王英
- 作品数：18 被引量：65H指数：6
- 供职机构：中国农业科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
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- J亚群禽白血病JL-2株gp85基因的克隆与表达被引量：6
- 2005年
- 本实验在分离鉴定J亚群禽白血病JL_2株的基础上,利用PCR方法扩增出包括gp85基因在内的长度为960bp的DNA片段。将其连到PGEX_6p_1载体上,构建了重组表达质粒PGEX_6P-1/gp85,对质粒进行序列分析并在IPTG的诱导下进行表达。SDS_PAGE分析结果表明,融合蛋白(54 Ku)在BL21中得到有效表达。表达产物占菌体总蛋白的31.8%。Western Blot结果表明,表达产物可与ALV_J阳性血清发生特异性反应。这些结果为进一步研究gp85蛋白的功能及研制ALV_J ELISA诊断试剂盒奠定了基础。
- 宋素泉付朝阳高宏雷王笑梅曾祥伟郭艳王英张厚双王晓艳魏萍
- 关键词：GP85基因克隆
- 鸡传染性贫血病毒重组抗原间接ELISA诊断方法的建立
- 本研究在国内首次应用重组抗原,成功建立了检测鸡传染性贫血病毒血清抗体的间接ELISA诊断方法.确定抗原最适包被浓度为5μg/mL,血清最适稀释度为1:100,其作用时间为60min,酶标抗体最适作用时间的60min,S/...
- 王英王笑梅高宏雷付朝阳包晓玮王晓艳
- 关键词：鸡传染性贫血病毒间接ELISA血清抗体流行病学血清学诊断
- 文献传递
- IBDV超强毒株Gx基因组大片段在大肠杆菌中的表达
- 本文对传染性法氏囊病病毒大片段大阅读框架进行了大肠杆菌表达研究,为研制检测和预防IBD的IBDV蛋白亚单位试剂和疫苗提供了基础.
- 高宏雷王笑梅张厚双付朝阳王英宋素泉
- 关键词：传染性法氏囊病病毒大肠杆菌
- 文献传递
- J亚群禽白血病Hrb-1和JL-2株囊膜基因克隆及变异分析
- 在本研究中,采用特异性检测J-亚群禽白血病的RT-PCR方法,自哈尔滨市及吉林省患病鸡群中分离鉴定出两株J亚群禽白血病病毒,分别命名为Hrb-1和JL-2;将两株病毒经SPF鸡胚成纤维细胞增殖,获取其前病毒DNA,采用依...
- 付朝阳宋素泉高宏雷王笑梅王英张厚双郭燕童光志
- 关键词：囊膜基因病毒分离鉴定
- 文献传递
- J亚群禽白血病Hrb-1株的分离鉴定及囊膜基因的克隆
- J亚群禽白血病(Subgroup J Avian Leukosis)是由J亚群禽白血病病毒(Avian LeukosisVirus of Subgroup J,ALV-J),引起的一种以免疫抑制、生长抑制和髓细胞癌变为特...
- 付朝阳王笑梅宋素泉高宏雷王英张厚双尹训南童光志
- 文献传递
- IBDV超强毒株Gx基因组大片段在大肠杆菌中的表达
- 传染性法氏囊病病毒(IBDV是禽病毒的一种,在鸡和火鸡中急性、高度接触性传染引发传染性法氏囊病(IBD)。鸡的IBDV主要侵害3-12周龄的雏鸡和青年鸡,破坏法氏囊中的B淋巴细胞,导致免疫抑制。目前IBD呈世界范围流行。...
- 高宏雷王笑梅张厚双付朝阳王英宋素泉
- 文献传递
- J亚群禽白血病Hrb-1株的分离鉴定及囊膜基因的克隆
- 本文对分离自哈尔滨某发病鸡场的一株病毒进行ALV-J特异性RT-PCR检测、细胞培养、成功地克隆了该病毒的env基因,序列测定的结果表明,该病毒为ALV-J.
- 付朝阳王笑梅宋素泉高宏雷王英张厚双尹训南童光志
- 关键词：禽白血病ALV-J
- 文献传递
- CIAV VP1 C端基因片段克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：5
- 2004年
- 将从组织病料中提取到的鸡传染性贫血病毒核酸经PCR扩增得到vp1基因,用DNAStar分析软件分析预测VP1的抗原表位,它们主要位于VP1氨基酸序列的第1～95、134～303、327～435位,分别命名为Ⅰ区、Ⅱ区、Ⅲ区。欲表达C端基因片段,含部分Ⅱ区和完整的Ⅲ区。把vp1基因克隆到表达载体pGEX＿6p＿1上,用BamHI消化重组表达质粒pGEX＿vp1,回收含C端基因的大片段,自连转化大肠杆菌感受态细胞,得到重组质粒pGEX＿vp1(C)。重组菌经IPTG诱导,SDS＿PAGE分析,结果VP1C端基因片段在大肠杆菌中成功表达,表达的融合蛋白以包涵体形式存在,分子量约为49kDa。蛋白纯化后作ELISA检测,可与阳性血清反应。本研究为研制应用重组抗原制备ELISA诊断试剂盒奠定了基础。
- 王英王笑梅高宏雷付朝阳张厚双宋素泉郭艳
- 关键词：VP1大肠杆菌克隆VP1基因病料
- J亚群禽白血病病毒Hrb-1和JL-2株囊膜基因的克隆及遗传分析被引量：1
- 2003年
- 采用特异性检测J亚群禽白血病病毒的RT PCR方法 ,自哈尔滨市及吉林省患病鸡群中分离鉴定出 2株J亚群禽白血病病毒 ,分别命名为Hrb 1和JL 2。 2株病毒经SPF鸡胚成纤维细胞增殖 ,获取其前病毒DNA。采用依据原型毒株HPRS 10 3cDNA序列设计并合成的 1对引物 ,进行PCR扩增 ,得到了JL 2和Hrb 1的囊膜基因。分别构建了重组质粒 pMD18 T JL2 /env和pMD18 T Hrb 1/env。在对 2株病毒囊膜基因进行序列测定的基础上 ,将囊膜基因中 gp85和 gp37的核苷酸序列及其推导氨基酸序列与国际上不同的参照毒株以及国内部分分离株进行了比较分析 ,结果表明 ,JL 2和Hrb 1分别与美国病毒株adol hc 1和UD3有着较大的亲缘关系。
- 付朝阳宋素泉高宏雷王笑梅王英张厚双郭燕童光志
- 关键词：J亚群禽白血病RT-PCR
- 鸡传染性贫血病毒重组抗原间接ELISA诊断试剂盒的研制
- 鸡传染性贫血(chicken infectious anemia,CIA)是由鸡传染性贫血病毒(chicken infectiousanemia virus,CIAV)引起雏鸡的以坏疽、淋巴组织损伤和骨髓发育不全为特征的...
- 王英
- 关键词：鸡传染性贫血病毒VP1基因重组抗原间接ELISA
- 文献传递
