杜丽蕊
- 作品数：6 被引量：36H指数：3
- 供职机构：暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 小檗碱对小鼠淋巴细胞体外增殖和细胞周期的影响被引量：13
- 2004年
- 目的 :分析小檗碱 (Ber)对小鼠淋巴细胞体外增殖和细胞周期的影响 ,探讨其免疫抑制作用的机制。方法 :分离小鼠淋巴结细胞 ,以CFSE染色 ,加入多克隆刺激剂刀豆蛋白 (ConA)或者佛波醇酯 (PDB)和离子霉素 (Ion)进行刺激 ,以流式细胞仪分析小檗碱对淋巴细胞增殖率的影响 ;以WST 1检测淋巴细胞的增殖情况 ;用碘化丙锭 (PI)染色分析细胞周期分布 ;细胞凋亡以Annexin V染色进行分析。结果 :CFSE染色分析显示 ,当浓度为 10 0、30和 10 μmol L时 ,Ber无论对ConA或PDB +Ion诱导的小鼠淋巴细胞增殖 ,都具有明显的抑制作用 (P <0 0 5 )。以WST 1分析细胞增殖情况 ,也获得相似的结果。对细胞周期分析表明 ,随着小檗碱浓度的增加 ,处于亚二倍体峰的细胞数增加 ,处于S和G2 M期的细胞数则减少 ,而G0 G1 期的细胞数基本不变。Annexin V染色法结果表明 ,30 μmol LBer组Annexin V单阳性区域的百分率为 ( 7 13± 1 0 8) % ,与PDB +Ion阴性组的百分率 ( 2 4 9± 0 2 5 ) %比较有显著的差异 (P <0 0 1)。结论 :小檗碱对小鼠淋巴细胞的增殖有明显抑制作用 ,它能抑制淋巴细胞进入细胞分裂周期 ,这种抑制作用表现出明显的周期特异性。同时 ,Ber可以诱导体外培养的小鼠淋巴细胞发生凋亡。
- 杜丽蕊何贤辉徐丽慧曾耀英王青
- 关键词：小檗碱淋巴细胞细胞周期细胞凋亡
- PKCθ在T细胞活化和IL-2表达中的作用被引量：3
- 2004年
- 蛋白激酶C作为一种丝氨酸苏氨酸激酶在T细胞活化过程中起重要作用。然而,是PKC家族中哪个成员起主要作用,以及具体的作用机制都不清楚。90年代初,随着新型PKC异构型PKCθ的克隆成功,对于PKCθ在T细胞功能活化中的重要作用的认识也逐步加深。本文将主要就PKCθ在T细胞活化及IL2表达过程中作用的研究进展作一综述,并简要提及PKCθ在T细胞中的其他作用。
- 杜丽蕊何贤辉
- 关键词：PKCΘ免疫突触
- 小檗碱对小鼠淋巴细胞的药理作用及其机制的研究
- 目的： 通过分析小檗碱(berberine,Ber)对小鼠淋巴细胞及其亚群的增殖和细胞周期的影响,以及对二硝基氟苯(dinitrofluorobenzene,DNFB)诱导的小鼠迟发型超敏反应(delayed type...
- 杜丽蕊
- 关键词：小檗碱免疫抑制作用迟发型超敏反应蛋白激酶CΘ细胞转染
- 文献传递
- 小檗碱对DNFB诱导的小鼠迟发型超敏反应的影响被引量：16
- 2005年
- 目的:研究小檗碱(Ber)对二硝基氟苯(DNFB)诱导的小鼠迟发型超敏反应(DTH)的影响,探讨其免疫抑制作用的机制。方法:BALB/c小鼠分为对照组、DTH组与Ber处理的DTH组。对照组以不含DNFB的溶剂处理,DTH组以5g/LDNFB腹部致敏、耳廓激发的方法建立模型,Ber处理的DTH组每天腹腔注射(i.p)Ber,连续7d,总剂量为30mg/kg体质量。激发后48h,取小鼠双耳称重了解Ber对炎症抑制率的影响。镜下观察耳廓局部组织的变化;以结晶紫法检查Ber对脾脏T淋巴细胞与细胞外基质(ECM)黏附作用的影响;以膜联蛋白V(AnnexinV)染色检查淋巴结细胞的凋亡率。结果:双耳称重的结果显示,Ber处理的DTH组与DTH组具有显著的差异(P<0.05),能明显抑制DNFB引起的炎症反应;耳廓局部组织学检测也表明,Ber能够抑制DNFB诱导的DTH,明显减少淋巴细胞的浸润。Ber处理的DTH组的T细胞与ECM的黏附能力明显降低(P<0.05)。Ber处理的DTH组与DTH组和对照组的细胞凋亡率均无明显差异(P>0.05)。结论:Ber对DNFB诱导的小鼠DTH具有明显的抑制作用,降低小鼠T细胞与ECM的黏附能力可能是其抑制DTH的机制之一。
- 杜丽蕊何贤辉徐丽慧曾耀英
- 关键词：小檗碱淋巴细胞细胞黏附迟发型超敏反应
- PKCθ-EGFP融合蛋白在HeLa细胞中的表达及其对细胞形态的影响被引量：1
- 2005年
- 目的:分析增强型绿色荧光蛋白(EGFP)与蛋白激酶C-θ(PKCθ)的融合蛋白(PKCθ-EGFP)在HeLa细胞中的表达、亚细胞定位及其对细胞形态的影响。方法:用脂质转染胺(Lipofec-tAMINE 2000)为载体分别以pPKCθ-EGFP和pEGFP-N1转染HeLa细胞,流式细胞仪分析其表达率,激光共聚焦显微镜分析其亚细胞定位,同时分析二丁酸佛波醇酯(PDB)和小檗碱对其亚细胞定位和细胞形态的影响。结果:转染pEGFP-N1或pPKCθ-EGFP的HeLa细胞48 h后,表达绿色荧光的细胞百分率分别为(70.9±4.4)%和(45.8±2.3)%(P<0.05)。表达的PKCθ-EGFP融合蛋白均匀分布于细胞内,与EGFP蛋白在细胞内的分布相似。PDB刺激30 min后,表达PKCθ-EGFP的HeLa细胞的形态发生显著变化,即由原来的梭形变成圆形,荧光强度增强。但表达EGFP的HeLa细胞的形态及荧光分布均不受影响。小檗碱对PDB诱导的HeLa细胞的形态和EGFP-PKCθ融合蛋白的分布无明显影响。结论:表达PKCθ-EGFP融合蛋白的HeLa细胞在PDB作用下细胞形态发生显著变化。
- 杜丽蕊徐丽慧何贤辉
- 关键词：蛋白激酶CΘ融合蛋白细胞转染
- 重组人CD40胞外结构域在大肠杆菌中的表达和纯化鉴定被引量：3
- 2006年
- 目的构建人CD40胞外结构域(exCD40)的原核表达载体,获得可溶性产物。方法以RT-PCR方法从人白细胞总RNA中扩增编码CD40胞外区的cDNA,构建羧基端融合His6标签的exCD40的原核表达载体,在大肠杆菌中表达,并对表达产物进行复性、纯化和鉴定。结果构建了exCD40的原核表达载体,并在大肠杆菌中获得高表达,Mr为23 000,与理论大小相符,表达产物主要存在于包涵体中,经Ni2+-NTA柱上复性和纯化获得纯度达95%的可溶性exCD40蛋白,该蛋白能与细胞上的CD40L结合。结论从大肠杆菌中成功获得具有配基结合活性的可溶性exCD40蛋白。
- 何贤辉徐丽慧刘毅杜丽蕊
- 关键词：CD40原核表达包涵体复性
