沈才飞
- 作品数:21 被引量:104H指数:5
- 供职机构:第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
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- 不同缺失突变的丙型肝炎病毒核心蛋白基因在大肠杆菌中的表达被引量:2
- 2006年
- 目的:构建丙型肝炎病毒(HCV)全长及3种不同缺失突变的核心蛋白基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中表达.方法:用PCR方法扩增基因型为1b型的HCV核心蛋白的全长及3种不同缺失突变的基因片段,对应氨基酸分别为C573:1-191aa,C510:1-59aa+81-191aa,C507:1-169aa,C444:1-59aa+81-169aa.将其克隆到高效表达载体pRSETA中构成重组质粒(pRSETAC573,pRSETAC510,pRSETAC507,pRSETAC444),转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS.IPTG诱导表达6×His融合蛋白,表达产物经SDSPAGE及Westernblot检测和鉴定.结果:经酶切鉴定及测序证实全长及3种不同缺失突变的核心蛋白基因的原核表达载体构建正确.经SDSPAGE及Westernblot显示在Mr约为21×103,19×103,19×103,16.5×103处出现融合表达条带.融合蛋白的表达量约占菌体蛋白总量的20%.结论:全长及3种不同缺失突变的丙型肝炎病毒核心蛋白基因均在大肠杆菌中得到有效表达.
- 沈才飞白雪帆牟丹蕾黄长形
- 关键词:丙型肝炎病毒核心蛋白突变原核表达
- 不同缺失突变的丙型肝炎病毒核蛋白在大肠杆菌中的表达
- 丙型肝炎病毒/(hepatitis C virus,HCV/)感染已成为全球性的公共卫生问题。WHO 1999年统计表明,全球目前约有1.7亿人感染HCV,约占全球人口的3%。据估计,每年新增HCV感染人数约为300~4...
- 沈才飞
- 关键词:丙型肝炎病毒核蛋白突变原核表达
- 文献传递
- 血浆置换联合去甲肾上腺素治疗重型肝炎合并Ⅱ型肝肾综合征的临床疗效分析被引量:6
- 2011年
- 目的探讨血浆置换联合去甲肾上腺素对重型肝炎合并Ⅱ型肝肾综合征(hepatorenal syndrome,HRS)的疗效。方法 67例重型肝炎合并Ⅱ型HRS患者分为3组,均给予内科综合治疗;A组(n=19)为对照组,B组(n=23)给予去甲肾上腺素持续静脉泵入,C组(n=25)采用血浆置换联合去甲肾上腺素治疗。观察各组肝肾功能、终末期肝病模型评分(MELD评分)、尿量以及住院病死率。结果 A、B、C3组治疗后总胆红素分别为(254.50±143.41)、(129.65±60.28)、(97.39±39.53)μmol/L;肌酐分别为(153.07±81.00)、(148.00±82.36)、(81.28±12.98)μmol/L;MELD评分分别为27.91±6.55、25.98±8.06、19.26±2.22;尿量分别为(678.42±309.16)、(819.57±66.90)、(1611.20±225.71)ml。C组治疗后肌酐、MELD评分以及尿量与A、B组治疗后比较均有显著性差异(P<0.05),C组治疗后总胆红素与A组治疗后比较有显著性差异(P<0.05)。C组治疗前后比较,各指标均有显著性差异(P<0.05)。3组住院病死率分别为68.4%、43.5%和28.0%,3组比较有显著性差异(掊2=7.157,P<0.05)。结论血浆置换联合去甲肾上腺素是治疗重型肝炎合并Ⅱ型HRS的有效方法。
- 唐文蒋明德徐辉秦建平沈才飞
- 关键词:重型肝炎肝肾综合征血浆置换去甲肾上腺素
- 脱氧胆酸通过KLF4上调CDX2的表达促进Barrett食管形成
- 2016年
- 目的探讨在脱氧胆酸(deoxycholic acid,DCA)诱导Barrett食管(Barrett’s esophagus,BE)形成中,Krüppel样锌指转录因子4(Krüppel-like factor 4,KLF4)与同源异型框转录因子2(caudalrelated homeodomain transcription factor 2,CDX2)的作用。方法采用免疫组化S-P法检测49例人正常食管组织和22例BE组织中KLF4、CDX2的表达;体外培养Het-1A细胞,依据DCA处理时间分为0 h组(未经DCA处理)、4 h组、8 h组、12 h组并进行DCA处理。分别设置空白对照组、阴性siRNA对照组、阴性siRNA+DCA处理12 h组、KLF4-siRNA干扰组、KLF4-siRNA干扰+DCA处理12 h组,进行相应处理。设置空白对照组、阴性病毒对照组、阴性病毒+DCA处理12 h组、KLF4过表达病毒组,进行相应处理。待上述各实验组处理结束后,运用Real-time PCR、Western blot检测各组KLF4、CDX2、MUC2mRNA及蛋白的表达。结果免疫组化检测发现:在22例BE组织中,KLF4阳性表达15例,阳性率68.18%,阳性染色主要集中在细胞核;CDX2阳性表达16例,阳性率72.73%,阳性染色也主要集中在细胞核。与人正常食管鳞状上皮组织比较,BE组织中KLF4、CDX2表达均增高(χ2=18.642,P<0.05;χ2=23.678,P<0.05)。Real-time PCR及Western blot检测结果显示:随DCA处理时间的增加,Het-1A细胞KLF4、CDX2、MUC2的表达逐渐升高(P<0.05);KLF4-siRNA干扰组及KLF4-siRNA干扰+DCA处理12 h组中,KLF4、CDX2、MUC2表达均下调,且不再随DCA处理的刺激而升高(P<0.05);此外,阴性病毒+DCA处理12 h组及KLF4过表达病毒组中,KLF4、CDX2、MUC2表达均上调,且KLF4过表达病毒组3个基因蛋白表达上调更为显著(P<0.05)。结论 DCA通过KLF4上调CDX2,间接引起BE标志性分子MUC2的表达上调,从而促进正常食管上皮向BE转化。
- 闫武张昊翔沈才飞夏一菊王璞张亚飞李婧文徐胤邵顺子于晓娜房殿春
- 关键词:BARRETT食管脱氧胆酸
- 莫西沙星治疗肝硬化并发原发性腹膜炎的疗效观察被引量:5
- 2009年
- 目的:观察莫西沙星治疗肝硬化并发原发性腹膜炎的疗效。方法:98例病例随机分成治疗组(51例)和对照组(47例),治疗组使用莫西沙星注射液400mg,静滴,1次/天;对照组使用头孢哌酮/舒巴坦钠2g+左氧氟沙星注射液0.2g,静滴,2次/次,疗程7~10天。结果:治疗组总有效率为90.2%,明显高于对照组72.3%(P〈0.05),并且能较快缓解患者感染的症状和体征,不良反应发生率仅为3.9%。结论:莫西沙星是治疗肝硬化并发原发性腹膜炎安全有效的药物。
- 李小安陈鲜兰胡建何胜沈才飞
- 关键词:莫西沙星原发性腹膜炎肝硬化
- 回顾分析重庆地区30年来食管腺癌和贲门腺癌的胃镜检出率变化
- 目的 回顾第三军医大学西南医院经胃镜检出、病理确诊为食管腺癌和贲门腺癌的胃镜诊疗资料,对这两种肿瘤的临床流行病学特征和趋势进行探讨,以了解重庆地区食管腺癌和贲门癌的临床发病特征和发病趋势,从而为中国食管腺癌和贲门癌的发病...
- 邵顺子赵晶京于晓娜张昊翔沈才飞王璞夏一菊闫武李靖文张安然徐胤彭贵勇房殿春
- 结直肠息肉癌变相关危险因素分析
- 目的 探讨结直肠息肉癌变的相关危险因素.方法 收集第三军医大学西南医院2003-2012年行结肠镜检查的患者的资料,对经病理证实为结直肠息肉患者的性别、年龄、息肉的单多发情况、部位、大小、病理类型与癌变的关系进行分析总结...
- 于小娜邵顺子沈才飞张昊翔王璞夏一菊闫武李靖文张安然徐胤彭贵勇房殿春
- 去甲肾上腺素联合白蛋白治疗肝肾综合征临床疗效观察被引量:1
- 2012年
- 目的:观察去甲肾上腺素联合白蛋白治疗HRS患者的疗效。方法:回顾性分析我院2008年1月-2010年12月153例HRS住院患者临床资料(其中,Ⅰ型36例,Ⅱ型117例),分为对照组和去甲肾上腺素联合白蛋白治疗组(治疗组),分析HRS患者的基础疾病,总胆红素、肌酐、MELD评分、尿量变化以及住院病死率等。结果:Ⅰ型HRS患者治疗组治疗后除总胆红素外,肌酐、MELD评分以及尿量与对照组治疗后相应指标比较差异均有统计学意义(P<0.05);治疗组治疗前、后比较,肌酐及MELD评分降低、尿量增加差异均有统计学意义(P<0.05)。Ⅱ型HRS患者治疗组治疗后总胆红素、肌酐、MELD评分和尿量与对照组治疗后各指标比较差异均有统计学意义(P<0.05);治疗组治疗前、后各指标比较,总胆红素、肌酐及MELD评分降低,尿量增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。Ⅰ型HRS患者治疗组与对照组病住院死率(40.0%VS 81.3%)比较差异有统计学意义(χ2=6.223,P<0.05);Ⅱ型HRS患者治疗组与对照组住院病死率(18.2%VS 47.1%)比较差异有统计学意义(χ2=11.262,P<0.05)。结论:去甲肾上腺素联合白蛋白治疗HRS患者,有利于患者肝肾功能恢复,对HRS患者预后有一定的积极作用。
- 唐文蒋明德徐辉秦建平沈才飞
- 关键词:肝肾综合征MELD评分去甲肾上腺素白蛋白
- 双甲五灵胶囊抑制大鼠非酒精性脂肪性肝炎肝纤维化的研究被引量:2
- 2014年
- 目的探讨双甲五灵胶囊对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝纤维化进展的影响。方法 40只雄性SD大鼠随机分为正常大鼠对照组(n=10)、空白治疗模型组(n=15)及双甲五灵治疗组(n=15)。造模4w后双甲五灵治疗组大鼠给予口服喂养双甲五灵胶囊8w,实验共持续12w。检测大鼠体质量、肝湿重、肝TG含量、血清肝功能、血清肝纤维化及病理学指标等以判定双甲五灵胶囊在非酒精性脂肪性肝炎模型大鼠中的治疗效果。结果与空白治疗模型组相比,双甲五灵治疗组大鼠体质量、肝湿重、肝TG含量、肝功能指标(ALT、AST、TBIL及ALP)、肝纤维指标(HA、LN、Ⅳ-C及PCⅢ)和病理学指标(炎症活动度及纤维化程度SSS计分等)均有显著改善。结论双甲五灵胶囊可抑制非酒精性脂肪性肝炎的肝纤维进程。
- 罗超王平徐贵森沈才飞
- 关键词:非酒精性脂肪性肝炎肝纤维化
- 食管鳞癌及癌前病变组织中紧密连接蛋白claudin3和4的表达及临床病理意义被引量:7
- 2014年
- 目的检测紧密连接蛋白claudin3、claudin4在食管鳞状细胞癌及癌前病变组织中的表达,探讨二者表达的临床病理学意义。方法应用组织芯片联合免疫组化EnVision法检测claudin3、claudin4在93例食管鳞癌、20例异型增生组织、20例食管炎和15例正常食管上皮组织中的表达水平。结果 claudin3在正常食管上皮、食管炎、异型增生及食管鳞癌中的表达率分别为6.7%(1/15)、20.0%(4/20)、30.0%(6/20)、43.0%(40/93),癌组织阳性率最高,正常食管上皮组织阳性率最低,差异有统计学意义(P<0.05),食管癌阳性率较正常食管上皮明显升高(P<0.05),异型增生及食管炎的表达较正常组织差异并无显著性(P>0.05)。claudin4在正常食管上皮、食管炎、异型增生及食管鳞癌中的表达率分别为33.3%(5/15)、35.0%(7/20)、40.0%(8/20)、45.2%(42/93),各组间差异无统计学意义(P>0.05)。claudin3和claudin4表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、病理分级及浸润深度无相关性(P>0.05),但有淋巴结转移者的阳性率较无淋巴结转移者低(P<0.05),且死亡组的阳性率较生存组低(P<0.05);claudin3和claudin4在食管鳞癌中表达存在显著相关性(χ2=8.520,K=0.302,P=0.004),但两种表达无统计学差异(P>0.05);生存分析发现claudin3和claudin4表达阳性组的术后生存率高于表达阴性组(P<0.05)。结论 claudin3可能参与了食管鳞癌的发生,有淋巴结转移时claudin3和claudin4的表达出现下调,claudin3和claudin4有可能成为判断食管鳞癌预后的分子标志物。
- 徐胤王璞沈才飞李婧文张安然邵顺子于晓娜张昊翔闫武夏一菊房殿春
- 关键词:CLAUDIN组织芯片食管鳞癌