林少芬
- 作品数：73 被引量：251H指数：7
- 供职机构：中山大学中山眼科中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 与血管生成相关的生长因子及其受体在巩膜穿刺孔嵌顿组织内的表达被引量：6
- 2002年
- 目的 了解玻璃体手术巩膜穿刺孔嵌顿的眼内组织是否表达了与血管生成相关的生长因子及其受体。 方法 在玻璃体手术中 ,共取 10例从巩膜穿刺孔脱出的眼内组织。冰冻切片 ,用免疫组织化学方法检查血管内皮生长因子 (vascular endothelial growth factor,VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)、血小板源性生长因子 - A(platelet- derived growth factor- A,PDGF- A)、转化生长因子 - β1 (transforming growth factor,TGF- β1 )及其受体。 结果 脱出的眼内组织包括 :视网膜和玻璃体组织各 3例、变性的红细胞 2例 ,睫状体和纤维组织各 1例。VEGF和 b FGF及其受体在所有标本均为阳性 ,PDGF- A、TGF- β1 及其受体仅在大部分标本阳性。阳性染色包括了视网膜的细胞、睫状体色素细胞和非色素细胞、纤维细胞和部分玻璃体内的细胞。 结论 嵌顿在巩膜穿刺孔的眼内组织表达了与血管生成相关的生长因子及其受体 。
- 刘文唐仕波黄素英李加青林少芬
- 关键词：血管生成生长因子受体
- W—P小体与人视网膜微血管内皮细胞鉴定
- 目的：观察 W—P 小体在人视网膜微血管内皮细胞的存在情况,为人视网膜微血管内皮细胞鉴定提供新的方法。方法：角膜移植留下的眼杯解剖分离人视网膜后经胰蛋白酶、胶原酶消化,含10%血清的人内皮细胞培养基(HE—SFM)培
- 朱晓波谢琳李涛高艺徐哲李建桥林少芬唐仕波
- 文献传递
- 改良的人视网膜Muller细胞的原代培养方法与鉴定被引量：2
- 2017年
- 背景视网膜Muller细胞是视网膜重要的胶质细胞，也是视网膜干细胞的来源之一，研究Muller细胞的生物学行为对研究视网膜的各种生理病理过程和视网膜干细胞治疗研究具有重要意义，而建立稳定的视网膜Muller细胞培养体系是相关研究的基础。目的优化分离培养和纯化人视网膜Muller细胞的方法，为相关的实验研究提供良好优质的Muller细胞来源。方法分离人供体眼视网膜组织，然后将剪碎的视网膜组织置入质量分数0．25％胰蛋白酶＋100U透明质酸酶混合溶液中进行消化，添加含体积分数10％胎牛血清的DMEM／F12培养液1～2ml终止消化，然后加入含体积分数20％胎牛血清的RPMI1640培养液培养72h，行半量换液，再以含10％胎牛血清的培养液进行传代。光学显微镜下根据细胞的形态特征进行细胞鉴定，并分别采用免疫荧光技术和免疫组织化学法检测胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和Muller细胞特异性标志物谷氨酰胺合成酶（GS）的表达，对培养的细胞进行鉴定。结果应用0．25％胰蛋白酶＋100U（商品单位）透明质酸酶的混合酶消化法可成功获取人视网膜Muller细胞，原代培养后24h细胞贴壁，培养后9—10d细胞融合。培养的细胞胞体呈长圆形，细胞质丰富，部分细胞体两端锥状长突起，末端膨隆，细胞核大。传代后的细胞胞体大，呈扁平多角形，符合Muller细胞的形态。细胞免疫组织化学和免疫荧光技术检测显示95％以上的细胞中GFAP呈阳性表达，90％以上的细胞中GS呈强阳性表达。结论应用透明质酸酶和胰蛋白酶混合液消化法可以成功分离人视网膜Muller细胞，分别用含20％胎牛血清和含10％胎牛血清的RPM11640培养液培养和传代的人视网膜Muller细胞产量高且纯度好。
- 林少芬毛羽翔谢满云唐仕波
- 关键词：神经胶质细胞MÜLLER细胞
- 人视网膜色素上皮细胞原代培养冻存和复苏方法改进被引量：3
- 2012年
- 目的优化建立一种简单有效的人视网膜色素上皮细胞(RPE)的原代培养、冻存和复苏的方法,对细胞进行鉴定,为研究RPE的功能和治疗有关眼病提供细胞来源。方法采用0.25%胰酶+0.02%乙二胺四乙酸(EDTA)二次消化分离细胞并进行传代,以0.125%胰酶进行传代,用免疫组织化学检测进行角蛋白与S100表达鉴定RPE。利用-80℃冰箱对细胞冻存,复苏后观察细胞活性。结果 RPE体外生长旺盛、1 h贴壁。初期为圆型,胞壁内充满黑色色素,传代后细胞呈圆型、不规则形,细胞透亮。免疫组织化学角蛋白与S100均呈强阳性,证实培养的是RPE细胞,所获细胞纯度100%。冻存细胞复苏后生长旺盛,细胞形态与复苏前相比无区别。结论二次胰蛋白酶消化分离细胞数量多,能成功建立RPE的体外培养模式,用-80℃冻存RPE的方法简便,成本低,冻存复苏后细胞存活率及细胞形态不受影响,是目前较理想的RPE细胞保存方法。
- 林少芬毛羽翔郑健樑胡洁唐仕波
- 关键词：色素上皮细胞培养技术复苏术
- 人三维体外血管模型的构建被引量：5
- 2005年
- 目的利用HUVEC建立人体外三维血管模型。方法原代培养HUVEC,利用I型胶原蛋白建立三维系统,在上面培养HUVEC,随着胶原蛋白的降解,人体外三维血管模型逐渐形成,HE染色三维血管样结构。结果HUVEC成功培养,人体外三维血管模型顺利构建。结论利用I型胶原蛋白建立的三维系统,能成功构建人体外三维血管模型。
- 李斌唐仕波林少芬肖迎孟晶
- 关键词：HUVEC
- bcl-X_L抗视网膜光感受器细胞凋亡作用的实验研究被引量：4
- 2003年
- 目的 评价抗凋亡基因bcl XL 对视网膜光感受器细胞的抗凋亡作用。方法 首先建立谷氨酸损伤的SD大鼠视网膜光感受器细胞凋亡模型。将体外培养的光感受器细胞分为A组 (正常对照组 )、B组 (谷氨酸组 )及C组 (rAd gfp bcl XL 转染 +谷氨酸组 ) ;其中C组在加入谷氨酸前 4 8h用滴度为 6 5×l0 12 pfu/mL的重组腺病毒rAd gfp bcl XL 转染光感受器细胞 ;荧光显微镜下观察光感受器细胞中的绿色荧光蛋白表达情况 ;用免疫组化法分析rAd gfp bcl XL 转染细胞和未转染细胞Bcl XL蛋白水平 ;DNA琼脂糖凝胶电泳以评判 3个组神经元凋亡发生与否及凋亡程度 ;采用Hoechst332 5 8染色做正常核和凋亡核的形态学检测。结果 免疫组化检测结果表明转染细胞与未转染细胞的Bcl XL 蛋白表达水平有差异 ,DNA电泳分析发现B组呈典型的DNA“梯度”条带 ,而A组和C组几乎无DNA“梯度”条带 ,核形态学检测结果亦证实转染组较未转染组的核有明显差异。结论重组腺病毒介导转染的bcl XL 对体外培养的视网膜光感受器细胞有抗凋亡作用 ,提高视网膜光感受器细胞bcl XL 的表达水平可能为视网膜变性疾病提供潜在有效的治疗方法。
- 唐仕波罗燕杨斌林少芬林健贤
- 关键词：细胞凋亡原癌基因蛋白质C-BCL-2腺病毒科细胞变性
- NTF2基因抵抗糖尿病视网膜病变的发生
- 目的：寻找到并验证 NTF2对糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)的抵抗作用。方法：我们建立严格的人选和排除标准,选择两组病人进行对比研究,每组6人。一组 (normal 组,简称 N 组)...
- 李斌唐仕波史煜闵运斌林少芬
- 文献传递
- FK506对糖尿病大鼠视网膜损伤的保护作用
- ＜正＞目的:研究表明,血—视网膜屏障（Blood—Retina Barrier, BRB）破坏是糖尿病视网膜病变(Diabetic Retinopathy,
- 马红婕李双农唐仕波梁小玲黄创新李涛丁小燕林少芬
- 文献传递
- 海德堡激光眼科诊断仪与光学相干断层扫描成像术在眼底病临床检查中的应用对比被引量：3
- 2012年
- 目的应用海德堡激光眼科诊断仪(Sepctralis HRA+OCT)与光学相干断层扫描成像术(Stratus OCT)检测眼底病黄斑部病变获取满意图像的结果,验证HRA+OCT技术分辨率进一步提高,量化诊断指标更为突出。方法用HRA+OCT与Stratus OCT对100例不同病种的眼病患者进行黄斑部水平径线、垂直径线和不同角度的线性扫描,并对患者做初次检查相同参数随访(对比)检查,扫描过程中做好患者配合工作的指导。结果图像清晰,对临床诊治提供指导性意义,HRA+OCT将为临床提供更有价值的图像数据资料。结论 HRA+OCT比Stratus OCT获取扫描结果更精确,扫描速度、分辨率、扫描深度进一步提高,对临床诊治有更大的指导帮助。
- 林少芬毛羽翔胡洁罗燕唐仕波
- 关键词：眼底
- 卡铂兔眼结膜下及全身注射后眼内药物浓度的检测及临床意义被引量：1
- 2004年
- 目的:全身静脉注射和眼结膜下注射化疗药物卡铂后检测眼内药物浓度,并比较两者的差别,为临床眼结膜下注射化疗药物卡铂治疗视网膜母细胞瘤提供理论依据。方法:分别用正常新西兰大白兔各4只,按18.7 mg/kg经静脉注射和10 mg/ml 0.5 ml右眼结膜下注射化疗药物卡铂,全身用药剂量是结膜下注射剂量的8倍。注射后1、2、3 h分别抽取房水和玻璃体样本0.2 ml,采用原子吸收光度法,用Z-8000型偏振塞曼原子吸收分光光度计检测房水及玻璃体中卡铂的含量。所得结果采用t检验进行统计分析。结果:全身用药后1、2、3 h房水和玻璃体卡铂含量分别为:140、330、180 ng/ml和20、40、17 ng/ml,结膜下注射后1、2、3 h房水和玻璃体卡铂含量分别为2 650、4 390、2 780 μg/ml和160、250、110 ng/ml。结果显示结膜下注药后眼内房水及玻璃体药物浓度明显高于全身用药后的眼内药物浓度,全身用药和结膜下用药各时段眼内药物含量分别作t检验,P<0.01,各组均有统计学显著性差异。结论:眼结膜下注射卡铂后眼内药物浓度明显高于全身注射后的眼内药物浓度。眼结膜下注射化疗药物这一方式可增加眼内药物浓度,有可能是一种有效的局部化疗方法。
- 毛羽翔吴中耀林少芬黎纬
- 关键词：卡铂眼结膜
