王鹏飞
- 作品数：3 被引量：33H指数：3
- 供职机构：河南农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 地黄内质网型(ER)Ca^2＋_ATPase基因的克隆及表达分析被引量：6
- 2013年
- 在分析和筛选我们前期建立的地黄转录组文库、抑制消减杂交文库及地黄相关EST文库基础上,利用拼接、延伸及PCR方法,成功克隆到一个全长2681bp的Ca2+-ATPase基因,含有2007bp完整的开放阅读框,编码568个氨基酸。分析表明,地黄Ca2+-ATPase属于内质网型ATPase,与大豆和葡萄有较近亲缘关系,Ca2+-ATPase含有Ca2+离子转运区、ATP结合区等保守区。随着生长,正茬地黄Ca2+-ATPase表达量逐渐升高,而连作地黄中的Ca2+-ATPase基因在块根伸长期表达突然升高,之后降低。
- 刘驰李明杰王鹏飞杨艳会王丰青张重义李春奇陈新建
- 关键词：地黄钙信号
- 地黄连作障碍中钙信号系统的异常变化分析被引量：14
- 2013年
- 目的:阐述钙信号系统相关基因在头茬、重茬地黄中不同时期、不同组织中的相对表达量;同时利用不同浓度的钙信号阻断剂(异搏定、肝素钠)处理重茬地黄,进一步验证钙信号系统在连作伤害中的作用方式。方法:在前期转录组和连作地黄数字差异表达谱文库构建基础上,筛选鉴定了在连作地黄中差异表达的钙信号体系相关蛋白基因,并利用实时荧光定量PCR技术对钙信号系统相关基因进行时空表达分析;利用不同浓度的钙信号阻断剂(异搏定、肝素钠)处理重茬地黄。结果:12个基因中2个背向细胞质的钙离子通道在重茬地黄中下调表达,10个朝向细胞质的钙离子通道在重茬地黄中上调表达;而施用钙信号阻断剂的重茬地黄中,钙信号响应元件的CBL,CBP,CIBP,PLC等关键基因表达均显著下调,植株的受害程度显著缓解,并接近头茬水平。结论:连作伤害引起了钙由内质网向细胞质中流动,钙信号系统参与了地黄连作毒害的感知、传导和放大过程。
- 郭冠瑛李明杰王鹏飞王丰青何华勤李娟郑红艳陈新建张重义
- 关键词：地黄连作障碍荧光定量PCR
- 地黄块根膨大发生和驱动的组织观察及激素相关基因的调控分析被引量：18
- 2014年
- 目的:为了研究地黄块根膨大的发育特征,揭示激素相关基因在这个过程中的调控作用机制。方法:该研究以地黄品种"温-85"为实验材料,采集不同发育时期的地黄块根进行表型观察,利用半薄树脂切片技术观察块根的组织形态。从地黄转录组数据库中挑选与激素合成和响应相关的基因,利用qRT-PCR技术研究激素相关基因在地黄不同发育时期块根组织中的表达变化。结果:地黄的发育阶段可划分为苗期、拉线期、块根膨大初期,膨大中期,膨大后期和成熟期。块根解剖学特征分析表明次生形成层的分裂启动了地黄块根膨大的进程;膨大前期次生形成层的持续快速分裂和副形成层的形成驱动了块根的向外(平周)和侧向(圆周)持续快速膨大。在半薄和超薄切片观察过程中发现在地黄块根中存在有大量的油脂细胞。定量结果分析显示IAA,CK,ABA,乙烯,JA,EB的合成和响应基因整体呈现上调表达趋势,GA的合成与响应基因呈下调趋势,其负调控因子基因则上调表达。大部分激素合成相关基因的表达高峰期处在拉线期、膨大前期。结论:拉线期和块根膨大前期是地黄块根发育最为关键的时期,IAA,CK,ABA,乙烯,JA,EB的合成和响应基因的上调与GA合成基因的下调能促进块根的发育。油脂细胞可能与地黄药用成分的合成与储存有密切关系。该研究为阐述地黄块根发育的规律和分子调控机制进行了有益的探索。
- 王鹏飞李鑫宇李明杰刘林王潇然王丰青李春奇陈新建张重义
- 关键词：地黄切片激素基因表达
