目的:研究人内皮抑素(hum an endostatin,hEndo)基因转染的原代黑色素瘤细胞的体外和体内生物学特性。方法:先构建重组人内皮抑素的真核表达载体pcDNA3.1-hEndo,将人内皮抑素基因导入原代成人黑色素瘤细胞,检测转基因细胞hEndo蛋白的表达、分泌和抑制细胞增殖活性,并验证转基因细胞在体外和裸鼠体内的生长特性。结果:载体pcDNA3.1-hEndo经酶切后获得5.4 kb和624 bp条带,电转后G418筛选获得克隆;RT-PCR检测到转染细胞表达hEndomRNA,W estern b lot检测到转染细胞分泌hEndo蛋白,MTT表明转基因细胞上清可抑制细胞增殖;裸鼠体内生长实验显示转基因黑色素瘤生长速度明显低于对照组(P<0.05),肿瘤组织RT-PCR示hEndo基因稳定表达。结论:转hEndo基因原代黑色素瘤细胞可有效、稳定地表达有生物学活性的hEndo,hEndo能抑制瘤细胞在动物体内的生长速度。
目的研究老年人闭合性创伤性膈肌破裂的临床特点。方法回顾性分析本科1996—2005年收治的闭合性创伤性膈肌破裂13例老年患者(年龄≥65岁)和46例中青年患者(年龄〈65岁)的临床病例资料,就年龄、性别、伴随疾病、创伤程度评分(ISS评分)、膈肌破裂长度、手术前延误(入院24h内未手术)发生率、手术后并发症及病死率等指标比较和分析两者结果的异同。结果与中青年组相比较,老年组基础疾病发生率高,初诊时胸部x片未发现异常的病例数吏多,手术前延误发生率显著增加,膈肌破裂长度偏短[(5.6±2.3)cm vs (10.0±6.0)cm,P〈0.05],手术后机械通气时程更长[(17.7±21.2)d vs (3.2±5.0)d,P〈0.01],手术后并发肺炎发生率更高,死亡率远高于前组。两组创伤程度评分差异无统计学意义。结论老年组由于膈肌破裂长度偏短以及机械通气、初诊时胸部x片未发现异常的病例数显著增多,从而导致手术前延误发生率显著增加;进而需要更长时间的手术后机械通气,更易并发手术后肺炎,加之基础疾病发生率高,因而病死率显著增高。