公共文化服务平台

王建科: 作品数：12 被引量：39H指数：4; 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>; 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家科技基础条件平台建设计划甘肃省科技重大专项计划更多>>; 相关领域：农业科学更多>>

合作作者

羊痘病毒复制过程中脱壳机理的研究: 张强赵志荀颜新敏吴国华王建科马维民朱海霞朱彩珠李健于少雄王曼; 该成果包括以下几个方面的内容： 1.初步确定病毒进入宿主细胞后开始复制的时间。接种不同的羊痘病毒后，通过免疫荧光技术分析病毒感染不同时间点的的复制水平，初步确定初病毒进入宿主细胞后开始复制的时间。 2．完成羊痘病毒8个R...; 关键词：; 关键词：羊痘病毒药物设计

绵羊CD58基因的克隆与原核表达被引量：4: 2010年; 通过对猪、绵羊CD58mRNA序列比对,设计出绵羊CD58的特异性引物,应用反转录PCR技术从绵羊淋巴细胞mRNA中扩增出绵羊CD58基因,将该基因克隆到原核表达载体pGEX4-1中进行原核表达.结果表明:克隆出的绵羊CD58cDNA长807bp,其中包含了开放式阅读框;该基因在大肠杆菌中进行表达,SDS-PAGE电泳在53ku处能观察到特异表达的融合蛋白,产物通过Western-blot检测证实,可以被CD58单克隆抗体识别.; 芦晓立颜新敏吴国华叶奕优李健朱海霞王建科赵志荀崔力凡朱彩珠张强; 关键词：绵羊基因克隆原核表达

含O型FMDVP1-2A、3C基因和EGFP基因表达盒的构建被引量：2: 2009年; 采用RT-PCR方法分别扩增口蹄疫病毒O/China99毒株的P1-2A和3C基因,将P1-2A基因连接到pUC119载体,3C基因连接到pMD18-T载体,分别得到重组载体pUC119-P1-2A和pMD18-T-3C;将重组载体pUC119-P1-2A用HindⅢ、BamHⅠ酶切,重组载体pMD18-T-3C用BamHⅠ、NheⅠ酶切;利用酶切所得到的基因片段P1-2A、3C有共同的BamHⅠ酶切位点,实现基因P1-2A、3C的连接,构建重组载体pMD18-T-P1-2A-3C.将基因P1-2A-3C与启动EGFP表达的双向串连痘苗病毒启动子P7.5相连,构建载体p-EGFP-N1-P7.5-P1-2A-3C,并进行PCR扩增、酶切鉴定及序列测定.结果表明:试验成功构建了一侧启动表达P1-2A-3C基因,一侧启动表达标记基因EGFP的表达盒p-EGFP-N1-P7.5-P1-2A-3C.; 王建科吴国华叶奕优颜新敏朱海霞李健朱彩珠张强王雯慧; 关键词：FMDV

含O型口蹄疫病毒P1-2A-3C基因的山羊痘病毒弱毒株的构建与表达: 口蹄疫(foot and mouth disease，FMD)是由口蹄疫病毒引起的偶蹄动物的一种急性热性高度接触性传染病;羊痘(capripox，CP)是由绵羊痘病毒和山羊痘病毒引起的绵羊和山羊的一种急性、热性、接触性传...; 王建科; 关键词：口蹄疫病毒山羊痘病毒痘苗病毒; 文献传递

表达小反刍兽疫病毒H基因的山羊痘病毒通用转移载体的构建及鉴定: 2009年; [目的]研制小反刍兽疫羊痘活载体疫苗。[方法]利用PCR技术扩增小反刍兽疫病毒H基因,克隆到pGEM-Teasy载体,NheⅠ和HindⅢ双酶切重组质粒,将目的片段插入到真核表达载体pEGFP-N1-P7.5中,得到重组载体pEGFP-N1-P7.5-H,重组载体HindⅢ、NheⅠ双酶切片段EGFP-P7.5-H平末端连接到KpnⅠ酶切后的载体pUC119-TK中,得到通用转移载体pUC119-TK-EGFP-P7.5-H。[结果]经酶切鉴定及PCR扩增检测,表明构建栽体正确。pUC119-TK-EGFP-P7.5-H转染羊痘病毒感染的BHK21细胞,48 h后报告基因表达。[结论]该研究为研制小反刍兽疫基因工程活载体疫苗奠定基础。; 邵长春张强吴国华颜新敏李健王建科卢晓丽赵志荀崔丽凡高世功; 关键词：羊痘病毒 H基因

猪瘟病毒引起免疫抑制的研究被引量：6: 2009年; 综述了猪瘟病毒引起的机体免疫抑制因素主要包括损伤免疫器官、诱导淋巴细胞凋亡、引起囊膜糖蛋白E2变异、抑制I型干扰素产生、诱发白细胞减少和引起树突状细胞无应答。从而干扰抗原的递呈和抑制免疫抗体的产生,引起机体免疫抑制。; 张云德王建科张强; 关键词：免疫应答猪瘟病毒

羊痘病毒P32蛋白的研究进展被引量：16: 2009年; P32蛋白是所有羊痘病毒具有的结构蛋白之一,含有重要的免疫原性决定簇。P32蛋白既是致病的关键因素,也是激发机体产生抗体并产生保护性免疫的主要成分。作者就羊痘病毒P32蛋白的基因组结构、抗原表位及P32蛋白应用于羊痘病毒诊断和免疫方面的研究进展作一综述。; 赵志荀王建科张强; 关键词：羊痘病毒免疫

Construction and Identification of a Goat Pox Virus Transfer Vector to Express Peste des Petits Ruminants H gene被引量：3: 2009年; [Objective] This study was to develop a live vector vaccine of goat pox virus of Peste des petits ruminants(PPR). [Method] Using PCR amplification technique, PPR H gene was obtained, then ligated into pGEM-T easy vector; the recombinants were digested by Nhe Ⅰ and Hind Ⅲ, and ligated into pEGFP-N1-P7.5, yielding the recombinant vector pEGFP-N1-P7.5-H; next the expression cassette EGFP-N1-P7.5-H was first released from recombinant vector pEGFP-N1-P7.5-H by double digestion of Hind Ⅲ and Nhe Ⅰ and ligated into pUC119-TK that was digested by Kpn Ⅰ, yielding the transfer vector pUC119-TK-EGFP-P7.5-H. [Result] Identification and double enzyme digestion showed that the transfer vector pUC119-TK-EGFP-P7.5-H was correctly constructed. From the transfer vector transfected BHK-21 cells which infected GTPV AV41, specific fluorescence was observed at 48th h of transfection. [Conclusion] The construction of goat poxvirus live vector laid a foundation for the live vector vaccine of PPR vaccine.; 邵长春张强吴国华颜新敏李健王建科卢晓丽赵志荀崔丽凡高世功

口蹄疫病毒非结构蛋白3A单克隆抗体的制备和鉴定被引量：6: 2010年; 以原核表达并纯化的口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白3A免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,用间接ELISA方法筛选杂交瘤细胞,有限稀释法进行亚克隆,获得3株能稳定分泌抗3A蛋白单抗的杂交瘤细胞,分别命名为3H2、4B1、7F5,并对这3株单抗进行了生物学鉴定。结果显示,单抗3H2和4B1为IgG2a亚型,7F5为IgG2b亚型。单抗7F5针对的表位与3H2和4B1两株单抗的表位不一致;这3株单抗均能够与FMDV特异性结合,且单抗4B1与所有3A相关蛋白均反应。稳定性鉴定结果表明,获得的3株杂交瘤细胞均能稳定分泌单克隆抗体。研究结果为进一步探索3A蛋白的结构和功能以及建立诊断方法奠定了基础。; 吴磊田美娜卢曾军付元芳孙普刘在新王建科; 关键词：口蹄疫病毒单克隆抗体

表达O型口蹄疫病毒P1-2A-3C基因的山羊痘病毒弱毒株的构建及筛选被引量：1: 2010年; 为构建和筛选表达O型口蹄疫病毒P1-2A-3C基因的山羊痘病毒弱毒株,用已构建的口蹄疫病毒O/Chi-na99毒株的EGFP-P7.5-P1-2A-3C基因整体通过平末端连接到KpnⅠ酶切后的线性载体pUC119-TK中,得到重组载体pUC119-TK-EGFP-P7.5-P1-2A-3C。重组载体通过缺失的TK基因与羊痘病毒弱毒株在BHK-21细胞中同源重组,用EGFP作为标记筛选出重组毒株,并进行PCR鉴定、抗原捕获ELISA试验检测及Western blot分析。结果显示该重组弱毒株能在1~10代BHK-21细胞中稳定传代,扩增出约3000bp片段,并经测序确证为基因P1-2A-3C;抗原捕获ELISA试验检测均为阳性;Western blot分析表明转移载体pUC119-TK-EGFP-P7.5-P1-2A-3C在感染的GTPV AV41BHK-21细胞中表达的蛋白可被O型FMDV高免血清特异性识别,并具有反应原性。这些结果表明获得了表达O型口蹄疫病毒P1-2A-3C基因的重组山羊痘弱毒株。; 王建科张云德张强吴国华颜新敏朱海霞李健邵长春朱彩珠吴磊; 关键词：口蹄疫病毒羊痘病毒

王建科

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

王建科

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈