王鹏博
- 作品数:9 被引量:4H指数:2
- 供职机构:河北农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:河北省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 利用敲除PLCζ基因的JM8细胞制备嵌合体小鼠
- 2013年
- 为了研究PLCζ对公鼠生殖能力的影响,试验采用显微注射的方法将敲除PLCζ基因的JM8胚胎干细胞注入8-细胞胚胎获得嵌合体小鼠,并通过微卫星分析检测公鼠生殖系嵌合的情况及能否通过生殖系传递。共移植562枚胚胎,出生小鼠127只,出生率为22.60%,其中成年的毛色嵌合体小鼠数为46只,嵌合率为36.22%,对10只成年嵌合体公鼠的12种组织(脑,心脏,膀胱,肺脏,肝脏,胃,肾脏,睾丸,胰腺,肠,肌肉,脾脏)进行检验,有4只小鼠睾丸发生了嵌合,说明通过显微注射获得了生殖系嵌合的公鼠,但是生殖系嵌合的公鼠和CD-1母鼠交配后没有生下毛色嵌合小鼠,说明这些公鼠没有生殖系传递的痕迹,表明敲除了PLCζ基因影响了嵌合体公鼠的生精能力。
- 潘晓靖王鹏博胡春超徐继强崔丽芳李相运
- 关键词:显微注射微卫星分析嵌合体
- 利用敲除PLC(?)基因的JM8细胞制备嵌合体小鼠
- PLC是磷脂酰肌醇信号转导途径中非常重要的一个关键酶。而PLCζ则是磷脂酶C最短的一个同工酶,是结构和功能独立的新型PLC。通过研究发现PLCζ构型中催化区的链接点对受精的作用至关重要。 PLCζ的发现可以作为细胞内Ca...
- 王鹏博
- 关键词:嵌合体小鼠显微注射微卫星分析
- 文献传递
- 小鼠8-细胞期胚胎和囊胚制备嵌合体的比较被引量:1
- 2012年
- 嵌合体是指由2个或2个以上具有全能性或多能性的细胞系发育而成的复合体。随着发育生物学理论和胚胎干细胞技术的发展,将胚胎干细胞导人小鼠植入前胚胎制备嵌合体逐渐成为研究细胞分化机制的有效工具。经基因修饰胚胎干细胞来源的可遗传的嵌合个体,
- 王鹏博李相运胡春超徐继强潘晓靖
- 关键词:植入前胚胎嵌合体小鼠细胞期囊胚干细胞技术
- 利用敲除PLCζ基因的JM8细胞制备嵌合体小鼠
- 引言PLC是磷脂酰肌醇信号转导途径中非常重要的一个关键酶。而PLCζ则是磷脂酶C最短的一个同工酶,是结构和功能独立的新型PLC。PLCζ的发现可以作为细胞内Ca2+调节的一个新的介质,这更有利于我们理解大幅度、低频率的C...
- 王鹏博胡春超李相运
- 文献传递
- E-钙粘蛋白抗体对小鼠早期胚胎发育的影响被引量:2
- 2012年
- 旨在研究E-钙粘蛋白抗体(ECCD-1)对小鼠早期胚胎体内外发育的影响。在体外培养小鼠8-细胞胚胎的培养液中,分别添加不同浓度的ECCD-1,通过胚胎形态观察、碱性磷酸酶染色、多能性因子免疫染色、体外贴壁培养、嵌合体制备以及体内移植试验检测ECCD-1对小鼠胚胎发育能力的影响。结果表明,ECCD-1抗体延迟胚胎致密化和囊胚腔形成,但内细胞团并未受到影响,胚胎碱性磷酸酶和SSEA-1、Oct-4、Sox2、Nanog 4种多能性因子的免疫染色都呈阳性,此外,ECCD-1抗体也不影响胚胎的体外贴壁生长、体内移植着床以及嵌合体的制备。这些数据表明,ECCD-1抗体延迟胚胎致密化但并不影响胚胎的体内外发育能力。
- 吴兴龙王棉娟胡春超王鹏博李相运
- 关键词:小鼠发育能力
- 兔抗小鼠胚胎干细胞免疫血清对8-细胞胚胎发育的影响
- 2013年
- 目的制备兔抗小鼠胚胎干细胞免疫血清,观察其对小鼠胚胎发育的影响。方法用小鼠胚胎培养基稀释兔抗血清,分别稀释至50倍、100倍、200倍,用其对小鼠8-细胞胚胎进行培养,通过胚胎致密化、囊胚率、胚胎体外贴壁生长、细胞计数、胚胎移植和免疫荧光染色观察胚胎发育状况。结果形态学上50倍稀释的抗血清能够抑制8-细胞胚胎的发育甚至使其死亡;100倍稀释的抗血清能够延迟8-细胞胚胎的致密化,并使得胚胎在囊胚化过程中出现空泡化的现象;200倍稀释的抗血清作用不明显。未作免疫处理的兔血清与空白对照组差异不显著。100倍稀释的抗血清能够显著抑制囊胚内细胞团(ICM)的发育、囊胚细胞分布紊乱、胚胎细胞数目减少以及囊胚畸形率增加。虽然囊胚的碱性磷酸酶和Oct4均呈阳性,但经胚胎移植后都不能正常发育。结论兔抗小鼠胚胎干细胞免疫血清能够抑制小鼠胚胎致密化过程和囊胚内细胞团的发育,使囊胚出现空泡化,细胞分布紊乱,抑制胚胎着床。
- 胡春超崔利芳王鹏博王棉娟邸科前李相运
- 关键词:胚胎干细胞内细胞团致密化体外培养
- 兔抗ES细胞免疫血清对附植前小鼠胚胎的作用
- 利用抗ES细胞的免疫血清培养小鼠胚胎,就有可能抑制ICM的生长以得到不含ICM的胚胎。适宜浓度稀释的抗血清对8-细胞前胚胎的发育没有影响,从桑椹胚开始导致胚胎致密化过程的延迟和囊胚空泡化;培养到60h后,总细胞数显著下降...
- 胡春超王鹏博李相运
- 关键词:胚胎学胚胎干细胞体外培养胚胎发育
- ES小鼠与正常小鼠血液理化指标比较研究
- 2012年
- [目的]比较ES小鼠和正常小鼠的血液理化指标。[方法]以成年ES克隆小鼠为研究对象,测定其血液生理生化指标,与正常小鼠进行比较。[结果]ES小鼠血液中WBC、MCV、MCH、LYMPH、MONO、BASO、RDW-CV等生理指标与TP、LDL、GLU、AMY等生化指标,与正常小鼠存在显著或者极显著差异。[结论]该研究可为小鼠的基因克隆奠定基础。
- 胡春超王鹏博吴兴龙张鹏李相运
- 关键词:血液生理指标生化指标
- 四倍体胚胎发育阶段对胚胎干细胞嵌合体小鼠制备的影响被引量:2
- 2011年
- 目的探讨四倍体胚胎发育阶段对胚胎干细胞(ES)嵌合体小鼠制备的影响。方法通过2-细胞胚胎电融合法制备四倍体胚胎,采用显微注射方法将ES细胞分别注入1-细胞、4-细胞、囊胚3个发育阶段的四倍体胚胎中。所用ES细胞分别为杂交系B6D2F1×129/Sv和近交系C57BL/6J,经胚胎移植和剖腹产以获得ES小鼠。结果实验表明,2-细胞胚胎电融合率为92.45%,4-细胞胚胎发育率为93.51%,囊胚发育率为90.42%。杂交ES细胞注射四倍体囊胚获得22只ES小鼠,效率显著高于近交系ES细胞以及其他发育阶段的四倍体胚胎,ES小鼠与B6D2F1×129/Sv杂交小鼠毛色一致且具有正常生殖能力。结论四倍体胚胎的发育阶段显著影响ES小鼠的制备。
- 吴兴龙张鹏赵虎王鹏博胡春超李相运
- 关键词:胚胎干细胞四倍体胚胎电融合显微注射嵌合体小鼠