汲坤
- 作品数：44 被引量：117H指数：6
- 供职机构：沈阳医学院基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目辽宁省博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学理学更多>>
- 结核分枝杆菌耐药性的研究被引量：1
- 2014年
- 目的通过对锦州市传染病医院临床痰标本结核分枝杆菌耐药率的分析,了解锦州地区结核分枝杆菌的耐药状况指导合理用药。方法取锦州市传染病医院2012年7月—2013年7月抗酸杆菌培养阳性的菌株500株,采用绝对浓度法进行4种抗结核药物的敏感性试验。结果在500株结核分枝杆菌中,278株对4种抗结核药物皆敏感,222株至少对一种药物敏感,结核菌的总耐药率为44.4%(222/500)。仅对一种抗结核药物耐药的菌株56株,总的耐单药率为11.2%。结论锦州市地区结核分枝杆菌对4种一线抗结核药物的耐药情况严重,应当引起相关医疗部门重视。
- 李昭周月宏汲坤王俊平
- 关键词：结核分枝杆菌耐药率药敏实验
- Survivin小干涉RNA和GRIM-19共表达质粒的构建
- 2011年
- 目的构建survivin小干涉RNA和干扰素/维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关的基因(gene associated with retinoid interferon induced mortality-19,GRIM-19)共表达质粒为探讨联合基因对喉癌细胞凋亡和增殖的影响奠定基础。方法以survivin小干涉RNA重组质粒pGCsilencer-siRNA-survivin(简称psi-survivin)为模板设计PCR引物,PCR产物经测序后与线性化pCDNA3.1-GRIM-19(简称p-GRIM-19)连接,构建survivin小干涉RNA和GRIM-19共表达质粒pCDNA3.1-siRNA survivin/GRIM-19(简称p-siRNA survivin/GRIM-19)。将质粒用脂质体lipofetamine2000包裹转入人喉癌Hep-2细胞中,用半定量RT-PCR检测survivin和GRIM-19 mRNA的含量。结果构建的survivin小干涉RNA和GRIM-19共表达质粒p-siRNA survivin/GRIM-19经酶切电泳和测序证实碱基序列的正确性,p-siRNA survivin/GRIM-19转染人喉癌Hep-2细胞,从mRNA水平能降低survivin的表达,抑制率55.9%,同时增加GRIM-19表达,表明共表达质粒的构建是成功的。结论构建的siRNA survivin和GRIM-19共表达质粒从mRNA水平能降低survivin的表达,同时增加GRIM-19表达,为进一步实验奠定了基础。
- 文连姬高丽芳汲坤富东娜金春顺管国芳赵雪俭
- 关键词：喉肿瘤凋亡抑制蛋白类生存素
- 携带siRNA-Stat3质粒减毒沙门氏菌对肝原位移植瘤的治疗作用被引量：1
- 2008年
- 目的:观察携带有siRNA-Stat3质粒的鼠减毒沙门氏菌对小鼠肝脏原位移植瘤的治疗作用及效果。方法:将siRNA-Stat3质粒经电转化方法转入减毒鼠沙门氏菌中,将肝原位移植瘤小鼠分为mock未治疗组、pGC-Si-Stat3组和pGC-Si-Scramble组。pGC-Si-Stat3组小鼠灌胃转化有siRNA-Stat3质粒的减毒沙门氏菌,pGC-Si-Scramble组小鼠灌胃转化有空质粒的减毒沙门氏菌,未治疗组小鼠灌胃PBS,观察pGC-Si-Stat3组Stat3mRNA和蛋白表达水平。结果:与未治疗组和pGC-Si-Scramble组比较,携带有siRNA-Stat3质粒治疗组肝原位移植瘤体积明显缩小(P<0.05),瘤重减轻(P<0.05)。与其对应的mRNA和蛋白表达泳道光密度值较未治疗组和pGC-Si-Scramble组明显降低(P<0.01?。结论:携带有siRNA-Stat3质粒的鼠减毒沙门氏菌对小鼠肝原位移植瘤的生长具有显著抑制作用。
- 田勇张灵汲坤高丽芳孙莹刘艳波徐德启赵雪俭
- 关键词：基因治疗减毒沙门氏菌
- 鼠双微体基因2与恶性肿瘤相关性的研究进展
- 2014年
- 鼠双微体基因2（murine doubleminute 2,MDM2）是一种癌基因,MDM2基因的扩增或过度表达与多种恶性肿瘤的发生和发展密切相关,本文主要对MDM2基因与恶性肿瘤的相关性进行综述。1 MDM2基因MDM2是1987年克隆出来的一个高度扩增的基因[1],存在于一个含有双微体（double minutes,DM）的自发转化小鼠Balb/c3T3成纤维细胞系中。
- 张明璇汲坤
- 关键词：肿瘤单核苷酸多态性
- si-Stat3及GRIM-19共表达质粒抗前列腺癌的体内外实验研究
- 张灵高丽芳汲坤林桂渺赵雪俭
- 关键词：前列腺癌STAT3GRIM-19RNA干涉基因治疗
- RNA干扰抑制乳腺癌MCF-7细胞鼠双微体-2基因表达及细胞增殖的实验研究被引量：1
- 2014年
- 目的研究乳腺增生症、乳腺导管内癌和浸润性乳腺癌组织中mdm2蛋白的表达及siRNA mdm2对肿瘤细胞增殖的影响。方法采用免疫组织化学方法检测乳腺增生症、乳腺导管内癌和浸润性乳腺癌组织中mdm2蛋白的表达;将siRNA mdm2质粒转染乳腺癌MCF-7细胞,应用MTT检测siRNA mdm2对肿瘤细胞增殖的抑制作用。结果 mdm2蛋白在乳腺导管内癌组织和浸润性乳腺癌组织中的阳性表达率均为100%(18/18,20/20),在乳腺增生症组织中表达阳性率为20%(4/20)。与乳腺增生症组织比较,乳腺导管内癌组织和浸润性乳腺癌组织中mdm2蛋白阳性表达率明显增高(P<0.01)。MTT结果表明转染pGCsiRNA-mdm2后MCF-7细胞生长受到抑制,与mock组和pGCsiRNA-scramble组比较差异有统计学意义(P<0.01)。转染pGCsiRNA-mdm2 72 h后与48 h比较,MCF-7细胞生长受抑制明显,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 mdm2在乳腺癌组织中存在广泛表达,其阳性表达可能促进肿瘤细胞的增殖过程。
- 宫琦玉汲坤张丽艳王波楚琪张明璇
- 关键词：乳腺导管内癌浸润性乳腺癌RNA干扰MDM2
- Survivin-siRNA对裸鼠前列腺癌生长的影响被引量：6
- 2007年
- 目的研究survivin-siRNA对前列腺癌裸鼠移植瘤生长的作用,探讨survivin与前列腺癌发生、发展的关系。方法人前列腺癌细胞PC-3M荷瘤裸鼠18只随机分为3组:mock组(n=6),pSi-scrambled组(n=6)和pSi-sur2组(n=6)。通过电子穿孔仪将质粒转入裸鼠移植瘤内,20d后处死动物,计算抑瘤率。利用Western blot检测survivin蛋白表达水平,免疫组化SP法检测增殖指数变化;TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡的变化。结果体内实验表明,pSi-sur2组与其他两对照组比较裸鼠移植瘤生长速度明显减慢(P<0.01),肿瘤组织survivin蛋白表达及肿瘤增殖指数显著降低(P<0.01),而肿瘤凋亡显著增加(P<0.01)。结论通过RNA干扰技术抑制survivin的表达,在裸鼠体内可显著抑制前列腺癌生长。
- 刘喜春于振香高瑞娟张灵赵燕颖汲坤高丽芳赵雪俭
- 关键词：PC-3MSURVIVINSIRNA
- 减毒沙门氏菌携带共表达siRNA-mdm2与p53质粒抗前列腺癌的实验研究
- 汲坤
- 关键词：前列腺癌MDM2基因RNA干涉减毒沙门氏菌
- 文献传递
- 锌对前列腺癌细胞PC-3M凋亡的影响被引量：8
- 2006年
- 目的:探讨锌对前列腺癌细胞PC-3M凋亡的影响。方法:分别选用不同浓度ZnSO4·7H2O(终浓度分别为6·25、15、25、50、100、150、200、250及300μmol·L-1)作用于PC-3M细胞24h,用MTT法筛选对PC-3M细胞增殖抑制的有效浓度,利用吖啶橙/溴化乙锭染色、DNAladder及流式细胞术检测PC-3M细胞凋亡情况。结果:MTT显示,锌的浓度在250μmol·L-1时,PC-3M细胞存活率显著低于对照组(P<0·01)。Zn2+浓度达250μmol·L-1时,相差显微镜下细胞形态变化明显,细胞变长,并伸出较长的突起,细胞分裂相明显减少,细胞数量较对照组明显减少。吖啶橙/溴化乙锭染色显示,对照组细胞形态为规则的圆形,细胞膜光滑无皱缩和发泡,呈现均匀的绿色,偶可见橙色细胞(自然凋亡细胞);Zn2+(250μmol·L-1)作用后,相差显微镜下可观察到较多早期凋亡细胞,细胞多为圆形,但细胞膜较对照组粗糙,细胞呈绿色,细胞核中有鲜绿色的斑点;也可观察到较多的晚期凋亡细胞,细胞形状不规则,细胞膜粗糙,有较多突起,被吖啶橙染成橙色,细胞中有鲜亮的橙色斑点。DNAladder可见梯形条带出现;流式细胞术显示亚二倍体峰的出现,细胞凋亡率为13·3%。上述各项指标均显示PC-3M细胞的凋亡水平明显高于对照组(P<0·05)。结论:高Zn2+可以抑制前列腺癌细胞生长并诱导前列腺癌细胞凋亡。
- 刘瑾张灵李晓萌许莉汲坤赵雪俭李扬
- 关键词：锌PC-3M细胞细胞凋亡
- 瞬时受体电位通道蛋白的跨膜片段分析被引量：4
- 2016年
- 目的分析瞬时受体电位（TRP）通道的膜拓扑结构。方法采用糖基化的方法,对传统TRP通道TRPC5的各疏水片段进行膜整合分析。结果 TRPC5通道中,S4～S8片段按顺序分别以Ncyt/Cexo和Nexo/Ccyt的方式插入到膜中,C末端位于细胞内。而S1～S3片段可能存在2种膜整合方式：一种是S1和S3整合到膜上,S2位于细胞外;另一种是混合模式,S1和S3分别位于细胞内,其N末端均位于细胞内。结论 TRPC5通道的S4～S8为跨膜片段,S1～S3片段需进一步实验验证。
- 苏秋香张丽艳汲坤张改改张利华
- 关键词：瞬时受体电位通道
