王平
- 作品数:8 被引量:14H指数:3
- 供职机构:武汉生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学更多>>
- 检测狂犬病疫苗抗原含量的竞争ELISA的建立及初步应用被引量:4
- 2007年
- 为满足狂犬病疫苗生产质量控制的需要,建立了竞争ELISA检测法,通过标准曲线的确定来计算病毒抗原的相对含量,并与ELISA间接法和双抗体夹心法结果进行比较。该方法方便准确,可对培养中的病毒抗原相对含量进行全程监测,是一种有效的辅助检测手段。
- 周志军孙文施金荣朱华松陈雪婷王平
- 关键词:竞争ELISA狂犬病毒抗原含量
- 乙型脑炎病毒SA14-14-2毒株生物学和免疫学特性
- 流行性乙型脑炎又称日本脑炎(Japanese Encephalitis Virus,JEV),JEV(JEV)以蚊为传播媒介,主要引起中枢神经系统损害的一种严重的人畜共患传染病。预防和控制该病尤为重要。目前尚无治疗JE的...
- 施金荣王平周志军余模松
- 文献传递
- 检测狂犬病疫苗病毒抗原含量的竞争ELISA的建立及初步应用
- 目前,国内狂犬病疫苗生产已成规模,但对疫苗的检定仍然依赖毒力和效力实验。病毒毒力和效力滴定测定法耗时长,费用高,操作烦琐,影响因素多,重复性较差,对生产的实时动态监控和工艺的优化改进不利。疫苗的质量好坏,与
- 周志军孙文张波朱华松陈雪婷王平
- 文献传递
- 抗牛血清IgG单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及鉴定
- 研究背景现行的疫苗纯化工艺尚不能将细胞培养液中的牛血清完全清除,牛血清中球蛋白含量低于白蛋白,但其吸附性强于后者,洗涤后疫苗中残余球蛋白含量与白蛋白含量接近。牛血清球蛋白作为过敏原其残存不容忽视。目的成功研制抗牛血清Ig...
- 王平周志军施金荣朱华松余模松
- 文献传递
- ELISA法检测白喉抗体的研究和初步应用被引量:3
- 2008年
- 以白喉类毒素为包被抗原,经方阵滴定确定其包被浓度。通过对百白破三联疫苗免疫的小鼠血清中自喉抗体的小鼠-Vero细胞法效价与按几何平均滴度计算的ELISA效价进行比较,验证ELISA法检测白喉抗体的可行性。该试剂用人免疫球蛋白白喉抗体国家标准品检测的敏感度为0.05EU/ml,检测864份健康人血清,阳性率为50%,检测89份2~14岁儿童血清,阳性率为91%,与免疫规划的实际情况相符,可用于疫苗免疫效果的观察。
- 周志军高菲刘亚莉王平
- 关键词:白喉类毒素抗体几何平均滴度ELISA
- 抗牛血清IgG单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及鉴定被引量:3
- 2011年
- 用牛血清IgG免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,用含山羊血清的培养基培养细胞,上清用间接ELISA法筛选。获得4株能稳定分泌抗牛血清IgG的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为1G5、2A8、3F5、4C5。其中2A8为IgG2a,其余3株为IgG1;腹水单抗的ELISA滴度均超过10-5;除3F5株单抗与山羊血清有交叉反应外,1G5、2A8、4C5株与人、马、猪、羊、兔、豚鼠等血清均不发生交叉反应;4株单抗与制备病毒性疫苗的基质液呈阴性反应;4株单抗识别分子量为160kD的牛血清IgG的两个不同抗原表位;4株单抗相对亲和力大小依次为4C5>2A8>1G5>3F5,相对敏感度依次为2A8>4C5>3F5>1G5;4株杂交瘤细胞株的染色体计数均大于90条,连续培养三个月以及冷冻保存半年后复苏,细胞生长良好。使用这些单抗建立的双抗体夹心法检测生物制品中的残留牛血清IgG。
- 王平周志军施金荣朱华松余模松
- 关键词:单克隆抗体酶联免疫吸附试验
- 一种辅助SNT测定人特异性免疫球蛋白抗体效价的ELISA方法的建立被引量:5
- 2007年
- 利用已建立的抗破伤风类毒素和抗狂犬病病毒的抗体半定量检测ELISA试剂,建立检测人特异性免疫球蛋白半成品和成品效价的可靠方法,依靠统计分析技术,推算出抗体ELISA效价,发现其与小鼠血清中和试验(SNT)检测的抗体效价的相关性和一致性极好,可用于ELISA对SNT的稀释范围的确定,提高其准确性,还可部分替代SNT对生产过程进行监控,缩短生产时间。
- 余健吴笛周志军王平陈雪婷张智
- 关键词:ELISA
- 乙型脑炎病毒SA14-14-2株和P3株单克隆抗体的制备及应用
- 2012年
- 目的制备乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)SA14-14-2株(简称SA)和P3株单克隆抗体,并进行初步应用。方法分别用JEV SA株减毒活疫苗和P3抗原免疫BALB/c小鼠,交叉加强免疫1次,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞,选择人血清白蛋白(HSA)抗体阴性、JEV抗体阳性的克隆进行2次亚克隆,制备腹水并纯化,对单抗及杂交瘤细胞进行鉴定。用SA单抗建立捕获ELISA法检测JEV抗体,竞争抑制ELISA法和双抗体夹心ELISA法检测JEV抗原含量。结果经3次融合,共获得4株分泌抗JEV SA株单抗和3株分泌抗JEV P3株单抗的杂交瘤细胞株,未获得SA株和P3株共同决定簇的单抗;7株单抗均为IgG1型,特异性良好,但均无中和活性;SA株单抗的相对亲和力大小为:3D1>5E3>6H3>4F12,均能识别SA相同的抗原表位;P3株单抗的相对亲和力大小为:1C7>5H12>3C4,均能识别P3相同的抗原表位;7株杂交瘤细胞于液氮中放置6个月及体外连续培养3个月后,制备的腹水抗体效价保持稳定;用5E3株SA单抗建立了检测JEV抗体的捕获ELISA法及检测JEV抗原的竞争抑制ELISA法和双抗体夹心ELISA法。结论已制备了JEV SA株和P3株单克隆抗体;以SA株单抗建立的捕获ELISA法检测JEV抗体比间接ELISA法更简便,且敏感性更高,对于抗原浓度高的样品,双抗体夹心ELISA法检测比竞争抑制ELISA法更有优势。
- 周志军施金荣朱华松王平余模松
- 关键词:乙型脑炎病毒单克隆抗体酶联免疫吸附测定