王先华
- 作品数：8 被引量：27H指数：4
- 供职机构：兰州军区兰州总医院更多>>
- 发文基金：甘肃省自然科学基金国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生理学生物学更多>>
- 柱切换技术-高效液相色谱法快速检测大鼠血浆中的普萘洛尔对映体被引量：12
- 2011年
- 建立了快速检测大鼠血浆中普萘洛尔对映体浓度的柱切换-高效液相色谱法。将自制限进填料柱作为预处理柱,通过直接进样方式,使普萘洛尔对映体在预处理柱上保留,同时除去血浆中的蛋白质等大分子;再通过柱切换技术,使普萘洛尔对映体在键合型纤维素-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)(Chiralcel OD-RH)分析柱上得到手性拆分。通过条件优化,确定切换前预处理流动相为硼酸盐缓冲液(pH 8.5)-甲醇(95∶5,v/v),流速为1.0mL/min;切换后分析流动相为异丙醇-乙醇-0.2 mmo l/L硼酸盐缓冲液(pH 8.5)(30∶30∶40,v/v/v),流速为0.8mL/min;切换时间为3 min;柱温为25℃;检测波长为293 nm。普萘洛尔两对映体在25～500 mg/L的质量浓度范围内具有良好的线性关系(r=0.999 5),3个加标水平(50、100、250 mg/L)的平均回收率为97.89%～101.56%,日内和日间精密度均小于5%。该方法简便、快速、灵敏、准确,适于血浆样本中手性药物的药代动力学研究。
- 武晓玉王荣谢华王剑锋贾正平张强王先华
- 关键词：柱切换高效液相色谱大鼠血浆药代动力学
- 新型内表面反相限进填料的制备与评价被引量：7
- 2012年
- 通过在硅烷化硅胶内表面和外表面分别键合己胺和聚乙烯醇,制备了能够在线直接进样分析生物样品的新型内表面反相限进填料。采用元素分析、电镜观察对该限进填料的结构进行了表征。以普萘洛尔、阿替洛尔、苯巴比妥、卡马西平作溶质探针,并以Merck公司生产的限进填料柱作参比,对合成的限进填料的色谱性能进行了研究。研究结果表明,所制备的限进填料有较好的蛋白质排阻能力、富集能力和反相色谱性能,能同时实现排阻生物大分子杂质和富集小分子被分析物的功能,可作为在线、快速直接进样检测分析生物样品的预处理柱,适用于普萘洛尔血浆的直接进样分析。
- 武晓玉王荣谢华王剑锋杨沛贾正平张强王先华
- 关键词：高效液相色谱法普萘洛尔血浆
- 多氯联苯对大鼠间充质干细胞c-myc和-βcatenin表达的影响
- 2012年
- 目的探讨多氯联苯(polychlorinated biphenyls,PCBs)对大鼠间充质干细胞((mesenchy-mal cells,MSCs)功能的影响,为深入研究环境激素对MSCs功能的影响提供依据。方法实验分为对照组、低剂量组(10-7mol/L PCB126)和高剂量组(10-6mol/L PCB126)共3个组。PCB126作用MSCs不同时间后,采用MTT方法检测细胞增殖率,免疫荧光化学方法评价细胞c-myc和-βcatenin的表达,RT-PCR分析c-myc和-βcatenin mRNA的表达,Western blot分析细胞c-myc和-βcatenin蛋白的表达。结果随着PCB126作用时间的延长,细胞增殖率显著增加(P<0.01)。低剂量组12 h时,c-myc和-βcatenin的阳性率分别为50.0%、51.3%,24 h的阳性率分别为67.8%、73.3%;高剂量组12 h时,c-myc和-βcatenin的阳性率分别为54.6%5、1.8%,24 h的阳性率分别为73.0%、74.9%,与对照组(10.0%、16.7%)相比差异有显著性(P<0.01);2个剂量组c-myc和-βcateninmRNA表达丰度在多数时间明显高于对照组(P<0.01);高剂量组24 h时,-βcatenin蛋白表达显著上调(P<0.01);在相同时间,高剂量组-βcatenin蛋白表达水平高于低剂量组(P<0.01)。结论 PCB126影响MSCs生物学功能。
- 杨银书罗芳赵红斌王剑锋王先华周焕发李强
- 关键词：C-MYC
- 介入放射环境影响人T-Sub、CD_(25)、CD_(16)的观察与防护被引量：1
- 2002年
- 目的：现察介入放射诊疗人员防护前后的 Ｔ细胞亚群、ＩＬ－２Ｒ（ＣＤ２５）、ＮＫ细胞（ＣＤ１６）的影响．方法：左３２名放射科人员中选择从事介入放射诊疗１０年以上，慢性疲劳症状突出者１０人为现察对象；使用功能性食品抗疲Ｉ号胶囊防护，设防护前组（ＢＧ）、防护后组 （ＡＧ）、对照组（ＣＧ），使用流式细胞仪测定防护前后的 Ｔ细胞亚群、ＣＤ２５、ＣＤ１６。结果：ＡＧ与ＢＧ相比，总Ｔ细胞ＣＤ３上升，亚群中的ＣＤ８呈上升，ＣＤ４略有下降，ＣＤ４／ＣＤ８下降，ＣＤ２５和ＣＤ１６上升（Ｐ＜０.０５，Ｐ＜０．０１）；ＢＧ与ＣＧ相比，ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ１６、ＣＤ２５均呈低下水平（Ｐ＜０.０５，Ｐ＜０.０１），ＣＤ４／ＣＤ８。比值出现异常升高等．结论：长期从事医疗辐射环境在危害机体造血的同时，也危害Ｔ细胞亚群及 Ｔ细胞 ＣＤ１６、ＣＤ２５的表达，Ｉ胶囊有明显的改善造血、调节细胞免疫功能的抗辐射作用．
- 肖永良欧剑峰印建国赵红斌乔宁生董银生王先华刘玲刘彩红
- 关键词：辐射环境CD25CD16
- 多氯联苯对大鼠海马神经元细胞的影响被引量：1
- 2009年
- 背景与目的:探讨多氯联苯(polychlorinated biphenyl,PCB)对大鼠海马神经元细胞生长发育的影响。材料与方法:取新生Wistar大鼠双侧海马,无菌条件下制备细胞悬液。实验分为对照组和PCB低(1×10-8mol/L)、中(1×10-7mol/L)、高(1×10-6mol/L)3个剂量实验组。运用光镜、免疫组化技术研究PCB对大鼠海马神经元细胞形态学及bcl-2和TGF-β1表达的影响。结果:PCB对大鼠海马神经元细胞的损伤随着PCB剂量的增加呈升高趋势,高剂量PCB组海马神经元细胞结构改变明显,神经元细胞轴突和树突消失仅部分残存,胞体萎缩;PCB能诱导海马神经元细胞bcl-2和TGF-β1的表达,PCB低剂量组bcl-2呈强阳性表达,中剂量组bcl-2表达显著下调,高剂量组bcl-2为阴性表达;低剂量组TGF-β1表达显著下调,中剂量组TGF-β1表达上调;高剂量组呈阴性,而对照组神经元细胞的bcl-2和TGF-β1均为阳性表达。结论:PCB对大鼠海马神经元细胞的生长产生影响。
- 赵红斌周焕发马慧李富军杨银书王先华
- 关键词：多氯联苯BCL-2TGF-Β1
- 拉伸应变对骨髓间充质干细胞成骨细胞定向分化的影响
- 2009年
- 探讨拉伸应变对小鼠骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stemcells,MSCs)向成骨细胞定向分化的影响。在成骨细胞诱导条件下,利用免疫组织化学和RT-PCR技术,(1)探讨0.5 Hz,3%拉伸应变作用MSCs不同时间(15 min、30 min、1 h、2 h、4 h、3 d、7 d、14 d),碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)、Ⅰ型胶原(TypeⅠcollagen,COLI)蛋白表达的变化以及Osterx(Osx)和骨钙素(Osteocalcin,OCN)mRNA表达的变化;(2)探讨不同拉伸应变(1%、3%和10%)作用1 h,Osx mRNA和OCN mRNA表达的变化。结果表明:(1)3%拉伸应变作用7 d,ALP的表达最强,14 d ALP表达减弱;3 d COLI表达同对照组相比显著增加;7 d、14 d COL I表达明显增强。(2)MSCs成骨诱导15 min,Osx mRNA开始表达,2 h Osx mRNA表达增加。0.5 Hz,3%应变作用MSCs 15 min,Osx mR-NA表达明显增加;30 min和1 h Osx mRNA的表达同成骨诱导组相比显著增强。成骨诱导15 min,OCN mRNA未见表达,作用30 min;OCN mRNA表达丰度低;1 h OCN mRNA表达升高。0.5 Hz,3%应变作用MSCs 15min,OCN mRNA开始表达;作用30 min和1 h,OCN mRNA表达明显增加。(3)1%和3%应变作用MSCs 1 h,OsxmRNA的表达显著上调;10%应变作用MSCs 1 h,Osx mRNA的表达不显著。3%的应变明显上调OCN mRNA的表达,1%和10%应变对OCN mRNA表达影响较小。提示,一定范围内的应变能促进小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞定向分化的进程。
- 赵红斌周焕发王先华董菊子杨银书张西正
- 关键词：间充质干细胞成骨细胞分化
- 毛细管电泳法检测癌基因C-myc胃癌中基因点突变被引量：4
- 2011年
- 癌基因C-myc激活和突变在胃癌形成过程中起着重要作用。通过毛细管电泳(CE)方法检测50例胃癌患者中C-myc基因突变,建立一种准确、快速诊断早期胃癌的方法。本实验采用PCR扩增胃癌及癌旁正常组织中C-myc基因第二外显子易发突变的部位基因序列,扩增样品分别经96℃变性和EcoRⅤ酶切处理,以PAGE-SSCP,CE-SSCP,CE-RFLP分别对其突变情况进行检测。优化的CE检测条件:筛分介质PEO浓度3.0%,pH 8.2,电压15 kV,温度15℃;荧光检测:λex=488 nm,λem=520 nm。检测结果:C-myc基因总突变率为20.0%(10/50)。测序分析结果显示C-myc基因第二外显子第53密码子存在点突变,碱基A变为碱基T(GAT→GTT),碱基的改变使氨基酸由亮氨酸替代为谷氨酰胺。本研究数据证实C-myc基因突变与胃癌的形成紧密相关,CE检测C-myc突变基因可作为胃癌早期诊断的简便可靠的方法。
- 谢希晖王荣贾正平谢华张爱梅徐娟王晓莉王先华
- 关键词：胃癌突变毛细管电泳单链构象多态性限制性片段长度多态性
- 膳食补充剂对受医疗辐射人员慢性疲劳症的防护干预被引量：4
- 2002年
- 目的使用膳食补充剂抗疲劳Ⅰ号胶囊干预介入放射诊疗人员防护前后的T细胞亚群(T-sub)IL-2R(CD25)NK细胞(CD16)的影响。方法在32例放射科人员中选择从事介入诊疗10年以上,慢性疲劳症状突出者10例为观察对象;设防护前组(BG)、防护后组(AG)、对照组(CG),使用流式细胞仪测定防护前后的T-subCD25CD16。结果AG与BG相比,总T细胞CD3上升,亚群中的CD8呈上升,CD4略有下降,CD4/CD8下降,CD25和CD16上升(P<0.05,0.01);BG与CG相比,CD3、CD4、CD8、CD16、CD25均呈低下水平(P<0.05,0.01),CD4/CD8比值出现异常升高等。结论长期从事医疗辐射环境在危害机体造血的同时,也危害T-subCD16CD25的表达水平,I号胶囊有明显的改善造血、调节细胞免疫功能的抗辐射作用。
- 肖永良欧剑峰印建国董银生赵红斌乔宁生王先华刘玲刘彩红
- 关键词：膳食补充剂慢性疲劳症
