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新形势下网络安全事件应急管理研究——以重庆市D区为例: 世界正进入数字经济快速发展的时期，网络空间新技术、新业态、新平台蓬勃兴起，深刻影响着科技创新、产业结构调整、经济社会发展。网络安全作为数字经济发展的基石，面临巨大的风险与挑战。特别是疫情以来，高级持续性威胁（APT）、网...; 李蒙; 关键词：网络安全事件应急管理公共危机

柑橘溃疡病菌快速诊断胶体金速测卡的研制被引量：2: 2012年; 将制备并提纯的抗Xcc单克隆抗体、多克隆抗体及重组抗体,采用间接ELISA方法对比其效价和特异性,筛选用于胶体金速测卡的最优抗体;采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记抗Xcc单抗Xcc-2D8,固定于金标垫上;利用双抗夹心原理,将单抗Xcc-2D6和羊抗鼠抗体分别固定于硝酸纤维素膜上,作为检测线(T线)和质控线(C线),经试验条件优化,组装胶体金速测卡密封干燥保存。对Xcc菌悬液及柑橘样本浸泡液进行检查。结果表明ELISA方法筛选出2株特异性强、稳定性好的抗体(Xcc-2D8效价为1:128 000倍、Xcc-2D6效价为1:256 000倍),应用于胶体金速测卡的研发;所研制速测卡对Xcc菌悬液的最低检测下限为1×103～1×104 cfu/mL,对多个地区的206份柑橘样本进行实际检测所得结果与qPCR方法所得结果具有较高一致性(kappa值=95.15%),混杂的柑橘组织液对检测结果无影响,检测时间控制在10min以内,检测常见细菌及植物病菌显示特异性良好,各批次速测卡无批间差异,速测卡保存方便稳定性良好。; 殷幼平吴瑜佳于红李蒙王中康; 关键词：胶体金单克隆抗体免疫层析

柑橘溃疡病菌二硫键稳定Fv抗体基因的构建及表达产物的生物学活性分析被引量：3: 2009年; 【目的】构建鼠源抗柑橘溃疡病菌二硫键稳定Fv抗体(dsFv)片段基因,原核表达并将其复性为具有免疫活性的dsFv抗体。【方法】采用PCR定点突变的方法构建dsFv重链(VH)及轻链可变区(VL)基因,分别将其连接入表达载体中,于E.coliBL21(DE3)中诱导表达,表达产物溶解后稀释入复性缓冲液中使其重折叠为dsFv抗体并纯化。SDS-PAGE及Western-blot分析表达及复性产物,BIAcore检测dsFv与Xac-LPS的亲和力,ELISA验证dsFv的特异性及稳定性。【结果】测序结果表明在VH的44位和VL的100位成功引入了半胱氨酸突变位点,实现了高效的原核表达,表达产物主要以包涵体的形式存在。SDS-PAGE分析显示VH和VL的大小为23kD,并将其成功复性,复性后大小为46kD。BIAcore分析表明dsFv对Xac-LPS保持了很高的亲和力,亲和常数(KD)达到3.40×10-10M。ELISA证明dsFv具有较高的抗原特异性并且热稳定性较scFv提高近20℃。【结论】成功表达并复性了dsFv抗体,为柑橘溃疡病菌的免疫诊断提供了高效优质的重组抗体。; 王中康李泮志袁青于红李蒙殷幼平; 关键词：柑橘溃疡病菌包涵体复性

柑橘溃疡病菌单链二硫键稳定重组抗体的设计构建与表达: 柑橘溃疡病(CBCD)是危害世界柑橘产业的重要病害之一，为国内外检疫的重要对象。在我国柑橘产区都有发生，南方各省尤为严重，它是由黄单胞杆菌柑橘致病变种（Xcc）引起，病菌主要侵染芸香科植物，以甜橙、脐橙、酸橙、柠檬等品种...; 李蒙; 关键词：柑橘溃疡病菌原核表达氨基酸序列; 文献传递

抗柑橘溃疡病菌三结构域稳定性重组抗体(sc-dsFv)的研制与原核表达: 以鼠源抗柑橘溃疡病表面脂多糖的二硫键稳定性抗体dsFv为模板,利用重叠延伸PCR在重链可变区VH和轻链可变区VL之间引入一条人类抗体重链恒定区1(CH1)5’端12个氨基酸的序列作为连接肽,成功构建了单链二硫键稳定重组抗...; 李蒙殷幼平于红吴瑜佳王中康; 关键词：柑桔溃疡病菌复性 BIACORE; 文献传递

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李蒙