易于统计,而系统本身的构建过程也较为简单,适于广泛使用。通过此系统发现在乳腺癌细胞中HR能力随其分化程度升高而下降。结论:该构建的同源重组检测系统有很好的实用性,而组织细胞的同源重组能力可以作为肿瘤分化程度的潜在判断标准。
- 王富强许志洋胡凡夏峥嵘王玲
- 关键词：同源重组PEGFP-N1OVERLAPPINGPCR
- 成胶因子的制备方法和水凝胶的制备方法以及应用
- 本发明公开了一种成胶因子的制备方法和水凝胶的制备方法以及应用，通过固相合成方法合成Nap‑Phe‑Phe‑Glu(OtBu)‑Tyr(tBu)‑OH肽段，再脱除酪氨酸侧链和谷氨酸侧链上的tBu保护基；其中，Nap为萘基，...
- 王富强许志洋吴金道赵文娥王自彬陈希辰夏峥嵘胡凡杨柳王玉栎
- 文献传递
- 体外17-AAG对人RPE细胞VEGF及其受体的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:体外观察17-AAG对人RPE细胞中VEGFA,VEGFB,VEGFR1,VEGFR2基因表达的调控。方法:体外培养人RPE细胞株加入17-AAG并作用不同浓度及时间梯度后,收集细胞,抽提RNA进行反转录。同时根据VEGFA,VEGFB,VEGFR1,VEGFR2的基因序列,设计相应的引物,进行RT-PCR,琼脂糖凝胶电泳用于分析引物的特异性,再利用ABI7300PCR仪和SYBRGreen,建立实时荧光PCR反应条件,通过比较Ct进行基因表达的相对定量分析。结果:17-AAG可以下调VEGFA,VEGFB和VEGFR1基因的表达,而VEGFR2只有再高浓度17-AAG作用时才下调。结论:17-AAG可抑制RPE细胞VEGF及其受体基因。
- 姚家奇刘庆淮刘肖艺许志洋李建民
- 关键词：实时荧光定量PCR17-AAG视网膜色素上皮细胞热休克蛋白90
- 类风湿关节炎寒湿痹阻证患者血清蛋白组学分析被引量：13
- 2013年
- 目的从蛋白质表达水平初步探讨类风湿关节炎中医寒湿痹阻证的本质内涵。方法选择24例2009年7月—2010年9月南京中医药大学附属医院风湿免疫科类风湿关节炎(RA)患者,按中医辨证分型分为寒湿痹阻证组和湿热痹阻证组,每组12例,另选择本院体检中心健康志愿者12名作为正常对照组。采用双向凝胶电泳技术分析各组蛋白图谱,分别比较寒湿痹阻证组和其他两组图谱,找出共同的寒湿痹阻证差异蛋白质点,应用基质辅助激光解吸飞行时间质谱进行鉴定。采用Mascot软件在SwissProt数据库中搜索肽质量指纹谱数据并确定蛋白质。结果寒湿痹阻证组与正常对照组差异蛋白质点共有81个;寒湿痹阻证组与湿热痹阻证组差异蛋白质点共有45个;有13个蛋白点是寒湿痹阻证组较其他两组蛋白表达量均高或均低的蛋白点;通过质谱鉴定和数据库检索获得9个差异蛋白质。这些差异蛋白大多与细胞增殖、细胞分化等细胞事件的抑制相关。结论 4.1蛋白、DLC-1蛋白等与细胞增殖和细胞分化相关蛋白具有潜在的作为类风湿关节炎寒湿痹阻证诊断、预后标志物或治疗靶点的意义,也为进一步研究寒湿痹阻证实质提供了依据。
- 孙志岭王玲王富强许志洋钱鑫
- 关键词：寒湿痹阻证类风湿关节炎双向凝胶电泳质谱分析
- Ⅱ型糖尿病大鼠神经视网膜组织中差异蛋白质分析
- 2010年
- 以高脂饮食联合小剂量链脲菌素(Streptozotocin,STZ)注射方法诱导大鼠II型糖尿病(T2DM)模型为研究对象,采用比较蛋白质组学技术鉴定和分析早期糖尿病神经视网膜差异表达蛋白。通过联用液氮内研磨、冰浴超声、高速离心提取全蛋白技术,提取每只大鼠神经视网膜全蛋白质总量约900μg。采用双向凝胶电泳(2-DE)分离技术,获得2500个以上可辩认的蛋白质斑点。通过蛋白质组学比对技术筛选出糖尿病状态下神经视网膜差异表达蛋白,用基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-MS/MS)和肽质量指纹图谱(PMF)鉴定出20个差异蛋白点。按照Gene Ontology(GO)分类体系,对差异蛋白归类分析,揭示其亚细胞定位和分子功能。应用Pathway Studio软件对差异表达蛋白的生物学意义进行分析,认为凋亡是早期糖尿病视网膜病变(Diabetic retinopathy,DR)重要的细胞事件;AnnexinΙ、CRYAB、mtHsp70蛋白是与病理过程相关的关键蛋白,对研究DR致病机制有重要意义。
- 王亚冬童明庆崔毓贵张民英郭雪江王玲许志洋王富强
- 关键词：比较蛋白质组学双向凝胶电泳糖尿病
