胡江
- 作品数：6 被引量：28H指数：3
- 供职机构：北京大学基础医学院干细胞研究中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 胎儿胰腺组织中巢蛋白阳性细胞的分离和体外增殖以及诱导分化被引量：8
- 2003年
- 目的 研究从胎儿胰腺组织中分离巢蛋白 (Nestin)阳性细胞以及该细胞的体外扩增与向胰岛内分泌细胞分化的能力。 方法 采用胶原酶消化法 ,从胎儿胰腺组织中分离获得胰岛样细胞簇 (islet likecellclusters ,ICCs) ,ICCs经手工挑拣后接种 ,待形成单层上皮样细胞后 ,进行传代培养和诱导分化。利用逆转录 -聚合酶链反应 (RT PCR)、免疫荧光染色及放射免疫分析 (RIA)等方法 ,检测该细胞中分子标志物的表达 ,并对其向胰岛内分泌细胞分化的能力进行鉴定。 结果 (1)上述单层上皮样细胞具有很强的增殖能力 ,可至少连续传 16代 ;(2 )RT PCR、免疫荧光染色分析显示 ,该细胞可表达干细胞的标志分子巢蛋白和ABCG2 ;(3 )RT PCR分析显示 ,在多种细胞因子和无血清的条件下 ,巢蛋白阳性细胞经诱导后可出现胰岛素、胰升糖素和胰十二指肠同源盒基因 1(PDX 1)mR NA的表达 ,而巢蛋白和Neurogenin3 (Ngn3 )mRNA表达消失。RIA分析也可检测到诱导后的细胞内有胰岛素产生。 结论 从胎儿胰腺中分离得到的巢蛋白阳性细胞具有胰腺前体细胞的特性 ,在体外具有很强的增殖能力 ,并可诱导分化为胰岛内分泌细胞。该细胞有望为胰岛移植提供一种新的细胞来源。
- 张玲洪天配胡江吴永华李凌松
- 关键词：胎儿胰腺组织体外增殖诱导分化胰岛移植糖尿病
- 胎儿胰腺巢蛋白阳性细胞具有间充质表型特征
- 2007年
- 目的研究巢蛋白阳性细胞在胎儿胰腺中的分布以及其表面标志。方法采用免疫荧光染色法对巢蛋白阳性细胞在胎儿胰腺组织中的分布进行定位。分离和培养胎儿胰腺细胞,利用免疫荧光染色和流式细胞分析进行鉴定,并与骨髓间充质干细胞的表面标志比较。结果巢蛋白阳性细胞在胎儿胰腺间质中广泛分布;胎儿胰腺来源的巢蛋白阳性细胞的表面标志与骨髓间充质干细胞基本一致。结论从胎儿胰腺中分离的巢蛋白阳性细胞具有骨髓间充质干细胞表型特征。
- 王宏胡江吴永华李凌松李丽英洪天配
- 关键词：胎儿间充质干细胞巢蛋白胰腺
- 胎儿胰腺来源的单克隆SP细胞具有间充质的表型特征被引量：3
- 2005年
- 目的:探索一种新的人胰腺干细胞分离纯化体系,并对经这一体系所获细胞的特性进行研究.方法:首先从胎儿胰腺中分离得到胰岛样细胞簇(ICCs),进而从ICCs中得到单层上皮样细胞,并传代培养,第6代细胞通过荧光激活细胞分选(FACS)技术分选出sidepopulation(SP)细胞和非SP细胞后进行单克隆细胞培养.应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和FACS分析,研究单克隆SP细胞的体外增殖特性和表面标志.结果:SP细胞占全部细胞的0.22%。SP细胞的克隆形成率为2.7%,而非SP细胞没有克隆形成.SP克隆能够在体外传15代以上.RT-PCR显示单克隆SP细胞可表达ATP结合盒转运子G2(ABCG2)和转录因子OCT4.FACS分析显示CD44,CDl47均为阳性,而CD34,CD38,CD45,CD71,CD133及HLA-DR均为阴性.结论:胎儿胰腺来源的单克隆SP细胞在体外具有高度的增殖潜能,并具有与骨髓间充质干细胞相同的表型特征.
- 吴永华洪天配张玲胡江李凌松
- 关键词：胰腺干细胞克隆胎儿胰腺表型特征单克隆逆转录一聚合酶链反应
- 人胚胎胰腺源nestin阳性细胞的快速获取被引量：2
- 2004年
- 目的 建立一种胰腺nestin阳性细胞的快速培养方法。方法 解剖分离 12～ 2 4周龄胎儿胰腺 ,通过胶原酶Ⅴ消化获得胰岛样细胞团 (ICCs) ;经原代培养及传代培养后获得nestin阳性细胞。结果 免疫荧光法观察发现 ,传代培养 4次后即可获得单纯的nestin阳性细胞。结论 从胎儿胰腺中可快速获取单纯的nestin阳性细胞。
- 陈燊胡江李凌松
- 关键词：胰腺胰岛样细胞团胰腺干细胞免疫荧光法细胞培养
- 从胎儿胰腺组织建立单克隆胰腺前体细胞的研究被引量：13
- 2004年
- 目的 探索一种新的人胰腺干细胞分离纯化体系。 方法 从胎儿胰腺中分离获得巢蛋白阳性细胞群体 ,荧光激活细胞分选 (FACS)技术分选单个sidepopulation(SP)细胞后进行单克隆细胞培养。应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)及放射免疫分析 (RIA)方法 ,研究单克隆SP细胞在体外增殖和向胰岛内分泌细胞分化的能力。 结果 胎儿胰腺组织经过分离和体外培养后 ,可获得巢蛋白阳性细胞 ,对其进行Hoechst 33342染色 ,分析显示SP细胞约占 0 1% ;RT PCR证实SP细胞有ATP结合盒转运子G2 (ABCG2 )表达 ,而非SP细胞则未见表达 ;SP细胞的克隆形成率约为 2 7% ,而非SP细胞没有克隆形成。在多种细胞因子和无血清的条件下 ,单克隆SP细胞经诱导后出现胰岛素、胰升糖素和胰十二指肠同源盒基因 1(PDX 1)mRNA的表达 ,而巢蛋白、neurogenin3(Ngn3)和ABCG2mRNA表达消失 ;RIA分析可检测到诱导后的细胞内有胰岛素产生。 结论 首次报道从胎儿胰腺组织中分离并建立了单克隆胰腺前体细胞。该细胞在体外具有很强的增殖能力 ,并可分化为胰岛内分泌细胞。
- 张玲洪天配胡江刘羿男吴永华李凌松
- 关键词：单克隆前体细胞胰腺组织胎儿RIART-PCR
- 筛选后的巢蛋白阳性细胞流式鉴定及诱导分化被引量：6
- 2005年
- 目的观察胎儿胰腺来源的巢蛋白阳性细胞(符合医学伦理学)是否具有与间充质干细胞类似的表面标志以及多向分化的潜能。方法从胎儿胰腺中分离的巢蛋白阳性细胞筛选后进行扩增,用流式细胞仪分析表面标志,并探讨这类细胞的成脂和成骨的分化潜能。结果筛选纯化后的巢蛋白阳性细胞的表面标志与骨髓间充质干细胞表面标志相似;此类细胞可在体外诱导为脂肪细胞或骨细胞。结论筛选纯化的胎儿胰腺来源的巢蛋白阳性细胞具有一定间充质干细胞的特性。
- 王宏胡江李凌松洪天配李丽英
- 关键词：巢蛋白细胞筛选间充质干细胞
