沈学飞
- 作品数：41 被引量：122H指数：6
- 供职机构：中国人民解放军401医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项上海市科学技术委员会基础研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Cyr61基因过表达对人肾小管上皮细胞凋亡的影响被引量：4
- 2005年
- 摘 要 目的:观察Cyr61基因过表达对人肾小管上皮细胞 (HKC)凋亡的影响,探讨Cyr61在常染色体显性多囊肾病(ADPKD)发病中的作用及机制。 方法:RT PCR扩增Cyr61基因全长,构建pcDNA3. 1 +Cyr61重组质粒,转染并筛选获得稳定转染pcDNA3. 1+Cyr61的HKC细胞。经RT PCR、Northern、Westernblot鉴定转染细胞系基因的整合及表达。对空白HKC、空质粒pcDNA3. 1转染的HKC、Cyr61转染的HKC和囊肿衬里上皮细胞去血清培养 72h后,流式细胞仪检测细胞凋亡指数,Westernblot检测磷酸化Akt和Bad含量。 结果:构建了pcDNA3. 1+Cyr61重组质粒并获得稳定转染该质粒的HKC细胞。空白HKC与质粒pcDNA3. 1转染组之间上述指标无显著差异(P>0 05),Cyr61基因转染组与空白组、pcDNA3. 1转染组相比,凋亡指数显著降低 (P<0. 01),磷酸化Akt和磷酸化Bad含量显著增高 (P<0 .01 ),Cyr61基因转染组与囊肿衬里上皮细胞之间上述指标无显著差异 (P>0. 05);在Cyr61抗体存在下,Cyr61基因转染组的上述指标与空白组无显著差异 (P>0 .05 )。 结论:过表达Cyr61的HKC对去血清诱导的凋亡特性与囊肿衬里上皮细胞相似,过表达的Cyr61可能通过自分泌途径,促进Akt和Bad磷酸化,抑制细胞凋亡,参与ADPKD囊肿形成和发展。
- 沈学飞梅长林张岩赵海丹刘亚伟戴兵王文靖许涛
- 关键词：PCDNA3凋亡基因过表达囊肿衬里上皮细胞肾小管上皮细胞ADPKD
- 神经妥乐平联合血液透析滤过治疗尿毒症周围神经病变疗效观察被引量：13
- 2012年
- 目的观察神经妥乐平与血液透析滤过联合应用对尿毒症血液透析患者周围神经病变的疗效。方法将44例尿毒症周围神经病变患者随机分为两组,对照组给予常规血液透析2次/周,血液透析滤过1次/周,并补充维生素治疗;治疗组在此基础上给予神经妥乐平7.2 Nu加入0.9%氯化钠溶液250 ml静脉滴注,3次/周,共8周,观察患者治疗前后临床症状和体征及胫、腓神经的感觉神经传导速度。结果治疗组显效12例,有效7例,无效3例;对照组显效8例,有效6例,无效8例,两组疗效间差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前两组患者的胫、腓神经感觉神经传导速度间差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后两组患者的胫、腓神经感觉神经传导速度间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论神经妥乐平与血液透析滤过联合应用能显著改善尿毒症患者的周围神经病变,且疗效优于血液透析联合血液透析滤过治疗。
- 沈学飞韩晓云殷爱民张良伟
- 关键词：神经妥乐平血液透析滤过尿毒症周围神经病变
- Cyr61在常染色体显性多囊肾病患者肾组织中的表达及其意义被引量：5
- 2004年
- 目的 观察富含半胱氨酸61蛋白(Cyr 61)在正常人和常染色体显性多囊肾病(ADPKD)患者肾组织中的不同表达,探讨其在多囊肾病的发病中的作用。方法 采用免疫组化及Western印迹方法分析ADPKD患者肾囊肿组织中Cyr 61的细胞定位及其在体液和细胞中的表达含量。应用荧光定量PCR技术检测Cyr61、Ⅰ型、Ⅳ型胶原(Col Ⅰ、Ⅳ)和层粘连蛋白(LN)的基因表达。结果 Cvr61在正常肾小管上皮细胞中有微弱表达。ADPKD患者肾组织中Cyr61含量明显增高,主要在囊肿衬里上皮细胞和残存的正常肾小管上皮细胞中表达。多囊肾组织中Cyr61与Col Ⅰ、ColⅣ、LN的mRNA表达都明显增高,且ColⅣ明显高于Col Ⅰ。正常人尿液未检测到Cyr61,而ADPKD尿液中可检测到Cyr61,其血清中Cyr61水平约为尿液的2倍。结论 Cyr61在ADPKD囊肿组织过度表达,可能通过促进细胞外基质成分改变参与ADPKD囊肿形成和发展。
- 沈学飞梅长林孙田美张岩李德谦
- 关键词：ADPKD肾组织常染色体显性多囊肾病
- 维持性血液透析患者细胞免疫功能的变化及意义被引量：19
- 2005年
- 于树平沈学飞梅长林
- 关键词：细胞免疫功能维持性血液透析患者外周血T细胞亚群变化淋巴细胞转化功能维持性血透患者替代疗法
- 血清可溶性FasL水平与尿毒症患者心血管疾病的相关性研究被引量：2
- 2005年
- 目的探讨尿毒症心血管疾病(CVD)患者血清可溶性FasL(sFasL)水平与相关因子和颈总动脉血管内膜中层厚度(IMT)的相关性。方法尿毒症血液透析伴CVD患者103例(CVD组);尿毒症血液透析不伴CVD患者31例(非CVD组)。采用酶联免疫双抗体夹心法(ELISA)测定血清sFasL、CRP、白蛋白、IL6和TNFα浓度。免疫组化观察桡动脉血管内皮细胞的Fas、FasL表达;采用荧光逆转录聚合酶链式反应(RTPCR)测定Fas、FasLmRNA的含量;彩色超声波测量颈总动脉血管内膜中层厚度(IMT)。结果CVD组血清sFasL、CRP、IL6和TNFα浓度显著高于非CVD组(P<0.01),白蛋白则低于非CVD组(P<0.01)。CVD组血管壁Fas、FasL表达明显高于非CVD组。荧光RTPCRFas、FasLmRNA定量分析示CVD组较非CVD组增高50%。CVD组63.11%(41/65)患者IMT增厚。双变量线性相关分析示,sFasL与CRP和IMT均呈明显的正相关(r=0.58,r=0.64,P<0.01);与白蛋白水平及GFR呈负相关(r=-0.53,r=-0.62,P<0.01)。结论血清sFasL水平及血管壁Fas、FasL高表达可能与动脉粥样硬化相关,因此血清sFasL水平可能是尿毒症CVD患者一个新的危险因素。
- 李德谦梅长林孙田美沈学飞戴兵
- 关键词：可溶性FASL尿毒症心血管疾病炎症
- 常染色体显性多囊肾病患者与正常成人尿液的定量比较蛋白质组学分析被引量：6
- 2005年
- 目的搜索常染色体显性多囊肾病(ADPKD)患者与正常成人尿液蛋白质组中有丰度差异的蛋白质成分。方法制备ADPKD患者(PKD1突变)及正常成人尿液蛋白组样品,同位素编码的亲和力标签法标记蛋白质、筛选被标记肽段,二维液相色谱-串联质谱法分离鉴定被标记肽段,从而鉴定蛋白质。通过计算两同位素试剂标记的相同肽段指纹峰面积比,寻找有丰度差异的蛋白质。根据被鉴定肽段的可信度,从鉴定出的蛋白质中选出6种,免疫印迹法验证其在两尿液蛋白组样品中的丰度差异。结果两尿液蛋白质组共鉴定出尿蛋白质106种, ADPKD患者尿液中水平较正常上调者48种,下调者45种。其中多囊蛋白1、肝细胞生长因子、单核细胞趋化蛋白3及孕激素受体等5种蛋白丰度差异为免疫印迹所证实。结论包括多囊蛋白1在内的多种蛋白质成分在ADPKD患者尿液中丰度发生改变,差异蛋白包括生长因子、凋亡调节蛋白、细胞外基质成分、受体、参与胞浆运输的蛋白质、酶类、细胞信号蛋白、转录因子及转录调节因子等,这些蛋白质信息可能为寻找与ADPKD发病相关的蛋白提供部分实验依据。
- 张岩梅长林喻峰沈学飞黄音刘亚伟赵海丹戴兵周玉坤戎殳许涛华振浩
- 关键词：比较蛋白质组肾病患者ADPKD细胞外基质成分凋亡调节蛋白
- 常染色体显性多囊肾病患者与正常成人尿液的定量比较蛋白质组学分析
- 张岩刘亚伟沈学飞赵海丹梅长林
- 尿Cyr61检测对缺血性急性肾衰的早期诊断及其机制的临床应用
- 徐岩沈学飞周海燕马瑞霞董晖
- 本课题应用领域为重大疾病临床诊治技术：急性肾衰竭的早期诊断。研究背景：目前，国际肾脏病和急救医学界已将急性肾衰竭改为急性肾损伤（acute kidney injury， AKI），AKI概括了肾功能从微小改变到最终肾衰竭...
- 关键词：
- 关键词：尿检测缺血性急性肾衰
- ARF专用与ICU通用病情评分法对29例重症急性肾衰竭患者院内死亡判别力的比较被引量：2
- 2005年
- 目的比较急性肾功能衰竭(ARF)专用及ICU通用病情评分法对重症ARF患者死亡的判别能力。方法29例ARF患者分为存活组(n=20)和死亡组(n=9),用两种ARF专用病情评分法,即急性肾小管坏死个体病情严重性指数(ATN ISI)、Stuiven berg医院急性肾衰竭评分法(SHARF),以及ICU通用病情评分法,即急性生理学及慢性健康状况评分Ⅱ(APACHEⅡ)、急性生理学及慢性健康状况评分Ⅲ(APACHEⅢ)和死亡概率预测模型Ⅱ(MPMⅡ),对所选病例进行回顾性病情评估,并做受试者死亡判别的工作特征(ROC)曲线。结果存活组各项积分均低于死亡组,其中ATN ISI、APACHEⅡ、MPMⅡ24h、MPMⅡ72h等死亡组与存活组积分差异有显著性(P<0.05)。5种病情评分法ROC曲线下面积由大到小依次为:APACHEⅡ(0.806)、MPMⅡ72h(0.762)、MPMⅡ24h(0.754)、MPMⅡ48h(0.738)、ATN ISI(0.736)、MPMⅡ0h(0.713)、APACHEⅢ(0.706)、SHARF48h(0.660)、SHARF0h(0.586)。结论对ARF患者ICU通用评分法较ARF专用评分法院内死亡判别能力更高,APACHEⅡ能力较优。
- 张岩郁胜强梅长林徐辉沈学飞
- 关键词：肾功能衰竭预后
- IL-4对IL-1β诱导的大鼠系膜细胞增殖的抑制作用观察被引量：1
- 2005年
- 目的观察IL4对IL1β诱导的大鼠系膜细胞增殖过程中前列腺素E2(PGE2)的释放及环氧化酶2(COX2)mRNA和蛋白表达的抑制作用,探讨IL4抗肾小球硬化的机制。方法采用体外培养的大鼠系膜细胞(MC),MTT法检测IL1β促系膜细胞增殖的时效和量效关系,设立空白对照组、IL1β组、IL4+IL1β组、NS398组、NS398+IL1β组、吲哚美辛组、吲哚美辛+IL1β组,采用酶联免疫吸附法检测各组MC培养上清中PGE2的含量,应用RT PCR和Westernblot检测各组COX1和COX2mRNA及蛋白表达水平。结果IL1β在12、24、48h,浓度为0.1～100ng/ml时均有促MC增殖的作用,其中以孵育24h、浓度为2ng/ml时作用最强。IL4、NS398、吲哚美辛均能抑制IL1β诱导MC产生PGE2,IL4的抑制作用(抑制率84.9%)强于NS398(抑制率56.5%),吲哚美辛(抑制率41.2%)的抑制作用最弱。RT PCR和Westernblot显示IL4和NS398均能明显抑制COX2mRNA和蛋白的表达,吲哚美辛能抑制COX1和COX2mRNA及蛋白表达,但对COX2的抑制作用较弱。结论IL4能显著抑制IL1β诱导的系膜细胞增殖,下调COX2的表达,减少PGE2的产生,从而发挥抗肾小球硬化的作用。
- 许涛叶朝阳梅长林孙田美沈学飞付文成
- 关键词：肾小球硬化症病灶性地诺前列酮IL-4IL-1Β系膜细胞细胞增殖
