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旋毛虫抗原分子克隆及其T细胞和B细胞表位预测被引量：12: 2007年; 目的克隆旋毛虫肌幼虫肘，21000抗原蛋白基因（Ts21），预测其T细胞和B细胞表位。方法旋毛虫（河南地理株）感染小鼠后收集肌幼虫，提取肌幼虫总RNA，应用RT-PCR技术获取目的基因Ts21，构建重组质粒pUC18—Ts21并测序，应用生物信息分析软件预测其T细胞和B细胞表位。结果成功构建克隆载体pUC18-Ts21。旋毛虫M21000抗原的T细胞表位位于第9—23、135—150位氨基酸位点；B细胞表位位于第31-35、53—56、98—104、124—130、133—157、160-172位氨基酸位点。结论成功克隆了旋毛虫河南地理株肌幼虫肘，21000抗原的编码基因，T细胞和B细胞表位预测结果表明该抗原蛋白具有较好的抗原性，可作为旋毛虫病免疫诊断和预防的候选抗原。; 王来崔晶王中全王强来利红秦银霞任道锋; 关键词：旋毛虫分子克隆 T细胞表位 B细胞表位

实验感染小鼠肉汁中抗旋毛虫抗体水平的研究被引量：6: 2007年; 目的观察小鼠感染旋毛虫后不同时间肉汁中抗体水平的变化及其与血清抗体水平的相关性。方法将288只昆明小鼠随机分成3组(每组96只):轻度(A组)、中度(B组)及重度(C组)感染组,每鼠分别经口感染100、300、500条旋毛虫幼虫,感染后各组每周或隔周随机剖杀8只小鼠,收集血清和肉汁,用旋毛虫肌幼虫排泄物分泌抗原(ES抗原)ELISA检测血清及肉汁中抗体水平;另取30只小鼠,每鼠感染500条旋毛虫幼虫,感染后6周剖杀,制备肉样,用ELISA检测4℃及-20℃保存不同时间后的肉汁中抗体动态水平。结果轻度、中度和重度感染组小鼠分别在感染后4、3和3周开始从肉汁中检出抗体,抗体阳性率分别为87.5%、50%和87.5%;3组小鼠的肉汁抗体阳性率均随感染后时间的延长而逐渐升高,分别在感染后6、4和4周达100%,抗体水平均在感染后8周达高峰,吸光度(A490值)分别为0.43、0.49及0.52,之后肉汁中抗体水平稍有下降,但感染后第18周抗体阳性率仍均为100%,A490值分别为0.35、0.41及0.46。3组小鼠感染后不同时间肉汁与血清抗体水平均具有相关性(r100=0.940,r300=0.970,r500=0.983,P<0.05)。感染旋毛虫小鼠肉样在4℃保存7d和1d的抗体水平A490值均为0.53(F=0.250,P>0.05)。在-20℃保存8周和1周的肉汁抗体水平A490值分别是0.46和0.50,保存8周的肉汁抗体水平与1周的相比无明显下降(F=2.273,P>0.05);虽然保存10周的肉汁A490值已降至0.43,与保存1周的相比差异有统计学意义(F=15.675,P<0.05),但抗体阳性率仍为100%并持续至实验结束时(保存20周)。结论动物死亡或屠宰后不能采集血清时,可从新鲜、冷藏及冷冻胴体采集肉汁代替血清进行抗旋毛虫抗体的检测。; 王中全来利红崔晶; 关键词：旋毛虫肉汁血清 ELISA 小鼠

实验感染小鼠肉汁中抗旋毛虫抗体水平的观察: 旋毛虫病是一种严重的人兽共患寄生虫病，主要因生食或半生食含有旋毛虫幼虫囊包的猪肉或其它动物肉类而感染。因此，对肉类及肉制品中进行旋毛虫检疫是旋毛虫病防治工作的重要内容。目前用于肉类中旋毛虫检疫的方法有旋毛虫镜检查法和人工...; 来利红; 关键词：旋毛虫 ELISA 排泄分泌抗原血清学诊断; 文献传递

肌幼虫可溶性抗原与ES抗原检测抗旋毛虫抗体效果的比较被引量：1: 2007年; 目的比较旋毛虫肌幼虫可溶性抗原(SAg)与ES抗原(ESAg)检测抗旋毛虫抗体的效果。方法应用SAg-ELISA和ESAg-ELISA对旋毛虫病患者血清、感染旋毛虫的小鼠血清及肉汁、其他寄生虫感染人及动物血清进行抗旋毛虫抗体的检测。结果SAg-ELISA和ESAg-ELISA对10例旋毛虫病患者血清检测时抗体阳性率均为100%,但对10份正常人血清检测时SAg-ELISA的背景较深,两种抗原的A值相比较具有显著性差异(P<0.05);应用两种抗原对旋毛虫感染小鼠和正常小鼠血清及肉汁的检测结果与对人血清的检测结果相似。SAg与肝吸虫、肺吸虫、血吸虫等寄生虫感染人及动物血清均有交叉反应,而ESAg仅与1例肺吸虫病患者血清有交叉反应。结论旋毛虫肌幼虫SAg和ESAg检测抗旋毛虫抗体的敏感性相同,但ESAg的特异性优于SAg;肉汁也可作为样本进行抗旋毛虫抗体的检测。; 来利红崔晶王中全姜鹏; 关键词：旋毛虫病 ELISA 可溶性抗原排泄分泌抗原肉汁

免疫层析试纸条检测轻度感染小鼠肉汁抗旋毛虫抗体的研究被引量：2: 2008年; 目的观察免疫层析试纸条对轻度感染小鼠肉汁中抗旋毛虫抗体的检测效果。方法以胶体金标SPA和旋毛虫肌幼虫ES抗原制备免疫层析试纸条。将70只雄性昆明小鼠随机分为7组（每组10只），每组分别经口感染30、25、20、15、10、5、3条旋毛虫幼虫，感染后6周用试纸条进行血清及肉汁抗体检测，并与ELISA、镜检法及消化法的检测结果进行比较。结果30、25、20、15、10条旋毛虫幼虫感染的小鼠，试纸条与ELISA的血清及肉汁抗体阳性率均为100（10／10）,镜检法与消化法的幼虫检出率均为100％（10／10）。5条旋毛虫感染的10只小鼠，镜检法和消化法的幼虫检出率分别为70％（7／10）和100％（10／10），消化法检查时10只小鼠的每克肌肉虫荷为0．88～3．14条幼虫（平均为1．58条），试纸条与ELISA检测时的血清及肉汁抗体阳性率均为100％（10／10）。3条旋毛虫感染的10只小鼠，4种方法检测时均为阴性。结果表明，试纸条检验肉类中旋毛虫的敏感性与ELISA和消化法相同，且明显高于镜检法（P〈0．05）。低剂量旋毛虫感染小鼠后6周的肉汁抗体水平与感染剂量呈正相关（P〈0．05），肉汁与血清抗体水平均具有相关性（P〈0．05）。结论每克小鼠肌肉仅含0．88条旋毛虫幼虫时也可被试纸条检出，试纸条可用于轻度感染肉类中旋毛虫检疫的初筛。; 王中全王洁崔晶秦银霞来利红; 关键词：旋毛虫镜检法消化法肉汁小鼠

旋毛虫感染小鼠膈肌虫荷与血清及肉汁抗体水平的研究被引量：2: 2007年; 目的观察旋毛虫感染小鼠膈肌虫荷(larvae per gram diaphragm,lpgd)与血清及肉汁抗体水平的关系。方法将32只雄性昆明小鼠随机分成4组(每组8只),每只分别感染50(A组)、100(B组)、300(C组)、500条(D组)旋毛虫幼虫,感染后42d剖杀,收集血清及肉汁,观察膈肌虫荷并用旋毛虫肌幼虫ES抗原ELISA检测血清及肉汁抗体。另将50只小鼠随机分成5组(每组10只),每组分别感染旋毛虫(T1)、乡土旋毛虫(T2)、布氏旋毛虫(T3)、伪旋毛虫(T4)及纳氏旋毛虫(T7),每只感染500条幼虫,感染后42d剖杀,观察感染不同种旋毛虫小鼠的膈肌虫荷与血清及肉汁抗体水平。结果感染旋毛虫的A、B、C、D4组小鼠的膈肌虫荷与血清及肉汁抗体水平均无相关性(P>0.05),但与感染剂量呈正相关(P<0.05),每组小鼠的血清与肉汁抗体水平也均具有相关性(P<0.05)。5种旋毛虫感染小鼠的膈肌虫荷与血清及肉汁抗体水平相比均无相关性(P>0.05),但血清与肉汁抗体水平相比均具有相关性(P<0.05)。旋毛虫感染小鼠的血清及肉汁抗体水平明显高于其他4种旋毛虫(乡土旋毛虫、布氏旋毛虫、伪旋毛虫及纳氏旋毛虫)感染小鼠的血清和肉汁抗体水平(P<0.05)。结论旋毛虫肌幼虫ES抗原可用于其他4种旋毛虫(乡土旋毛虫、布氏旋毛虫、伪旋毛虫、纳氏旋毛虫)感染小鼠血清及肉汁中抗旋毛虫抗体的检测。; 崔晶来利红王中全; 关键词：旋毛虫肉汁血清小鼠

免疫层析试纸条检测实验感染猪肉汁抗旋毛虫抗体的研究被引量：3: 2008年; 目的观察免疫层析试纸条对实验感染猪肉汁中抗旋毛虫抗体的检测效果。方法以胶体金标SPA和旋毛虫肌幼虫ES抗原制备了免疫层析试纸条。将30头家猪随机分为2组:实验感染组20头,每头经口感染5000条旋毛虫幼虫,正常对照组10头。感染后10w用试纸条进行血清及肉汁抗体检测,并与镜检法进行比较。结果应用试纸条检测旋毛虫幼虫感染的家猪血清及肉汁的抗体阳性率均为100%(20/20),肌肉压片镜检法的幼虫检出率亦为100%(20/20),每克腿肌虫荷为111～400条幼虫(平均为231.36条)。应用试纸条和镜检法对正常对照组肉汁及膈肌时均为阴性。感染猪肌肉-20℃保存8个月的肉汁抗体阳性率亦为100%(20/20)。结论试纸条检测肉汁中旋毛虫抗体可用于新鲜肉及冷冻猪肉中旋毛虫检疫的初筛。; 崔晶何永康来利红秦银霞王睿王洁王中全; 关键词：旋毛虫猪肉检疫肉汁镜检法

小鼠实验感染不同种旋毛虫后肉汁抗体水平的研究被引量：4: 2008年; 为了观察小鼠感染不同种旋毛虫后肉汁抗体水平的变化及其与血清抗体水平的相关性,将200只昆明小鼠随机分成4组(每组50只),每只分别感染300条乡土旋毛虫(T2)、布氏旋毛虫(T3)、伪旋毛虫(T4)及纳氏旋毛虫(T7)幼虫,感染后2～6周每组每周随机剖杀10只小鼠,收集血清及肉汁,用旋毛虫肌幼虫ES抗原ELISA检测血清及肉汁中抗体水平;另取40只昆明小鼠随机分成4组(每组10只),每只分别感染500条T2、T3、T4、T7幼虫,感染后6周剖杀,制备肉样,用ELISA检测4℃及-20℃保存不同时间后的肉汁抗旋毛虫抗体动态。T2、T3、T4、T7感染小鼠后的肉汁抗体水平和变化趋势相似,均是在感染后第3周检测出肉汁特异性抗体,抗体阳性率分别为60%、30%、30%、30%,至感染后第4周肉汁抗体阳性率均升至100%。4组小鼠感染后2～6周的肉汁与血清抗体水平均具有相关性。T2、T3、T4、T7感染小鼠肌肉4℃保存7d与1d的肉汁抗体水平相比均无显著性差异;所有的感染小鼠肌肉-20℃保存2个月的肉汁抗体水平与保存1个月的相比均无显著性差异;虽然保存3个月的肉汁抗体水平与保存1个月的相比均已有显著性差异,但抗体阳性率仍均为100%并持续至实验结束时的4个月保存期。结果表明,肉汁中抗旋毛虫抗体的检测可用于新鲜肉、冷藏肉及冷冻肉中乡土旋毛虫、布氏旋毛虫、伪旋毛虫、纳氏旋毛虫检疫的初筛。; 王洁崔晶王中全来利红秦银霞; 关键词：旋毛虫 ELISA 肉汁

ELISA检测小鼠肉汁中旋毛虫抗体实验条件的研究被引量：11: 2006年; 目的建立检测小鼠肉汁中旋毛虫抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法。方法应用棋盘滴定方法,选择适宜的旋毛虫肌幼虫排泄-分泌(ES)抗原的包被浓度、酶结合物的种类及肉汁稀释液的种类。结果旋毛虫肌幼虫ES抗原的包被浓度为5.0μg/ml。辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗小鼠IgG对感染旋毛虫小鼠血清及肉汁的抗体检出率均为100%(10/10),HRP标记的葡萄球菌A蛋白(HRP-SPA)的检出率均为0(0/10),两者相比其差异有显著性(P<0.05)。对感染旋毛虫的小鼠肉汁分别用磷酸盐缓冲液(PBS)、磷酸盐缓冲液-Tween20(PBS-T)、生理盐水及含3%脱脂奶粉的PBS-T稀释后进行检测,发现含3%脱脂奶粉的PBS-T在各稀释度的P/N值均明显高于其他3种稀释液(P<0.05)。结论建立了检测小鼠肉汁中旋毛虫抗体的ELISA方法,合适的酶结合物为HRP标记的羊抗小鼠IgG,肉样的最佳稀释液为含3%脱脂奶粉的PBS-T,而HRP-SPA不适合于ELISA检测小鼠抗体IgG。; 来利红崔晶王中全; 关键词：旋毛虫 ELISA 肉汁酶结合物小鼠

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