蔺淑梅 作品数:125 被引量:314 H指数:11 供职机构: 西安交通大学医学院第一附属医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 Scientific Research Foundation for the Returned Overseas Chinese Scholars, State Education Ministry 陕西省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 更多>>
慢性丙肝RIBA与RIA-2检测抗-HCV的价值 被引量:1 1997年 目的探讨重组免疫印迹试验(RIBA)在慢性HCV感染中的应用价值.方法1993年1月~1995年3月采用含HCV不同编码区三种重组抗原(C22,C33c,C1003)的RIBA,对85例慢性非甲非乙型肝炎(NANBH)患者血清进行检测并将其结果与第二代放免法(RIA2)检测抗HCV及逆转录多聚酶链反应(RTPCR)检测HCVRNA结果进行比较分析.结果慢性NANBH患者血清RIBA阳性(788%,67/85)结果与HCVRNA阳性(753%,64/85)结果之间有良好相关性和高的符合率;RIBA可检出RIA2阴性的HCV感染者;单项抗体阳性时仅见一定比例的单项抗C22或抗C33c阳性血清可检出HCVRNA,而单一抗C1003阳性者HCVRNA均阴性.结论RIBA可提高慢性HCV感染的诊断率,RIBA阳性为HCV感染及病毒血症存在的标志,可作为RIA2检测抗HCV的确证实验. 蔺淑梅 张树林关键词:丙型肝炎 放射免疫测定 RIBA 应用抑制性消减杂交技术克隆丙型肝炎病毒E2蛋白反式调节基因 2005年 目的应用抑制性消减杂交(SSH)技术构建丙型肝炎病毒(HCV)E2蛋白反式调节基因差异表达的cDNA消减文库,克隆HCVE2蛋白反式调节相关基因。方法以HCVE2表达质粒pcDNA3.1(-)_E2转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为对照,制备转染后的细胞裂解液,从中提取mRNA并逆转录为cDNA,经RsaI酶切后将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性聚合酶链反应(PCR)扩增,将产物与T/A载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增,随机挑选克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析。结果成功构建人HCVE2蛋白反式调节基因差异表达的cDNA消减文库。文库扩增后得到78个阳性克隆,进行菌落PCR分析,均得到100~1000bp插入片段。挑取38个含有插入片段的阳性克隆测序分析,获得35个已知基因序列和3个未知基因。通过生物信息学分析获得其全长序列,其功能正在研究中。结论应用SSH技术成功构建了HCVE2反式调节基因差异表达的cDNA消减文库。该文库的建立为进一步阐明HCVE2反式调节的靶基因及致慢性肝脏疾病发生的分子生物学机制提供理论依据。 白桂芹 成军 刘妍 杨倩 黄艳萍 蔺淑梅 杨瑗 张树林关键词:丙型肝炎病毒 E2蛋白 抑制性消减杂交 新基因 基因表达谱芯片筛选NS5ATP2剪切体NS5ATP2-512转染细胞差异表达基因 2005年 目的应用基因芯片技术检测丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白5A(NS5A)反式激活基因NS5ATP2剪切体512的表达对肝母细胞瘤细胞HepG2基因表达谱的影响,进一步阐明NS5ATP2剪切体512蛋白可能的分子生物学功能。方法设计并合成NS5ATP2基因序列特异性的引物,应用聚合酶链反应(PCR)技术扩增NS5ATP2蛋白编码基因片段,以常规的分子生物学技术将获得的NS5ATP2编码基因片段克隆到TA载体中进行核苷酸序列的测定,在此过程中发现其剪切体NS5ATP2512并构建真核表达载体pcDNA3.1(-)NS5ATP2512。以脂质体转染肝母细胞瘤细胞系HepG2,提取mRNA,逆转录为cDNA,与转染空白表达载体pcDNA3.1(-)的HepG2细胞进行cDNA芯片分析。结果构建的表达载体经过限制性内切酶分析和DNA序列测定,证实准确无误。提取高质量的mRNA,逆转录为cDNA,进行DNA芯片技术分析。在1152个基因表达谱的筛选中,发现有14个基因表达水平显著上调,15个基因表达水平显著下调。结论应用基因表达谱芯片技术成功筛选了NS5ATP2剪切体NS5ATP2512转染细胞后差异表达基因,为进一步阐明NS5ATP2512蛋白可能的生物学功能提供依据。 白桂芹 张树林 成军 杨倩 蔺淑梅 刘妍 黄燕萍关键词:丙型肝炎病毒 剪切体 慢性HCV感染者IFN治疗前后血清HCVRNA水平 被引量:3 1997年 目的评价IFN对丙肝患者病毒血症水平的作用.方法竞争性逆转录聚合酶链反应(CRTPCR)法定量检测12例慢性HCV感染者(男8例,女4例,HCVRNA阳性,ALT异常持续6个月以上)IFN治疗(IFNa2b3MU,肌注,3次/周,疗程3个月)前后(随访6个月)血清HCVRNA水平.结果慢性HCV感染者12例,3例呈完全反应,6例呈部分反应,另外3例无反应.9例有反应者中4例复发,有反应者治疗结束时血清HCVRNA水平明显下降(517±0408vs206±155,10copies/50μlserum,x±s,P<005),无反应者血清HCVRNA水平未见明显下降(567±058vs45±087,x±s,P>005).3例完全反应者仅1例血清HCVRNA持续阴性,3例无反应者2例血清HCVRNA水平略有下降.结论IFN治疗丙肝有效,但IFN不能有效清除病毒,仅抑制病毒复制,未见治疗前血清HCVRNA水平与复发与否有关. 梁雪松 张树林 狄鹏超 蔺淑梅关键词:丙型肝炎病毒 干扰素 应用抑制性消减杂交技术克隆乙型肝炎病毒全S蛋白反式激活基因 2005年 目的应用抑制性消减杂交(SSH)技术构建乙型肝炎病毒(HBV)全S蛋白反式激活基因差异表达的cDNA消减文库,克隆HBV全S蛋白反式激活相关基因。方法以HBV全S表达质粒pcDNA3.1(-)全S转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为对照;制备转染后的细胞裂解液,从中提取mRNA并逆转录为cDNA,经RsaI酶切后将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR,将产物与T/A载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增,随机挑选克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析。结果成功构建人HBV全S蛋白反式激活基因差异表达的cDNA消减文库。文库扩增后得到86个白色克隆,进行菌落PCR分析,均得到100-1000bp插入片段。挑取35个含有插入片段的阳性克隆测序分析,获得33个已知基因序列,和2个未知基因,通过生物信息学分析获得其全长序列,其中之一命名为全S蛋白反式激活基因1(CSTP1),已在GenBank中注册,注册号AY553877。未知基因的功能还正在研究中。结论应用SSH技术成功构建了HBV全S反式激活基因差异表达的cDNA消减文库。该文库的建立为进一步阐明HBV全S反式调节的靶基因及致肝病发生的分子生物学机制提供理论依据。 白桂芹 成军 张树林 刘妍 黄燕萍 蔺淑梅 刘蔚 张黎颖 杨瑗关键词:反式激活 抑制性消减杂交 克隆 基因表达谱芯片技术筛选乙型肝炎病毒核心蛋白结合蛋白基因C1反式调节基因 2007年 目的对未知功能基因C1转染人肝母细胞瘤细胞系(HepG2)后的基因表达谱进行分析,探索该基因的表达对肝细胞基因表达谱的影响及其可能的调节功能线索。方法以分子生物学技术构建C1的真核表达载体pcDNA3.1(-)-C1,以表达质粒pcDNA3.1(-)-C1转染HepG2细胞,空载体pcDNA3.1(-)为平行对照,制备转染后的细胞裂解液,提取mRNA,逆转录为cDNA。应用基因表达谱芯片技术对差异表达的mRNA进行检测和分析。结果HepG2细胞经转染C1表达质粒后,有26条差异表达基因,其中24条基因表达水平下调,2条基因表达水平上调。这些差异表达的基因与细胞信号转导、凋亡、细胞增生分化及肿瘤的发生密切相关。结论应用基因表达谱芯片成功筛选了C1转染细胞后差异表达基因,为进一步阐明C1蛋白可能的生物学功能及乙型肝炎病毒核心蛋白的致病机制提供了理论依据。 蔺淑梅 成军 杨媛 刘敏 张黎颖 郭江关键词:乙型肝炎病毒 核心蛋白 反式激活基因 基因表达谱芯片 酶切联合巢式PCR法检测外周血单个核细胞中的HBV DNA与HBVcccDNA 被引量:1 2008年 目的:检测慢性HBV感染者外周血单个核细胞(PBMCs)中HBV的存在状态.方法:采用巢式PCR法检测慢性HBV感染者PBMCs中的HBV DNA;用Hirt法、绿豆核酸酶、设计跨越单链区和三链区巢式PCR引物,以尽可能去除rcDNA的影响,检测共价闭合环状DNA(cccDNA).结果:采用酶切联合巢式PCR法在慢性HBV感染者PBMCs中可扩增出cccDNA,同时未扩增出rcDNA;120例慢性HBV感染者PB-MCs中HBV DNA,cccDNA阳性检出率分别为62.5%,45.8%,HBV DNA阳性检出率明显高于cccDNA(P<0.01);其中HBeAg阳性组PBMCs中HBV DNA检出率(80.0%)和cccDNA阳性率(45.0%)均明显高于HBeAg阴性组(61.7%,30.0%,P<0.01).结论:酶切联合巢式PCR法检测cccDNA可有效避免rcDNA对cccDNA扩增的干扰;结果表明乙肝病毒不仅可感染PBMCs,并可在其中复制;HBeAg阳性者PB-MCs中HBV DNA及cccDNA检出率高. 蔺淑梅 张英 陈瑞琳 张曦 陈天艳 叶峰 赵英仁 张树林关键词:外周血单个核细胞 共价闭合环状DNA 由新冠肺炎疫情引发的对传染病教学的思考 被引量:10 2020年 新冠肺炎疫情是新中国成立以来,传播速度最快、感染范围最广、防控难度最大的重大突发公共卫生事件。如何提高医务人员应对突发传染病的能力是值得深入思考的问题。传染病教学是医学生教育的重要内容,现阶段传染病教学中存在对突发新发传染病无独立章节,讲授内容简单,临床实习中对有关传染病隔离及分级防护相关内容缺如等不足,就理论教学中增加新发突发传染病相关知识,提高医学生传染病疫情意识及加强规培医生传染病防控专项培训等方面提出建议,以期增强医学生的传染病疫情防控意识及提高应对新发突发传染病的能力。 陈云茹 刘小静 李建州 石磊 张曦 叶峰 蔺淑梅关键词:疫情 传染病 套扎序贯聚桂醇硬化剂用于肝硬化食管静脉曲张破裂出血的价值 被引量:7 2019年 目的研究套扎序贯聚桂醇硬化剂模式用于肝硬化食管静脉曲张破裂出血(EVB)的效果。方法回顾性分析2015年10月至2017年10月两院90例肝硬化EVB患者临床资料,根据治疗方法不同分为A组(单纯套扎术,22例)、B组(套扎术+鱼肝油酸钠硬化序贯治疗,34例)及C组(套扎术+聚桂醇硬化序贯治疗,34例)。比较三组治疗效果,记录套扎情况和硬化剂使用量,比较治疗期间不良反应发生情况,随访1年,记录再出血发生情况。结果 B、C组总有效率均高于A组,差异有统计学意义(P <0. 05),B、C两组总有效率比较,差异无统计学意义(P> 0. 05)。C组平均套扎次数和平均套扎环个数均显著少于A组,套扎环个数显著少于B组,差异均有统计学意义(P <0. 05),C组硬化剂用量显著少于B组,差异有统计学意义(P <0. 05)。三组治疗期间不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P> 0. 05)。C组1年再出血率显著低于A、B两组,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论套扎序贯硬化剂模式治疗肝硬化EVB疗效显著,聚桂醇较鱼肝油酸钠用于肝硬化EVB序贯硬化剂治疗效果更好。 石磊 孙晓勤 杨芳 蔺淑梅关键词:硬化剂 肝硬化 食管静脉曲张 乙型肝炎病毒核心抗体水平与慢性乙型肝炎患者肝脏炎症、纤维化程度及抗病毒疗效关系的Meta分析 2024年 目的系统评估乙型肝炎病毒核心抗体(hepatitis B virus core antibody,HBcAb)水平与慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者肝脏炎症及纤维化程度的相关性,以及HBcAb能否作为CHB患者抗病毒疗效的预测指标。方法检索PubMed、Embase、Web of Science、The Cochrane Library、中国知网、万方、维普数据库建库至2022年10月发表的有关HBcAb的文献。使用R4.2.1软件进行Meta分析,横断面研究文献质量评价参照美国卫生保健质量和研究机构(the Agency for Healthcare Research and Quality,AHRQ)提出的文献质量评价标准,队列研究质量评价参照纽卡斯尔-渥太华量表(Newcastle-Ottawa Scale,NOS)。采用剔除异质性最大或权重最大的文献进行敏感性分析。采用漏斗图和Egger检验进行发表偏倚评估。结果纳入30篇文献进行系统评价,其中21篇文献纳入Meta分析。结果表明HBcAb水平越高,CHB患者肝脏炎症程度(Summary r=0.39,95%CI:0.30~0.48,P<0.05)和肝脏纤维化程度(Summary r=0.33,95%CI:0.22~0.43,P<0.05)均越高。ALT基本正常的CHB患者中HBcAb较低的患者发生肝脏炎症(G2~G4)的风险较高(OR=2.02,95%CI:0.64~6.38,P<0.05)。干扰素(interferon,IFN)治疗的CHB患者基线HBcAb水平越高,HBsAg阴转率越高(MD=0.34,95%CI:-0.12~0.80,P<0.05)。核苷(酸)类似物[nucleos(t)ide analogues,NAs]和IFN治疗的CHB患者基线HBcAb水平越高,HBeAg血清学转换率(MD=0.37,95%CI:0.26~0.49,P<0.05)和HBV DNA病毒学应答率(MD=0.30,95%CI:0.16~0.44,P<0.05)均越高。IFN治疗的CHB患者停药时HBcAb水平越高,临床治愈后复发率越低(MD=-0.74,95%CI:-1.00~-0.48,P<0.05)。结论HBcAb水平越高,CHB患者肝脏炎症程度及纤维化程度越高。较高的HBcAb水平可作为预测NAs或IFN抗病毒疗效的指标之一。 张梦迪 万美蠲 王雯 石榴 张千 刘小静 李建州 陈云茹 叶峰 蔺淑梅 张曦关键词:乙型肝炎病毒核心抗体 肝脏炎症 抗病毒疗效 META分析