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GL-7ACA酰化酶表达检测系统的建立被引量：1: 2001年; 戊二酰 7 氨基头孢烷酸 (GL 7ACA)酰化酶能够催化GL 7ACA分解生成 7 ACA ,后者是工业半合成生产头孢类抗菌素所需的重要前体。为了准确地检测GL 7ACA酰化酶及其突变体的表达 ,本研究通过构建一系列质粒载体 ,建立了两个简便有效地测定GL 7ACA酰化酶基因acy表达量的系统 ,从而可对酶的比活力进行定量。我们将两个报告基因 ,即儿茶酚双加氧酶基因 (xylE)和 β 半乳糖苷酶基因 (lacZ)分别置于acy基因的下游 ,使之与acy基因共用一个启动子 ,进行串联表达 ,各自构成一个多顺反子系统。实验证明 ,基因融合后的儿茶酚双加氧酶或 β 半乳糖苷酶的活力可以间接反映acy的表达量。; 李祥张伟茅翔蔡煊杨蕴刘赵国屏姜卫红; 关键词：头孢菌素类抗生素

含有戊二酰－7－氨基头孢烷酸酰化酶基因的工程菌: 本发明测定了来源于Pseudomonas sp.130菌株的GL—7ACA酰化酶基因全序列及其所编码的酶蛋白,并提供含有该基因的重组质粒pMR24及构建E.cOli MMR204基因工程宿主菌,克服了原有宿主菌的β－内酰...; 杨蕴刘张菁李勇赵国屏茅翔何宇炯王恩多姜卫红焦瑞身; 文献传递

用计算机模型研究葡激酶与人微小纤溶酶原的相互作用被引量：4: 1999年; 利用计算机同源模建预测人微小纤溶酶原的三维结构，与葡激酶Ｘ射线晶体结构进行了分子对接，研究了葡激酶与微小溶酶原的结合区，并设计了分子量小、低抗原性的新型葡激酶分子。; 宋钢宋后燕茅翔; 关键词：葡激酶分子设计计算机模型

头状链轮丝菌染色体复制起始区的克隆和对变铅青链霉菌的转化被引量：1: 2002年; 头状链轮丝菌 (Streptoverticillumcaespitosus)ATCC2 742 2是抗肿瘤药物———丝裂霉素A的产生菌 ,根据高GC含量革兰氏阳性菌染色体复制起始区两端基因序列的保守性 ,采用PCR方法从该菌中克隆了一段包含染色体复制起始区 (oriC)的 1 3kb片段。序列分析发现 ,克隆片段与天蓝色链霉菌的oriC及邻近区域的同源性达 80 %以上 ;头状链轮丝菌oriC中含有 2 2个DnaA box ,保守序列为TTGTCCACA。以克隆片段构建的质粒可以跨属转化变铅青链霉菌 (S .lividans)ZX7,原生质体转化效率为 3 2× 10 2 个 μgDNA ;质粒在S .lividansZX7中能以低拷贝形式稳定存在 ;转化子的菌落和菌丝形态均正常。头状链轮丝菌oriC序列与几种链霉菌的oriC有较高的同源性 ,以及在变铅青链霉菌中仍具有复制起始活性等说明链轮丝菌属与链霉菌属在系统发生上关系较近 ;但采用最大似然法分析oriC序列构建的头状链轮丝菌与几种链霉菌的系统进化树表明 ,头状链轮丝菌与几种链霉菌之间的分化距离远大于链霉菌之间的分化距离。; 马伟茅翔卢捷姜卫红焦瑞身覃重军赵国屏; 关键词：染色体复制起始区克隆变铅青链霉菌

小鼠抗青霉素和头孢菌素酰化酶抗体制备及交叉反应研究: 2003年; 为探讨用不同方法制备的抗原对抗体效价的影响以及抗体之间的交叉反应 ,采用 3种不同方法制备的抗原分别免疫 BAL B/ c小鼠 ,制备出抗青霉素酰化酶 α亚基、β亚基和抗头孢菌素酰化酶α亚基、β亚基 4种抗体 ,测定了它们的效价 ;同时还比较了用同一种方法制备的抗原免疫小鼠后制作这两类抗体的效价以及上述 4种抗体之间对应抗原的交叉反应。结果表明 ,用割胶法制备的抗原免疫小鼠后所得抗体效价较高 ;同样用割胶法制备的抗原免疫小鼠后所得的两类抗体效价无显著差异 ;在交叉反应测试中 ,抗头孢菌素酰化酶抗体也能识别青霉素酰化酶 ,但抗青霉素酰化酶抗体却几乎不能识别头孢菌素酰化酶 ,即抗头孢菌素酰化酶抗体更为活跃 ,而抗青霉素酰化酶抗体则更为专一。同类抗体对应抗原 2个亚基之间的交叉反应说明其互相结合部位结构的类似。; 成志恒戴明华茅翔金玫蕾; 关键词：青霉素头孢菌素酰化酶抗体抗原

假单胞菌sp.130 GL-7-ACA酰化酶的核苷酸和蛋白质序列分析被引量：1: 2002年; 对来源于假单胞菌sp .130的戊二酰 7 氨基头孢烷酸 (GL 7 ACA)酰化酶结构基因的全序列及所编码蛋白质的α,β亚基的N末端和C末端的氨基酸序列进行了测定。将蛋白质序列与其他同类的GL 7 ACA酰化酶进行了同源性比较 ,结果显示该酶与来源于假单孢菌GK16和C42 7的酰化酶的序列有较高同源性 ,而与其它同类酰化酶的同源性较低。这些酶的α亚基N 末端差别较大 ,但是 β 亚基的N; 茅翔张菁李勇何宇炯王恩多杨蕴刘焦瑞身姜卫红赵国屏; 关键词：GL-7-ACA酰化酶核苷酸蛋白质序列分析

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茅翔