罗鑫
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组人BIGH3蛋白滴眼液对兔角膜上皮损伤的修复作用被引量：4
- 2013年
- 背景角膜上皮损伤可导致角膜溃疡和基质混浊，甚至出现不可逆的视功能损害，以往采用的药物治疗仅能缓解刺激症状，而促进角膜上皮细胞再生的作用较弱，因此寻求能有效调控角膜上皮细胞生长，从而有效治疗角膜上皮损伤的药物至关重要。目的探讨重组人BIGH3蛋白滴眼液对角膜上皮损伤的修复作用。方法50只清洁级健康成年新西兰大白兔，均取右眼为实验眼，其中2只兔制作角膜上皮损伤模型后即刻行裂隙灯显微镜检查及角膜荧光素染色，眼前节照相后处死；48只兔按照随机数字表法随机分为重组人表皮生长因子（EGF）衍生物组（阳性对照组）、生理盐水组（阴性对照组）、质量分数0．25％重组人BIGH3蛋白滴眼液组及O．5％重组人BIGH3蛋白滴眼液组，每组12只。在直径7mm环钻内滴人体积分数20％乙醇，置于角膜中央区60s，然后用角膜刮匙刮去角膜上皮，制作角膜上皮缺损模型。术后各组兔眼分别点用相应药物，每天4次，分别于术后12、24、36、48、72h行裂隙灯显微镜检查及角膜荧光素染色，于12、24、36、48h采用抽签法各处死2只实验兔，72h时各处死4只实验兔，制备角膜组织标本并行苏木精一伊红染色，观察并比较各组兔眼在不同时间点角膜上皮修复情况，应用计算机图像处理系统测量各组兔眼不同时间点角膜上皮愈合面积。结果各组兔眼用药后均未发现任何眼部刺激症状。组织病理学研究发现，造模后即刻全层角膜上皮缺损，随着时间的延长，实验组及对照组兔角膜上皮缺损区皆逐渐变小，可见周边角膜上皮向中央缺损区移行，细胞层数逐渐增加，细胞排列极向逐渐趋于规则。重组人EGF衍生物组、生理盐水组、0．25％及0．5％重组人BIGH3蛋白滴眼液组角膜上皮愈合速率分别为15．00、13．81、18．05、18．86mm。／d。与生理盐水组比�
- 罗鑫葛红岩薛大喜肖楠齐东华田霈刘平
- 关键词：滴眼液角膜
- 改良内皮抑素基因对大鼠角膜新生血管中血管内皮生长因子及其受体表达的抑制作用被引量：2
- 2012年
- 背景内皮抑素（ES）是目前已知最强的内源性血管形成抑制因子，能抑制新生血管的发生，而精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（RGD）序列的聚合能增强Es基因的功能。目的探讨改良Es基因对大鼠角膜新生血管（CNV）中血管内皮生长因子（VEGF）及VEGF受体2（Flk-1）表达的影响及作用机制。方法102只清洁级sD大鼠按随机数字表法分为模型组、pCI空载体组、pCI—ES转染组、pCI—RGDRGD—ES转染组，每组24只；正常组6只。用浸有1mol／LNaOH溶液的直径3mm圆形滤纸片快速贴于大鼠角膜中央40s建立角膜碱烧伤CNV模型，以pCI质粒作为改良前后E5基因的表达载体，每周2次结膜下注射3μg含质粒的转染液进行基因治疗。每日裂隙灯显微镜下观察角膜水肿及CNV生长情况，计算CNV面积。于碱烧伤后1、4、7、14d用过量麻醉法处死模型鼠并获取角膜组织，用免疫组织化学法检测CNV内皮细胞中CD34的表达以计算CNV密度，通过逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）及Westernblot法分别检测角膜VEGFmRNA及Flk-1在角膜中的表达。结果角膜碱烧伤后7～14d，pCI—ES转染组、pCI—RGDRGD—ES转染组CNV面积均明显小于pCI空载体组和模型组，CNV密度均明显小于pCI空载体组和模型组，差异均有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）；pCI—RGDRGD—ES转染组CNV面积均明显小于pCI—ES转染组，CNV密度均明显少于pCI—ES转染组，差异均有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）。碱烧伤后4d，pCI—ES转染组、pCI—RGDRGD—ES转染组大鼠角膜Flk-1蛋白表达水平明显低于正常对照组大鼠，差异有统计学意义（P〈O．05）；碱烧伤后4d，pCI—ES转染组、pCI—RGDRGD—Es转染组大鼠角膜VEGFmRNA的表达水平明显低于正常对照组大鼠，差异有统计学意义（P〈O．05）；pCI—RGDRGD—ES转染组大鼠角膜VEGFmRNA表达水平明显低于pCI—ES转染组大鼠，差异有统计学意义（
- 葛红岩肖楠田霈王琳罗鑫刘平
- 关键词：内皮抑素血管内皮生长因子血管内皮生长因子受体2
- 改良内皮抑素对人脐静脉内皮细胞抑制作用的实验研究
- 2012年
- 目的:探讨改良内皮抑素(RGDRGD-ES)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的抑制作用,摸索RGDRGD-ES对HUVEC细胞抑制作用的相对最佳作用浓度和时间。方法:通过快速定点诱变PCR方法获得含有RGDRGD膜序的改良人内皮抑素基因,并构建其原核表达载体。表达、纯化改良内皮抑素(RGDRGD-ES),运用MTT法和流式细胞仪检测RGDRGD-ES对人脐静脉内皮细胞的抑制作用。结果:1.诱变了ES基因,获得了改良的RGDRGD-ES基因,并成功构建其原核表达载体。2.获得了RGDRGD-ES蛋白。3.改良的RGDRGD-ES能够有效抑制人脐静脉内皮细胞的生长(P<0.01);抑制率随着药物浓度(10μg/ml、20μg/ml、30μg/ml)的增加和作用时间(24 h、48 h、72 h)的延长而逐渐增加,具有浓度和时间依赖性(P<0.01);而30μg/ml与40μg/ml、50μg/ml组间、72 h与96 h组间无明显差异(P>0.05)。4.细胞凋亡率(作用24 h)具有药物浓度(10μg/ml、20μg/ml、30μg/ml)依赖性(P<0.01),30μg/ml与40μg/ml、50μg/ml组间凋亡率无明显差异(P>0.05)。结论:成功构建了改良RGDRGD-ES基因的原核表达载体,RGDRGD-ES蛋白在30μg/ml浓度作用72小时条件下能够有效抑制人脐静脉内皮细胞的生长,改良内皮抑素(RGDRGD-ES)对HUVEC的抑制作用较ES明显提高。
- 肖楠田霈罗鑫齐东华倪双刘平
- MicroRNA-126(miR-126)对血管调节的分子机制被引量：3
- 2014年
- 脉管系统的结构,维护及重塑的精确调节对于血管的正常发育,组织损伤的应答和肿瘤的生长都是必不可少的。最近,越来越多的研究报道了非编码的RNAs,又叫做microRNAs调节内皮细胞对血管原刺激的应答反应。在体内,维持血管内皮细胞和血管的完整性方面miR-126是一种重要的血管生成信号调节因子。miR-126通过负性调控血管生长因子促进血管发生反应,这些血管因子包括血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)。因此,miR-126表达的靶向作用也许对于血管过多或缺乏引起的相关疾病开辟了一种新的治疗方法,这些发现也证实了单一miRNA能够调节血管的完整性及血管生成,为调整血管的形态和功能提供了一个新的靶点。本文就当前miR-126对血管的调节及分子机制进行综述。
- 齐东华葛红岩罗鑫薛大喜王朝刘平
- 关键词：MIR-126新生血管靶基因分子机制
- 重组人BIGH3蛋白对兔角膜上皮损伤的修复作用
- 罗鑫
