秦松柏
- 作品数：4 被引量：13H指数：3
- 供职机构：中国科学院东北地理与农业生态研究所更多>>
- 发文基金：中国科学院知识创新工程重要方向项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 黏虫体内两种微管蛋白基因cDNA序列的克隆与序列分析被引量：3
- 2008年
- 以黏虫4龄幼虫为材料提取总RNA，利用RT-PCR和cDNA末端快速扩增技术（RACE），分别扩增得到该虫的α和β微管蛋白基因的cDNA序列各1条。其中α微管蛋白基因的cDNA序列1443个碱基，包括一个1353个碱基的开放阅读框，编码一个含450个氨基酸的蛋白，分子量约为50．0ku。氨基酸的142～148位存在一个微管蛋白标志信号片段GGGTGSG，在氨基酸序列的C-端有一个酪氨酸残基，N-端存在一个对转录后调控非常重要的保守区MRECI序列，以上特点与其他昆虫α微管蛋白氨基酸序列相同。黏虫口微管蛋白基因eDNA序列含1906个碱基，开放读码框1344个碱基，编码氨基酸447个，分子量约为50．2ku，等电点4．75。1～4个氨基酸MREI为β微管蛋白转录后调控信号，140～146GGGTGSG位同样存在一个微管蛋白标志信号片段。序列比对表明，克隆的α和β微管蛋白基因与其他昆虫的α和β微营蛋白基因在核苷酸和氨基酸水平上都是高度同源的，黏虫与家蚕（Bombyx mori）α微营蛋白的氨基酸序列同源性达到99．3％，与其他3种夜蛾科昆虫α微管蛋白的氨基酸序列同源性更是达到100％。黏虫与家蚕β微管蛋白的氨基酸序列同源性达到98．7％，与烟草天蛾β微管蛋白的氨基酸序列同源性达到99．6％。两个基因的cDNA序列已经登录GenBank并获得登录号分别为EU100016和EU234504。
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- 关键词：黏虫克隆
- 三种鳞翅目夜蛾科昆虫α-微管蛋白基因的克隆与mRNA表达水平被引量：5
- 2008年
- 根据昆虫微管蛋白的分子特征筛选对昆虫微管有效的抑制剂来控制昆虫的生长发育或不同器官的有效功能的表达来达到控制害虫的目的，在未来的害虫综合治理中具有广泛的应用前景。以预蛹期甜菜夜蛾Spodoptera exigua、小地老虎Agrotis ypsilon和八字地老虎Agrotis c-nigrum为材料提取总RNA，利用RT-PCR和cDNA末端快速扩增技术（RACE），分别扩增得到以上3种夜蛾科昆虫的α-微管蛋白基因的cDNA序列，3种昆虫的该基因序列均包括1个1353个碱基的开放阅读框。这3个cDNA序列均编码1个含450个氨基酸的蛋白，分子量约为50kDa。氨基酸的142～148位存在1个微管蛋白信号片段GGGTGSG，在氨基酸序列的C-端都有1个酪氨酸残基，N-端存在1个对转录后调控非常重要的保守区MRECI序列，以上特点与其他昆虫α-微管蛋白氨基酸序列保守区序列相同。序列比对表明，克隆得到的α-微管蛋白基因的核苷酸序列是高度保守的，同源性为94．4％～97．0％，而氨基酸的序列同源性达到100％。利用RT—PCR技术在3种昆虫4龄、5龄、6龄幼虫、蛹期4个不同发育阶段和6龄期的肠道、体壁、脂肪体3种不同组织中都检测到了α-微管蛋白基因在mRNA水平的表达。
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- 关键词：夜蛾科昆虫Α-微管蛋白
- 小卷蛾斯氏线虫β-微管蛋白基因的克隆与序列分析被引量：1
- 2008年
- 用TRIZOL法提取了小卷蛾斯氏线虫RNA，利用RT-PCR和cDNA末端快速扩增技术（RACE）技术克隆了两条小卷蛾斯氏线虫β-微管蛋白基因cDNA的3＇端序列。将得到的cDNA序列提交到GenBank，分别获取登录号EU049857和EU049858。两个序列，长度分别为1372碱基（SCTUBl）和1374碱基（SCTUB2），分别编码434和432个氨基酸，编码的蛋白的分子量在48kDa左右。氨基酸的124-131位存在一个微管蛋白信号片段GGGTGSG。序列分析表明，分离得到的两个基因与其他线虫的微管蛋白基因具有较高的同源性，核苷酸序列同源性在65％以上，氨基酸序列同源性在81％以上，两个氨基酸序列都含有两个氨基酸保守区NNWAKGHY和RKAFLHWYTGEGMDEMEFTE。
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- 关键词：Β-微管蛋白克隆
- 二化螟β1微管蛋白基因cDNA序列的克隆与序列分析被引量：8
- 2008年
- 微管是真核生物体内分布最为广泛的一类蛋白,是由α-和β-两种不同的微管蛋白组成的异源二聚体。微管参与许多细胞功能,如细胞形态发生、细胞生长和分裂等。以二化螟3龄幼虫为材料提取总RNA,利用RT-PCR和cDNA末端快速扩增技术(RACE),扩增得到该虫的β微管蛋白基因的cDNA序列一条。cDNA序列含1 862个碱基,开放读码框1 344个碱基,编码氨基酸447个,分子量约为50.2kD,等电点4.82。氨基酸序列中1～4个氨基酸MREI为β微管蛋白转录后调控信号,是微管蛋白特异片段;氨基酸序列的140～146GGGTGSG位存在一个微管蛋白标志信号片段。序列比对表明,克隆的β微管蛋白基因与其他昆虫的β微管蛋白基因在核苷酸和氨基酸水平上都是高度同源的,与家蚕Bombyx mori β1微管蛋白的氨基酸序列同源性达到99.1%,与烟草天蛾β1微管蛋白的氨基酸序列同源性达到98.7%,与果蝇Drosophila melanogaster β1微管蛋白的氨基酸序列同源性达到96.9%。该基因cDNA序列已经登录Genbank并获得登录号为EU429675。
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- 关键词：二化螟克隆
