董荔红
- 作品数：27 被引量：30H指数：3
- 供职机构：福州总医院更多>>
- 发文基金：南京军区医药卫生科研基金福建省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学机械工程环境科学与工程更多>>
- MEKK3在TNF-α刺激后的恶性肿瘤细胞所产生的IL-6中的作用
- 目的：探讨有丝分裂原激活的蛋白激酶(MEKK3)在TNF-α刺激后的肺癌A549和乳腺癌MDAMB-231细胞所产生的IL-6中的作用.
方法：应用EUSA测定IL-6的产生,Western blot测定MEK...
- 沈瑞明兰风华钱风英董荔红王志红林炎鸿黄俏佳
- 关键词：TNF-Α恶性肿瘤细胞IL-6
- MEKK2基因siRNA重组腺病毒表达载体的构建及其对MEKK2的表达抑制被引量：1
- 2012年
- 设计并合成针对人MEKK2基因3个不同部位siRNA靶点的模板DNA序列,将合成的互补片段退火后克隆入pRNAT-H1.1/Adeno穿梭载体中,并使其在大肠杆菌BJ5183中与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1进行同源重组。将经鉴定正确的重组腺病毒质粒转染293A细胞,包装得到具有感染能力的pAd-MEKK2-siRNA重组腺病毒。病毒体外转导人胃腺癌AGS细胞,Western blot印迹法检测其对MEKK2表达的抑制。经酶切和测序鉴定均证实pAd-MEKK2-siRNA重组腺病毒载体构建成功,其插入序列正确无误。Western blot印迹检测结果显示,重组腺病毒表达载体可抑制MEKK2基因的表达,以pAd-MEKK2-siRNA2(针对MEKK2 cDNA 992-1 010的片段)抑制效果为最佳,pAd-MEKK2-siRNA1(针对MEKK2 cDNA 1 456-1 474的片段)和pAd-MEKK2-siRNA3(针对MEKK2 cDNA 1 351-1 369的片段)则未见明显的抑制效果。DNA Ladder和细胞存活测定结果表明,敲减MEKK2的表达后,AGS细胞接受H2O2刺激后的凋亡受到较强抑制、细胞存活数增加,明显高于野生型细胞和转导siRNA阴性对照腺病毒细胞接受H2O2刺激后的,差异具有统计学意义(P<0.05),而后两者之间差异无统计学意义(P>0.05)。该研究成功地构建了针对MEKK2基因的siRNA重组腺病毒载体,为进一步深入研究MEKK2基因在人胃腺癌细胞中的作用和功能奠定了基础。
- 钱凤英兰风华董荔红黄俏佳
- 关键词：腺病毒载体RNA干扰H2O2细胞凋亡
- siRNA表达载体稳定沉默肺癌A549细胞MEKK3基因的细胞株建立被引量：1
- 2010年
- 目的构建人MEKK3基因的小干扰RNA（siRNA）表达载体并建立稳定沉默MEKK3基因表达的肺癌A549细胞克隆株。方法设计并合成针对人MEKK3基因4个不同部位siRNA靶点的模板DNA序列，以BamHI及Hindm酶切位点分别克隆入pSilencer4．1-CMVhygro载体，测序鉴定后以脂质体分别转染入A549细胞，Western印迹检测它们对MEKK3表达的抑制，并选择抑制效率最高的表达载体转染入A549细胞，潮霉素筛选后获得含该载体的抗性细胞克隆株，荧光实时定量PCR检测该细胞克隆株中MEKK3表达抑制。结果测序鉴定表明4个MEKK3siRNA表达载体正确无误；Western印迹结果显示对MEKK3的表达有抑制作用，其中pSilencer4．1-MEKK3siRNA2的抑制率达84％；荧光实时定量PCR结果表明，pSilencer4．1-MEKK3siRNA2可稳定沉默MEKK3mRNA的表达，有效率达83％。结论成功地构建了针对人MEKK3基因的siRNA表达载体，并成功地建立了能高效且稳定地沉默MEKK3基因表达的肺癌A549细胞克隆株。
- 沈瑞明兰风华钱凤英董荔红黄俏佳
- 关键词：肺癌A549细胞株基因表达荧光实时定量PCR
- 基于载体的RNA干扰介导人核受体hLRH-1表达稳定抑制肝癌细胞BEL-7402的基因表达谱分析(英文)
- 2006年
- 为建立一hLRH-1表达稳定抑制的细胞系,我们构建了hLRH-1基因靶向的稳定RNA干涉载体(pSineohLRH-1)并导入肝细胞癌细胞BEL-7402。通过半定量RT-PCR分析发现,携有pSineohLRH-1的BEL-7402细胞其hLRH-1基因mRNA的表达抑制率达60％。此外,微阵列法基因表达谱分析结果表明,与未干涉的对照细胞相比,包括一些肿瘤相关的基因如Gadd45β和PTEN在内的405个基因在hLRH-1基因表达稳定下调的BEL-7402细胞中呈明显的表达差异,意示hLRH-1具比已知更为广泛的生物学功能。尽管hLRH-1与这些差异表达基因的确切关系尚有待进一步的实验探究,我们的发现仍为hLRH-1在肿瘤发生发展中可能的作用机制的揭示提供了新的线索。
- 王水良兰风华庄岳鹏李慧忠黄梁浒郑德柱曾健董荔红朱忠勇傅继梁
- 关键词：基因表达谱RNA干扰
- 脆性X智力障碍1基因新型可变剪接外显子和剪接异构体的发现
- 目的：对脆性X智力障碍1基因( FMRI)的剪接异构体进行鉴定,并探讨不同个体间、不同组织间FMR1基因可变剪接的差异.
方法：提取外周血总RNA,用长链RT-PCR扩增FMR1基因全长编码序列,胶回收试剂盒纯...
- 沈瑞明兰风华钱风英董荔红王志红林炎鸿黄俏佳
- 关键词：剪接异构体
- 染色体部分三体两家系
- 2009年
- 王志红涂向东曾健丛学文董荔红
- 关键词：部分三体家系染色体G显带先天性心脏近亲婚配引产后
- C57 BL/6小鼠Ldhc截短突变诱导的显性负性效应研究
- <正>目的:本课题组在临床中发现一例存在LDHC基因截短性杂合突变的特发性不育患者,患者精子乳酸脱氢酶C4(LDH-C4)活性几乎完全丧失,其病理表型严重程度超出我们所预期的单倍体不足性状。故利用基因突变小鼠模型探索截短...
- 白晔张慧钟福春董荔红陈良远郑双林兰风华
- 文献传递
- 改良孕中、晚期羊水细胞培养制备染色体方法的探讨被引量：8
- 2008年
- 目的改良孕中晚期羊水细胞培养制备染色体技术。方法收集45例孕24-32w具有产前诊断指征的的孕妇羊水,根据羊水细胞生长特点,在培养过程中调整换液时间及培养方式收获细胞。结果45例孕中晚期羊水细胞培养全部成功。结论该方法细胞岛多,染色体有效分裂相多,培养成功率高,可满足临床产前诊断的要求。
- 涂向东张宝珍王志红王鸿耿丹明董荔红
- 关键词：羊水产前诊断
- 一起死亡事故中难辨尸体的个体基因识别被引量：3
- 2006年
- 目的对某地一起死亡事故中难辨认尸体进行个体基因识别。方法从遇难者尸体取深部肌肉和软骨组织少许。对部分组织进行常规病理检查。从尸体组织提取基因组DNA,采用荧光多重PCR技术,扩增尸体基因组DNA的16个短串联重复序列(STR)基因座。将遇难者STR基因型与父母的STR基因型进行比对,确定遇难者的家庭归属。结果常规病理检查示部分肌肉组织结构完全破坏,但软骨组织结构尚完整。肌肉组织基因组DNA的凝胶电泳呈3种类型:基本无降解、部分降解、完全降解。只有部分肌肉组织DNA可用于确定STR基因型,所有软骨的DNA样本均可用于STR-PCR。结论以STR基因型分析为基础的亲子鉴定技术是确定事故遇难者身份的有效方法。对腐烂尸体的STR分析而言,尸体软骨组织是首选。
- 兰风华郑德柱黄梁浒柯龙凤涂向东程烽王志红王水良张朵庄岳鹏董荔红
- 关键词：DNA指纹法DNA聚合酶链反应
- 丝氨酸526位点在MEKK3介导的IL-1信号途径中的作用被引量：3
- 2007年
- 目的:确定MEKK3分子中介导IL-1信号途径的关键性氨基酸.方法:对哺乳动物MEKK3活性环526位点的丝氨酸进行人工诱变后,用瞬时转染的方法分别将526A基因单独及与TRAF6基因同时导入GES-1细胞中;用免疫印迹、NF-κB荧光素酶报告基因测定及免疫沉淀实验检测了526A突变体的表达水平、对IL-1及TRAF6介导的NF-κB基因的表达及MEKK3与TRAF6相互作用的影响.结果:通过与野生型MEKK3的对比,观察到526A不但阻断了IL-1及TRAF6介导的依赖于MEKK3的NF-κB基因的激活,同时阻断了TRAF6与MEKK3的相互作用.结论:526位点的丝氨酸在MEKK3介导的IL-1信号途径中起关键性的作用,是不可缺少的关键性氨基酸.
- 黄俏佳兰风华朱忠勇董荔红
- 关键词：TRAF6NF-KB白细胞介素-1
