苏连泰
- 作品数：14 被引量：40H指数：4
- 供职机构：吉林大学植物科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学更多>>
- 两个大豆MYB转录因子在原核细胞中的高效表达被引量：1
- 2011年
- 大豆(Glycine max)GmMYB12a与GmMYB12B2基因属于典型的植物R2R3-MYB转录因子。为进一步研究两个MYB12转录因子与相应顺式作用元件的相互作用,构建了两基因的原核表达载体,并在大肠杆菌Rosetta(DE3)中实现高效表达。利用PCR技术,将两端带有特异酶切位点的GmMYB12a与GmMYB12B2全长基因亚克隆于原核表达载体pET-28a(+),酶切、测序鉴定确认获得两基因的重组原核表达载体pET-28a-GmMYB12a与pET-28a-GmMYB12B2。然后把重组载体转化到大肠杆菌Rosetta(DE3)中,经IPTG诱导蛋白表达,提取细胞蛋白并采用SDS-PAGE检测目的蛋白的表达情况。结果表明,成功构建了两基因的原核表达载体,在IPTG浓度为1.2 mmol/L,诱导6 h后,目的蛋白能在Rosetta(DE3)中高效表达。
- 李晓薇苏连泰赵旭翟莹张海军张庆林李景文王庆钰
- 关键词：大豆MYB转录因子原核表达
- 大豆品种吉林35胚尖再生体系的建立及对农杆菌的敏感性被引量：3
- 2012年
- 为建立一个简便、高效、稳定的大豆胚尖再生体系,以吉林35为材料,胚尖为外植体,研究氯气、升汞、酒精3种消毒方法对不定芽出芽率的影响和6-BA对不定芽再生率的影响。同时,为检测吉林35的农杆菌易感性,对平安8、东农42、吉林47和吉林35四个大豆品种进行gus基因组织化学染色。研究表明,酒精消毒法对种子伤害较小,可以保证较高的出芽率。6-BA对不定芽再生作用显著,单独使用或配合IBA使用均可获得较高的再生率。gus基因组织化学染色结果表明吉林35的农杆菌易感性强,明显优于其它品种。吉林35胚尖外植体再生率较高且对农杆菌较敏感,是遗传转化良好的受体材料。
- 闫帆孙昕翟莹雷婷张庆林苏连泰王英李景文王庆钰
- 关键词：大豆出芽率再生率易感性
- 大豆逆境诱导基因GmPRP的克隆与表达被引量：6
- 2011年
- 通过对大豆吉林32未成熟胚表达谱的分析,利用RT-PCR技术从大豆中克隆了一个新的脯氨酸富集蛋白基因,命名为GmPRP。GmPRP的开放阅读框长396bp,其分子量13.79kD,具有131个氨基酸残基,等电点8.96,其DNA序列无内含子。GmPRP蛋白序列N端含有一段信号肽,中间为脯氨酸富集区,C端为半胱氨酸富集区。该蛋白与四季豆和木豆的PRP同源性最高,具有较近的亲缘关系。GmPRP的683bp启动子序列含有10种与逆境相关的顺式作用元件,分别为ABRE-like、G-box、W-box、GT-1、MYB、MYC、BIHD10s、DPBF、SEBF和WRKY。实时荧光定量PCR分析表明,该基因表达量在大豆的根和叶中最高,在茎和胚中其次,在花中最低,且受干旱、高盐、低温、机械伤害及SA(水杨酸)、ETH(乙烯)、ABA(脱落酸)、MeJA(茉莉酸甲酯)的诱导上调表达。
- 翟莹雷婷婷闫帆黄开猛李晓薇张庆林张海军苏连泰孙昕王英李景文王庆钰
- 关键词：大豆逆境胁迫启动子
- 大豆MYB转录因子GmMYBJ1和GmMYBJ2的克隆与功能分析
- 大豆是重要的粮食和经济作物。然而随着全球气候变化的影响,大豆的生长和发育越来越多的受到各种不良因子的影响,如:干旱、低温和土壤盐渍化及病害等,这给大豆的生产造成了巨大损失。已有研究表明,MYB转录因子参与了植物应对生物及...
- 王庆钰苏连泰郭文云王英李景文杨旭光刘雅婧
- 关键词：大豆MYB转录因子功能分析转基因拟南芥抗旱性
- 文献传递
- 大豆胚发育期酵母双杂文库的构建及与bHLH转录因子互作蛋白的筛选被引量：1
- 2015年
- 构建了大豆幼胚生长期20～50dDSN（duplex-specific nulease）均一化cDNA酵母双杂文库，总克隆数为2．8×10^7cfu。为了筛选能与已知大豆bHLH转录因子GmbHLH3a相互结合的蛋白质，以转录因子GmbHLH3a为诱饵蛋白构建诱饵载体，GmbHLH3a诱饵载体无自激活活性，通过酵母双杂筛选到了两个能与诱饵蛋白相互作用的蛋白及其序列。
- 刘德泉郭文云何则铭苏连泰李景文王英张海军王庆钰
- 关键词：大豆转录因子CDNA文库
- 不同基因型大豆愈伤组织对农杆菌EHA105的敏感性研究被引量：1
- 2011年
- 研究了8个基因型的大豆愈伤组织GUS瞬时表达的效果及其最佳染色条件,以考察不同基因型大豆愈伤组织对农杆菌菌株EHA105的敏感性。GUS染色结果表明：不同品种对农杆菌EHA105敏感程度差别较大,吉林47和东农42愈伤GUS染色效果较好;不同品种要求的最佳染色时间存在差异,对农杆菌EHA105较敏感的2个基因型吉林47和东农42,较适宜的GUS染色时间为9~10 h。
- 张庆林赵艳张艳翟莹苏连泰王英李景文王庆钰
- 关键词：大豆愈伤组织基因型GUS染色农杆菌
- 一种大豆逆境相关转录因子ERF及其编码基因与应用
- 本发明涉及一种大豆逆境相关转录因子ERF及其编码基因与应用，属于植物基因工程领域，大豆逆境相关转录因子ERF的其氨基酸序列为SequenceN0.2，其编码基因的核苷酸序列为SequenceN0.1。本发明克隆了一个逆境...
- 王庆钰翟莹李景文王英闫帆雷婷婷苏连泰李艳杰张鑫生王洪预
- 文献传递
- 大豆种子特异型启动子SACPD-Cp的克隆和功能分析
- 大豆是重要的粮食作物和经济作物,其籽粒中含有大量不饱和脂肪酸、维生素、微量元素及蛋白质。植物基因工程中,以大豆种子作为生物反应器,产生具有工业用途及药用价值的新品种大豆具有重要的意义。实现外源基因在植物中表达调控,首先要...
- 张庆林苏连泰王英李景文王庆钰
- 文献传递
- 大豆球蛋白G1启动子的克隆及表达活性分析被引量：1
- 2011年
- 利用PCR的方法从大豆品种"吉豆2号"基因组DNA中克隆得到大豆球蛋白启动子G1p,长度约为686 bp,PLACE在线启动子预测工具分析表明:序列中含有多种典型的种子特异性表达元件。将克隆得到的G1p取代pCAMBIA1301中的CaMV35S启动子,构建于G1p与GUS基因融合表达的载体pCAM-G1p,通过农杆菌介导的方法在大豆根、茎、叶和种子中进行瞬时表达分析结果显示,仅能在种子中检测到GUS活性,而在根、茎和叶其他组织中基本检测不到GUS活性。说明G1基因上游686 bp片段具有种子特异性启动子的功能,G1p是一个比较高效的种子特异性启动子。
- 张庆林赵艳翟莹李晓薇张艳苏连泰王英李景文王庆钰
- 关键词：大豆启动子
- 高效液相色谱法(HPLC)测定大豆异黄酮含量的研究被引量：20
- 2011年
- 建立检测大豆异黄酮5种组分（染料木素、染料木苷、大豆苷元、大豆苷和黄豆黄苷）含量的高效液相色谱法,并且测定了大豆各组织和不同时期胚的异黄酮含量。色谱条件：Phenomenex C18色谱柱（150 mm×4.6 mm,5.0μm）;流动相：甲醇-水（30∶70,v/v）;流速：1 mL.min-1,检测波长：254 nm;柱温：40℃,进样量：10μL。试验建立的色谱条件能使大豆异黄酮主要组分得到很好分离,线性关系R2为0.9994~0.9998,回收率为99.29%~100.76%且变异系数小于3%,适用于大豆异黄酮不同组分的检测。不同大豆品种异黄酮含量表现为：吉林32〉GR8836〉吉大豆2号〉平安8〉小黑豆〉吉林47〉吉林35〉吉大豆1号;吉林32各组分大豆异黄酮含量表现为：大豆籽粒〉60 d胚〉50 d胚〉40 d胚〉花〉荚〉20 d胚〉30 d胚〉叶〉根〉茎。
- 张海军苏连泰李琳刘雅婧李晓薇张艳王英李景文王庆钰
- 关键词：大豆高效液相色谱法异黄酮含量
