王敬晗
- 作品数:18 被引量:70H指数:4
- 供职机构:第二军医大学东方肝胆外科医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金首都市民健康培育项目上海市医学重点学科(专科)建设项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 表达新型干扰素的CIK细胞对结肠癌的治疗作用被引量:1
- 2011年
- 目的探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)作为新型重组干扰素mix基因的载体治疗结肠癌的可行性。方法制备携带mix基因的腺病毒pDC359.mix+F35;分离培养CIK细胞;腺病毒Ad5-EGFP、Adll-EGFP和Ad35.EGFP以感染复数(MOI)=100时感染CIK细胞24、48h后观察感染效率;腺病毒pDC3590mix+F35以MOI=0、1、10、100、1000感染CIK细胞2、4、6、8d,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清中干扰素mix表达量;磺酰罗丹明B(SRB)显色法检测浓度为0.001、0.01、0.1、1、10ug/L的干扰素mix和干扰素a-2b对结肠癌细胞株HT29和SW480的抑制作用;乳酸脱氢酶释放法(LDH)检测效靶比为3:1、10:1的CIK和CIK—mix对HT29和SW480的杀伤作用。结果腺病毒pDC359-mix+F35成功制备,MOI=100,感染48h后对CIK细胞的感染效率可达80%以上;当MOI=100时,各时间段干扰素mix的表达量均达到(8.96±2.10)ng以上;当浓度为10ug/L,干扰素mix对结肠癌细胞株抑制率分别为72.8%和70.1%,而干扰素OL-2b分别为30.4%和28.6%;腺病毒pDC359-mix+F35感染CIK后,CIK—mix对HT29和SW480的杀伤作用均比CIK增强了20%以上。结论表达干扰素mix的CIK细胞体外能够发挥联合的抗肿瘤效应。
- 陈艳刘辉于丽付玉华王敬晗钱其军
- 关键词:CIK细胞腺病毒结肠癌
- 肝癌患者脂肪干细胞重编程为诱导多潜能干细胞被引量:2
- 2011年
- 目的重编程肝癌患者来源的脂肪干细胞为诱导多潜能干细胞。方法包装携带Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc基因的反转录病毒,将病毒感染脂肪干细胞并培养诱导后的细胞,采用碱性磷酸酶染色、定量PCR和原位免疫荧光实验鉴定诱导的克隆样细胞。结果诱导的克隆样细胞表达碱性磷酸酶,定量PCR证实克隆样细胞表达胚胎干细胞多能性基因,免疫荧光实验证实其表达Oct4和Sox2。结论肝癌患者来源的脂肪干细胞可高效重编程为诱导多潜能干细胞,且脂肪干细胞可作为培养诱导多潜能干细胞的滋养细胞,为提高成体细胞重编程效率和建立基于诱导多潜能干细胞的肝癌模型研究提供了平台。
- 付玉华范丽丁丽陈艳周秀梅王欢刘韬王敬晗李琳芳钱其军
- 关键词:肝肿瘤脂肪干细胞重编程反转录病毒
- 手术部分肝切除与射频消融治疗多发肝细胞癌预后比较被引量:8
- 2015年
- 目的比较部分肝切除术及射频消融术(radiofrequency ablation,RFA)对符合米兰标准的多发肝癌疗效。方法回顾性分析2007年6月-2013年12在我科接受治疗的140例肝功能良好、多发肝癌(符合米兰标准)的患者资料,其中接受部分肝切除术78例,接受RFA治疗62例,分别对术前主要检查结果、围术期并发症发生率、术后第3天肝功能指标及生存结果进行比较。结果手术组术后贫血、腹水及低蛋白血症的发生率总体上高于RFA组,术后第3天谷丙转氨酶及谷草转氨酶水平显著高于RFA组;1、2、3年生存率手术组分别为80.8%、60.3%、48.7%,RFA组分别为83.9%、48.0%、30.6%。手术组生存率优于RFA组(P=0.037)。1、2、3年无瘤生存率手术组分别为74.4%、47.4%、37.2%,RFA组分别为71.0%、38.7%、21.0%。手术组优于RFA组(P=0.007)。结论符合米兰标准、肝功能Child-Pugh A级的多发肝癌患者仍可能从外科切除中获益。
- 邱宝安赵文超夏念信谭勇安阳祝建勇杨英祥刘鹏吴印涛王敬晗
- 关键词:米兰标准
- 肝激酶B1抑制肿瘤机制的新进展被引量:1
- 2016年
- 1998年,在研究黏膜息肉黑斑综合征(PJS)的过程中人们首次鉴定出抑癌基因肝激酶B1(LKB1)也被称为丝氨酸、苏氨酸激酶11(STK11)。从那以后,人们针对LKB1进行了大量的研究。有关LKB1功能的研究进展提示:LKB1在调节能量代谢、细胞生长与增殖、凋亡、分化、细胞极性等方面发挥重要作用。我们将对过去有关LKB1的研究做一下简单的总结。
- 胡舒阳王敬晗姜小清
- 关键词:肿瘤分子机制
- Bismuth-Corlette Ⅲ、Ⅳ型肝门部胆管癌外科治疗现状与展望被引量:2
- 2017年
- 肝门部胆管癌(Hilarcholangiocarcinoma,HCCA)是指肿瘤位于胆囊管口以上、左、右二级肝管水平以下的肝门区胆管原发胆道恶性肿瘤。其易侵犯周围组织、血管、神经,易发生淋巴转移,早期临床症状不典型,确诊时往往已处于进展期阶段,如果不进行任何治疗,预后极差。以往认为,可行根治性手术切除的HCCA宜行手术切除术,而无法达到根治性手术切除的局部晚期HCCA,可以考虑行肝移植术,但既往临床实践表明其远期生存率尚不乐观。
- 伍睿李斌王敬晗姜小清
- 关键词:肝切除术肝移植术
- 首株来源于转移灶的人胆囊癌细胞系EH-GB1的建立及鉴定
- 目的从人胆囊癌转移灶取材,建立转移性胆囊癌细胞系,鉴定并研究其生物学特性。方法将胆囊癌转移灶标本分离成单细胞悬液,用含15%胎牛血清的DMEM培养液进行原代和传代培养,电镜下观察细胞的形态,绘制细胞的生长曲线。SCID小...
- 李林芳王敬晗苏长青刘辰姜小清钱其军
- 关键词:胆囊癌细胞系移植瘤肿瘤标志物
- 文献传递
- 针对Oct-4和Survivin基因的双靶向shRNA腺病毒载体的构建及其对肝癌细胞的抑制作用被引量:3
- 2012年
- 转录因子Oct-4和Survivin是细胞增殖的关键调控因子,构建针对Oct-4和Survivin基因的双靶向shRNA腺病毒载体Ad5-Dual-shRNA,并研究其对肝癌细胞及移植瘤的生长抑制作用。合成Oct-4和Survivin基因的shRNA序列,插入腺病毒穿梭载体pDC312,含有shRNA的穿梭载体与腺病毒骨架载体pBHGloxdeltaE13Cre共转染HEK293细胞,经Cre/LoxP位点特异性重组获得重组腺病毒Ad5-Dual-shRNA;腺病毒Ad5-Dual-shRNA感染肝癌细胞系EHBH-H1,经Western blotting检测Oct-4和Survivin基因的表达情况,用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐染色法(MTT实验)和裸鼠荷瘤实验检测对肿瘤细胞生长的影响。研究结果显示,双靶向重组腺病毒Ad5-Dual-shRNA感染肝癌细胞系EHBH-H1能够有效沉默Oct-4与Survivin基因的表达,并且在MTT实验和裸鼠荷瘤试验中都显示出较单一靶向的shRNA腺病毒载体Ad5-Surv-shRNA、Ad5-Oct4-shRNA具有更为明显的肿瘤细胞生长抑制作用。实验结果表明,特异性双靶向shRNA腺病毒载体Ad5-Dual-shRNA是一种更为高效的靶向肿瘤基因治疗载体。
- 王端明王敬晗李林芳陈静波苏长青
- 关键词:OCT-4SURVIVINSHRNA肝癌腺病毒
- 化疗联合槐耳颗粒对原发性肝癌术后复发/转移患者预后影响研究被引量:20
- 2017年
- 目的观察FOLFOX4(奥沙利铂+亚叶酸钙+氟脲嘧啶)方案化疗联合槐耳颗粒对原发性肝癌术后复发/转移患者预后的影响。方法将56例原发性肝癌术后复发/转移的患者随机分为化疗组与联合组,每组各28例,化疗组按照FOLFOX4方案进行化疗,联合组在化疗组基础上给予槐耳颗粒辅助治疗。比较两组患者有效率、疾病稳定率、甲胎蛋白水平、临床症状与生活质量的改善情况。结果治疗2个周期后,化疗组与联合组的有效率分别为39.2%(11/28)与42.9%(12/28),疾病稳定率分别为75.0%(21/28)与82.1%(23/28),两组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。化疗组与联合组的甲胎蛋白降低率分别为39.2%(11/28)与50.0%(14/28),差异有统计学意义(P<0.05);稳定率分别为42.9%(12/28)与35.8%(10/28),差异无统计学意义(P>0.05);升高率分别为17.9%(5/28)与14.2%(4/28),差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,化疗组患者的肝区疼痛发生率低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05),乏力、消瘦、食欲减退发生率与治疗前比较,差异无统计学意义(P>0.05);联合组患者的肝区疼痛、乏力、消瘦、食欲减退发生率均低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,化疗组与联合组的生活质量降低率分别为25.0%(7/28)与10.7%(3/28),差异有统计学意义(P<0.05);稳定率分别为46.4%(13/28)与35.8%(10/28),差异无统计学意义(P>0.05);提高率分别为28.6%(8/28)与53.5%(15/28),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 FOLFOX4方案化疗联合槐耳颗粒治疗原发性肝癌术后复发/转移患者安全有效,可降低甲胎蛋白水平与不良反应发生率,改善预后。
- 夏念信邱宝安王敬晗刘鹏祝建勇赵文超安阳
- 关键词:原发性肝癌FOLFOX4方案槐耳颗粒甲胎蛋白
- 胆管癌之个性化医疗的分类和挑战
- 目的 胆管癌预后不良,分为肝内(iCCA)和肝外(eCCA)型,唯一可以治愈的治疗方法是手术切除。然而,目前只有大约三分之一的患者有机会接受根治性手术,且手术后复发率很高。目前诊断和手术方法的差异是当前分类为iCCA(肝...
- 刘辰敖建阳王敬晗
- 关键词:胆管癌临床分型
- 首株来源于转移灶的人胆囊癌细胞系EH-GB1的建立及鉴定
- 2010年
- 目的建立转移性胆囊癌细胞系,鉴定并研究其生物学特性。方法从人胆囊癌转移灶取材,将标本分离成单细胞悬液,用含15%胎牛血清的DMEM培养液进行原代和传代培养,培养成功后命名为EH-GB1细胞。电镜下观察EH—GB1细胞的形态,绘制细胞生长曲线。SCID小鼠皮下接种EH-GB1细胞,观察EH—GB1细胞的成瘤能力。采用免疫组化法,检测小鼠移植瘤组织中CA19-9的表达。分别用携带绿色荧光蛋白(GFP)和红色荧光蛋白报告基因(Red2)的慢病毒感染EH-GB1细胞,观察EH—GB1细胞表达GFP和Red2的情况。结果EH—GB1细胞体外连续传代20代以上,形态上具有典型的恶性上皮细胞特征,倍增时间约为24h。SCID小鼠皮下接种EH—GB1细胞后的成瘤率为100%。移植瘤细胞中CA19—9呈强阳性表达。EH—GB1细胞感染携带GFP或Red2基因的慢病毒后,可稳定地表达GFP和Red2。结论EH—GB1细胞有望成为首株来源于转移灶的稳定的人胆囊癌细胞系,转染并持续表达GFP和Red2的EH-GB1细胞是胆囊癌临床与基础研究中的理想实验模型。
- 李林芳胡还章刘辰王敬晗吴红平金华君苏长青姜小清刘佳顾坚忠吴孟超钱其军
- 关键词:胆囊肿瘤细胞系小鼠