杨华蓉
- 作品数:8 被引量:21H指数:2
- 供职机构:四川大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金美国中华医学基金会项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学化学工程更多>>
- 人抗菌多肽的分离纯化、鉴定、cDNA克隆、基因重组及其结构与功能研究
- 子宫颈粘液具强大抗细菌穿透能力,溶菌酶的含量不足以行使其强大抗菌效力,可能存在其它抗菌分子.我们将rIL-2、PHA刺激培养一周的人外周血单个核淋巴细胞(人LAK细胞)用5﹪的乙酸电动匀浆,制备酸溶性粗提物.AU-PAG...
- 杨华蓉
- 关键词:人LAK细胞氨苄青霉素
- 人子宫颈粘液抗菌活性多肽的分离纯化被引量:11
- 2003年
- 目的 从人子宫颈粘液分离纯化新的抗菌多肽。方法 用 5 %乙酸提取人子宫颈粘液可溶物 ,经电泳凝胶琼脂糖弥散法抗菌试验发现 ,子宫颈粘液酸溶性提取物有一条主带对大肠杆菌耐氨苄株 ML - 35 P有强抗菌活性 ,命名为 HCP。应用制备性酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳技术及洗脱电泳技术得到构成该主带的混合物 ,最后应用反相高效液相色谱技术分离纯化多肽。经 Tricine- SDS- PAGE鉴定其相对分子质量 ,并运用琼脂糖弥散法鉴定其抗菌活性。结果 从子宫颈粘液酸溶性提取物中纯化出一多肽 ,相对分子质量约为 14× 10 3,命名为 HCP- 1,具有抗耐药性大肠杆菌和绿脓杆菌的活性。结论 HCP-
- 杨华蓉潘小玲黄宁吴琦冯云王伯瑶
- 关键词:宫颈粘液抗菌多肽分离纯化
- LAK细胞抗菌多肽中的阿α螺旋结构域小肽及多肽与小肽的应用
- 致病性微生物对传统抗生素的耐药性是当今临床医学的全球性难题之一,也是人类为了自身的健康迫切需要解决的问题。本发明从人淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK细胞)胞浆颗粒内分离纯化出一个命名为HLP-3P21的抗菌多肽,并测定了H...
- 王伯瑶吴琦杨华蓉
- 文献传递
- 人LAK细胞抗菌活性多肽HLP-3P21的分离纯化和鉴定被引量:6
- 2003年
- 目的 分离纯化人LAK细胞小分子抗菌多肽 ,鉴定其分子特性 ,检测其抗菌活性。方法 采用密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞 ,并用IL 2和PHA刺激培养。 5 %乙酸匀浆细胞获得其酸溶性提取物。应用制备酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳技术和反相高效液相色谱技术分离纯化多肽 ,Tricine SDS PAGE鉴定其相对分子质量 (Mr) ,运用琼脂糖弥散法鉴定其抗菌活性 ,采用Edman降解法测定其氮端序列 ,并进行肽质谱分析。结果 从人LAK细胞酸溶性提取物中纯化出一多肽 ,Tricine SDS PAGE表观Mr 为 17× 10 3,命名为HLP 3P2 1(humanlymphocytepeptide) ,具有抗致病性大肠杆菌ML 35P及铜绿假单胞菌ATCC6 5 92 2的活性。其氮端序列为PKRKAEGDAK ,肽质谱的检索分析未发现匹配度大于 5 0 %的蛋白质分子。结论 HLP 3P2 1可能为LAK细胞一新的抗菌效应分子。
- 杨华蓉黄宁吴琦王伯瑶
- 关键词:人LAK细胞纯化
- 中药注射液A、B抗移植物慢性失功机理研究
- 移植物慢性失功(CAD)是影响移植物长期存活的最重要因素.血管内皮细胞(VEC)是CAD的重要靶位,同时主动参与CAD的发生发展,前期研究发现中药注射液A、B单用及合用均能 有效缓解大鼠移植肾CAD的发展及大鼠移植腹主动...
- 杨华蓉
- 文献传递
- 高迁移率蛋白-17(HMG-17)基因重组多肽的制备及其抗菌结构域的研究被引量:1
- 2005年
- 为构建HMG-17原核表达系统,研究HMG-17抗菌功能与结构的关系,提取人LAK细胞总RNA,设计合成相应引物,应用RT-PCR扩增HMG-17和HMG-17α螺旋结构成熟肽cDNA,以pGEX-1λT为载体,构建HMG-17和HMG-17α螺旋结构基因大肠杆菌表达载体。该载体表达的融合蛋白GST-HMG-17和GST-HMG-17α经亲合层析、凝血酶酶切、AU-PAGE胶回收后获得高度纯化的HMG-17和HMG-17α肽,对纯化产物进行MEC、MIC、MBC等试验,与杀菌活性较强的抗菌肽HNP-1、NP-1进行活性对比,证明其具有较强的杀菌活性,且具有盐敏感性。并证明了HMG-17的α结构域是HMG-17的主要抗菌功能区域。
- 冯云杨华蓉黄宁吴琦鲍朗王伯瑶
- 关键词:抗菌功能结构基因融合蛋白结构域迁移率
- 人内源性抗菌肽的多样性研究
- 2004年
- 目的 从人单个核白细胞和子宫颈及子宫内膜粘液酸溶性提取物中分离纯化新的抗菌肽。方法 电泳凝胶琼脂糖弥散法分析 r IL- 2刺激培养的人单个核白细胞和子宫颈及子宫内膜粘液酸溶性提取物抗菌组分 ,用制备性酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳初步分离并制备电泳纯的各抗菌组分 ,反相高压液相色谱技术进一步纯化 ,琼脂糖弥散法分析其抗菌活性 ,Tricine- SDS- PAGE鉴定其纯度和分子量 ,用 Edman降解法进行氨基酸序列测定。结果 从刺激培养的人单个核白细胞分别纯化出 HL P- 2 / 2 3、HL P- 3/ 2 1两个抗菌肽分子 ,分子量分别是 7.84和 16 .86 ku;从子宫颈粘液及子宫内膜粘液分别分离纯化出 HCP- 1/ 2 1、HUP1/ 38两个抗菌肽分子 ,分子量分别为 13.89和 5 .95 ku。测定 HL P- 3/ 2 1分子的前 10位 N端氨基酸序列为PKRKAEGDAK。结论 人体抗菌肽分子存在多样性 ,HL P- 2 / 2 3、HL P- 3/ 2 1、HCP- 1/ 2 1和 HU P1/
- 黄宁张舒杨华蓉王莉莉张旗冯云吴琦王伯瑶
- 关键词:子宫颈子宫内膜分离纯化抗生素
- 淋巴因子激活的杀伤细胞抗菌多肽及其应用
- 致病性微生物对传统抗生素的耐药性是当今临床医学的全球性难题之一,也是人类为了自身的健康迫切需要解决的问题。本发明从人淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK细胞)胞浆颗粒内分离纯化出一个命名为HLP-3P21的抗菌多肽,并测定了H...
- 王伯瑶吴琦杨华蓉
- 文献传递