王春生
- 作品数：14 被引量：106H指数：4
- 供职机构：宁夏医科大学总医院更多>>
- 发文基金：宁夏回族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一种稳定高效的新生大鼠皮质神经元原代培养方法被引量：2
- 2015年
- 目的:建立一种稳定、高效、简单可行的新生大鼠大脑皮质神经元原代培养方法。方法:取新生24 h内的SD大鼠,分离皮质,采用木瓜蛋白酶消化、实验前多聚赖氨酸铺板、不同机械吹打次数及细胞接种2 h后全量换为添加B-27的Neurobasal A培养基的培养方法,MTT比色法分析检测神经元细胞成活率;于不同时间在倒置相差显微镜下观察细胞的生长状态;利用神经元特异性标志物微管蛋白相关标志物2(microtubule associated protein 2,MAP2)鉴定神经元纯度。结果:木瓜蛋白酶明显增加原代培养神经元细胞活力(P<0.01),采用适度的机械吹打、实验前多聚赖氨酸铺板及细胞接种2 h后全量换为添加B-27的Neurobasal A培养基,对神经细胞的活力没有明显的影响(P>0.05)。大部分皮质神经元具有典型的神经元形态特征,经MAP2免疫荧光技术鉴定神经元所占比例达95%以上。结论:该方法操作简单高效,方便可行,结果稳定。
- 马万袁文俊焦英甫王春生陈桂英孟尽海
- 关键词：大脑皮质神经元原代培养新生大鼠
- 骨科手术病人术后下肢深静脉血栓形成的危险因素被引量：40
- 2013年
- 目的筛选骨科手术病人术后下肢深静脉血栓形成（DVT）的危险因素。方法择期骨科手术病人5133例，性别不限，年龄18～89岁。术前1d访视病人，记录性别、年龄、体重、疾病诊断、吸烟史、合并症、既往病史、实验室检查结果。术中采用全身麻醉、椎管内麻醉或区域神经阻滞。术后第7天采用超声法诊断是否发生DVT，将患者分为非DVT组和DVT组。记录麻醉方法、手术种类、手术时间、是否使用低分子肝素抗凝、术后开始下地时间。将组间差异有统计学意义的因素进行多因素logistic回归分析，筛选该类病人DVT的危险因素。结果212例患者术后发生DVT，发生率为4．13％。logistic回归分析结果显示：年龄〉64岁、体重指数≥25kg／m2、合并糖尿病和高血压、既往静脉曲张病史，甘油三酯≥1．7mmol／L、D-二聚体≥500μg／L、手术时间〉4h、全身麻醉、术后开始下地时间≥5d是骨科手术病人术后DVT的独立危险因素（P〈0．05）。结论老龄、肥胖、静脉曲张病史、合并糖尿病和高血压、高甘油三酯和D．二聚体水平、长时间手术、全身麻醉、术后卧床时间长是骨科手术病人术后下肢DVT的独立危险因素。
- 孟尽海王文娟刘斐吴燕王春生
- 关键词：静脉血栓形成下肢骨疾病外科手术
- 瑞芬太尼预先给药对失血性休克兔肾脏脂质过氧化及组织形态学的影响
- 2013年
- 目的观察瑞芬太尼预先给药对急性失血性休克兔肾脏脂质过氧化及组织形态学的影响。方法 32只新西兰白兔随机均分为4组(n=8),即假手术组(S组)、对照组(C组)、瑞芬太尼低剂量组(RL组)、瑞芬太尼高剂量组(RH组)。S组仅行股动脉穿刺置管,气管切开等操作;C组、RL组和RH组气管插管后经10 min股动脉均匀放血至平均动脉压(MAP)降至40 mmHg制备失血性休克模型,并分别于放血前15 min开始持续静脉输注等容量生理盐水,低、高剂量瑞芬太尼至休克120 min[低剂量瑞芬太尼为0.66μg/(kg.min),高剂量为1.32μg/(kg.min)]。维持MAP在35～45 mmHg水平120 min,随后处死动物,取左肾上极组织测MDA、SOD含量;取右肾上极组织固定,包埋,染色,光镜下观察病理学变化。结果与S组比较,3组MDA含量升高(P<0.05),SOD活性降低(P<0.05);与C组比较,RL组MDA含量,SOD活性变化差异无统计学意义(P>0.05);RH组MDA含量降低(P<0.05),SOD活性升高(P<0.05);与RL组比较,RH组MDA含量降低(P<0.05),SOD活性升高(P<0.05)。S组肾小球完整,肾小管排列整齐,无炎性细胞浸润;C组、RL组肾小球完整,肾小管排列较整齐,肾小球及肾间质见大量炎性细胞浸润;RH组肾小球完整,肾小管排列较整齐,肾间质见极少量炎性细胞浸润。结论高剂量瑞芬太尼预先给药通过抑制脂质过氧化反应减轻失血性休克兔肾脏损伤。
- 王文娟孟尽海李静王春生陈雅儒
- 关键词：哌啶类出血性脂质过氧化作用
- 丙泊酚对发育期大鼠皮质神经元钙离子的影响被引量：1
- 2014年
- 目的观察不同浓度丙泊酚对大鼠发育期大脑皮质神经元钙离子([Ca2+]i)的影响。方法原代培养7d的大鼠皮质神经元,随机分为4组:对照组(C组)、丙泊酚10μmol·L-1组(P10组)、丙泊酚30μmol·L-1组(P30组)、丙泊酚100μmol·L-1组(P100组),Fluo-4AM钙荧光指示剂染色,激光共聚焦显微镜下动态观察使用丙泊酚前、丙泊酚预处理后和氯化钾溶液诱发细胞内钙离子浓度的变化。结果培养7d的大鼠各组皮质神经元基础值、丙泊酚预处理各组钙荧光强度间比较差异无统计学意义(P>0.05);丙泊酚预处理后钙荧光强度同基础值比较差异无统计学意义(P>0.05);氯化钾诱发后各组钙荧光强度明显高于基础值(P<0.01);P30、P100组与C组比较氯化钾诱发后钙荧光强度峰值明显降低(P<0.01),分别下降了26.3%和28.6%;P30、P100与P10组比较明显降低(P<0.01),P10组与C组间、P100与P30组间钙荧光强度峰值比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论丙泊酚抑制大鼠发育期皮质神经元钙内流。
- 马万孟尽海袁文俊焦英甫王春生高小茹
- 关键词：丙泊酚发育期神经元钙离子
- 顺式阿曲库铵两种不同给药方式对肌松残余作用的影响被引量：27
- 2014年
- 目的比较顺式阿曲库铵持续输注与间断给药对肌松残余作用的影响。方法择期行腰椎管狭窄或胸腰椎体骨折手术患者80例,年龄18～70岁,随机分为A1、A2、B1和B2四组,每组20例。A1和A2组分别微量泵持续输注顺式阿曲库铵1.5和0.75μg·kg-1·min-1,B1和B2组分别静脉间断注射顺式阿曲库铵0.1和0.05mg·kg-1·h-1。A1组与B1组、A2组与B2组肌松药使用总量相同。记录肌松药使用总量,TOFr达25%、50%、75%、90%的时间,拔管时间,患者能够持续抬头5s的时间。结果与A2组比较,A1组TOFr恢复至25%、50%时间明显延长(P<0.05);与B1组比药,A1组TOFr恢复至25%的时间明显延长(P<0.05);与B2组比较,A2组TOFr恢复至50%、75%时间明显延长(P<0.05);B1组TOFr恢复至50%、75%、90%时间明显延长(P<0.05)。与A2组比较,A1组患者肌力恢复于Ⅳ～Ⅴ级的时间及能够持续抬头5s的时间明显延长(P<0.05)。结论顺式阿曲库铵持续输注与间断给药对肌松残余作用均无明显影响,但持续输注可延长肌松恢复时间。
- 吴燕孟尽海刘斐王春生姚杰
- 关键词：顺式阿曲库铵残余肌松作用
- 不同剂量羟乙基淀粉对结直肠癌手术患者血液流变学的影响被引量：3
- 2014年
- 目的研究不同剂量羟乙基淀粉(130/0.4)用于结直肠癌手术患者对血液流变学的影响。方法结直肠癌手术患者60例,按照羟乙基淀粉补充剂量不同随机分为3组(每组20例):A组10 mL·kg-1、B组15mL·kg-1、C组20 mL·kg-1。观察并记录扩容前(T0)、扩容结束后30min(T1)、扩容后3.5h(T2)后的高(200s-1)、中(30s-1)、低(5s-1)切变率下全血粘度、血浆粘度(ηp)、红细胞刚性指数(ERI)、红细胞聚集指数(EAI)、红细胞压积(Hct)、全血高切还原粘度、全血低切还原粘度指标。结果与T0相比,A、B、C组患者全血低、中、高切变率下全血粘度、血浆粘度、红细胞压积及红细胞变形指数在T1、T2时均有明显下降(P<0.05);T2与T1比较,A组低切变率全血粘度、红细胞压积、红细胞聚集指数指标升高,差异有统计学意义(P<0.05);T0时,3组的低、中、高切变率全血粘度、血浆粘度、红细胞压积、全血高切还原粘度、全血低切还原粘度、红细胞刚性指数及聚集指数比较差异均无统计学意义;T1和T2时,C组与A组相比,患者全血粘度、红细胞刚性指数及聚集指数指标均降低(P<0.05);T2时,B组与A组相比,患者低、中、高切变率全血粘度、血浆粘度、红细胞压积、全血高切还原粘度、全血低切还原粘度、红细胞刚性指数及聚集指数差异无统计学意义。结论不同剂量羟乙基淀粉输入均能有效改善结直肠癌手术患者血液流变学状态,20mL·kg-1羟乙基淀粉的疗效较优。
- 刘斐孟尽海王春生吴燕姚杰
- 关键词：血液流变学结直肠癌手术
- 丙泊酚对大鼠急性脊髓损伤早期的影响被引量：1
- 2013年
- 目的观察丙泊酚对大鼠急性脊髓损伤早期的影响,探讨丙泊酚对急性脊髓损伤早期脊髓神经组织的保护作用。方法健康雄性SD大鼠48只随机分为6组,每组8只。假手术组(S组)、脊髓损伤组(I组)、脂肪乳组(F组)和不同剂量丙泊酚组:低剂量组(L组)、中剂量组(M组)和高剂量组(H组)。S组仅切除T9全椎板,不损伤脊髓;其余各组应用Allen,s重物坠落法并加以改良制备大鼠急性脊髓损伤模型。各组药物干预15min(T15)和60min(T60)时取动脉血大鼠1.5mL测血清S100β蛋白含量,各组药物干预60min后立即断头处死大鼠取脊髓组织测脊髓含水量及脊髓组织总钙含量。结果与S组比较,其余五组在T15和T60时血清S100β蛋白和脊髓组织总钙含量均明显升高(P均<0.01),I组、F组、L组和H组脊髓含水量均增多(P均<0.05);I组与F组间各时间点血清S100β蛋白含量、脊髓组织含水量及总钙含量差异均无统计学意义(P>0.05);与I组和F组分别比较,在T15和T60时L组、M组和H组血清S100β蛋白和脊髓组织总钙含量均显著降低(P均<0.01),M组脊髓含水量低于I组和F组(P<0.05);与L组比较,在T15和T60时M组和H组血清S100β蛋白和脊髓组织总钙含量均降低(P均<0.01);与M组比较,在T15和T60时H组血清S100β蛋白和脊髓组织总钙含量均升高(P均<0.01),脊髓含水量增多(P<0.05);与T15时比较,L组、M组和H组在T60时血清S100β蛋白含量均明显降低(P均<0.01)。结论丙泊酚34.92mg·(kg·h)-1持续泵注60min对急性脊髓损伤后早期有保护作用。
- 王春生孟尽海吴燕刘斐马万
- 关键词：丙泊酚脊髓损伤血清S100Β蛋白
- 丙泊酚对急性脑损伤大鼠早期S100β蛋白和脑组织总钙含量及含水量的影响被引量：7
- 2014年
- 目的观察丙泊酚对大鼠急性脑损伤早期血清S100β蛋白和脑组织总钙含量及含水量的影响。方法健康雄性SD大鼠48只采用随机数字表法分为六组:假手术组(S组)、脑损伤组(I组)、脂肪乳组(F组)、丙泊酚17.46mg·kg-1·h-1组(L组)、丙泊酚34.92mg·kg-1·h-1组(M组)和丙泊酚69.84mg·kg-1·h-1组(H组),每组8只。采用改进Feeney法自由落体脑损伤装置,制备大鼠脑损伤模型。在脑损伤模型制备成功后15min(T1)和60min(T2)时取动脉血各1.5ml测血清S100β蛋白含量,脑损伤60min时断头取脑测脑组织总钙含量及脑含水量。结果与T1时比较,T2时L组、M组和H组血清S100β蛋白含量明显减少(P<0.05)。与S组比较,T1、T2时I组、F组、L组、M组和H组血清S100β蛋白含量明显增加(P<0.05),I组、F组、L组、M组和H组脑组织总钙含量以及I组、F组和H组脑含水量明显增加(P<0.05)。与I组和F组比较,T1、T2时L组、M组和H组血清S100β蛋白含量明显减少(P<0.05),且L组、M组和H组脑组织总钙含量以及L组脑含水量明显减少(P<0.05)。与L组比较,T1时H组血清S100β蛋白含量明显增加,T2时M组和H组血清S100β蛋白含量明显减少(P<0.05);M组和H组脑组织总钙含量明显减少,H组脑含水量明显增加(P<0.05)。与M组比较,T1、T2时H组血清S100β蛋白含量明显增加(P<0.05);H组脑组织总钙含量、脑含水量明显增加(P<0.05)。结论急性脑损伤早期应用丙泊酚注射液能降低血清S100β蛋白和脑组织总钙含量及减少脑组织含水量,且丙泊酚34.92mg·kg-1·h-1的作用较为显著。
- 王春生孟尽海吴燕刘斐
- 关键词：丙泊酚脑损伤S100Β蛋白
- 丙泊酚对创伤性脑损伤大鼠神经细胞自噬的影响被引量：1
- 2020年
- 目的探讨丙泊酚对创伤性脑损伤(TBI)大鼠神经细胞自噬的影响。方法选取雄性健康SPF级SD大鼠72只,依据随机数字表法分为3组:假手术组、TBI模型对照组、TBI+丙泊酚组,每组各24只,再分为3个亚组,每亚组8只。采用自由落体砝码撞击SD大鼠,建立TBI模型,并观察脑组织形态学,检测脑组织细胞凋亡并计算皮质神经元细胞凋亡率,检测自噬相关蛋白(Beclin-1蛋白、P62蛋白及微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ/Ⅰ(LC3-II/Ⅰ)蛋白比值)水平。结果TBI模型对照组可见其损伤脑组织区结构混乱无序、神经胶质疤痕明显,疤痕组织显著萎缩且可见软化灶;TBI+丙泊酚组损伤脑组织区有神经胶质细胞填充,其间疤痕组织范围及软化灶区域面积与TBI模型对照组对比均较小。假手术组、TBI模型对照组、TBI+丙泊酚组皮质神经元细胞凋亡率分别为(9.78±0.69)%、(67.39±2.57)%、(30.73±2.06)%,假手术组显著低于TBI模型对照组及TBI+丙泊酚组,TBI+丙泊酚组显著低于TBI模型对照组(P<0.05)。TBI+丙泊酚组Beclin-1蛋白及LC3-Ⅱ/Ⅰ蛋白比值均显著低于TBI模型对照组,P62蛋白表达高于TBI模型对照组(P<0.05)。结论丙泊酚对TBI大鼠神经细胞具有一定程度的保护作用,其机制包括对受损神经细胞凋亡及自噬的抑制。
- 王春生沈燕
- 关键词：丙泊酚创伤性脑损伤自噬细胞凋亡
- 羟乙基淀粉对全麻下行结直肠癌手术患者凝血功能的影响被引量：3
- 2013年
- 目的研究静脉输注不同剂量羟乙基淀粉(130/0.4)对结直肠癌手术患者凝血功能的影响。方法结直肠癌手术患者60例,按照静脉输注不同剂量羟乙基淀粉随机分为A、B、C三组,每组20例,分别静脉输注羟乙基淀粉10、15和20mL·kg-1。观察并记录扩容前(T0)、扩容结束后30min(T1)、扩容后3.5h(T2)的凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)、血红蛋白、血小板计数(PLT)等指标。结果组内比较:与T0相比,三组PT值在T1时均有不同程度延长(P<0.05),C组在T2时PT值仍高于T0时(P<0.05);A、B组中APTT值在T1、T2时与T0时比较明显延长(P<0.05),C组在T1、T2时与T0比较差异无统计学意义;三组FIB值在T1、T2时均有不同程度减少(P<0.05);三组血红蛋白浓度在T1时均降低(P<0.05),C组在T2时血红蛋白浓度仍高于T0时(P<0.05);三组血小板计数在T1时均降低(P<0.05);A、B组在T2时较T0时明显降低(P<0.05);C组在T2时与T0比较差异无统计学意义。不同指标T1与T2比较及各组组间比较差异均无统计学意义。结论对于结直肠癌手术患者,术中输入羟乙基淀粉会较小程度改变凝血功能参数,但均在正常范围之内,不同剂量的羟乙基淀粉对凝血功能无明显影响。
- 刘斐孟尽海吴燕王春生姚杰
- 关键词：羟乙基淀粉凝血功能
