目的探讨B族链球菌基因cpsG影响人类宫颈癌细胞蛋白组学。方法通过人工合成的方法将cpsG的读码框序列(ORF)融合HA标签连接到质粒pLVX-mCMV-ZsGreen的限制性内切酶EcoRI和BamHI之间构建稳定表达cpsG人类宫颈癌Hela细胞系。提取rLV组和rLV-cpsG组的总蛋白质,并通过12%SDS-PAGE电泳分析后,进行非标记(Label-free)蛋白质酶解肽段质谱分析。结果经蛋白质酶解肽段质谱分析显示,rLV组鉴定出3552个蛋白,rLV-cpsG组鉴定出3702个蛋白;与rLV组相比,rLV-cpsG组中上调的蛋白为229个,下调的蛋白为225个。GO分析结果显示,细胞组分主要包括膜完整性、细胞核、核糖体;分子功能主要包括蛋白结合、ATP结合、GTP结合、DNA结合、RNA结合;生物过程主要包括翻译、代谢、蛋白磷酸化、跨膜。KEGG通路富集分析显示,Cellular Processes通路主要包括细胞生长与凋亡(179个)、细胞活力(72个)、真核细胞群(140个)、转运和代谢(270个);Environmental Information Processing通路有膜转运(11个)、信号转导(324个);Genetic Information Processing通路有复制与修复(51个)、转录(133个)、翻译(328个);Human Diseases通路有癌症(258个);Metabolism通路有氨基酸代谢(110个)、糖代谢(144个);Organismal Systems通路包括内分泌系统(174个)。蛋白质-蛋白质相互作用结果显示,下调的蛋白互作网络主要包括prot1(MGST1)∶prot2(GCLC)、prot1(MGST1)∶prot2(MYH10)、prot1(MGST1)∶prot2(UGDH)、prot1(MGST1)∶prot2(GCLM)、prot1(PKP2)∶prot2(CDH2)、prot1(PKP2)∶prot2(A8K2T7);上调的蛋白互作网络主要包括prot1(SLC7A2)∶prot2(TXN)、prot1(SLC7A2)∶prot2(KYNU)、prot1(SLC7A2)∶prot2(MCAT)、prot1(SLC7A2)∶prot2(JUNB)、prot1(SLC7A2)∶prot2(BOLA2)、prot1(SLC7A2)∶prot2(FN1)。结论B族链球菌基因cpsG影响了人类宫颈癌细胞的蛋白组学,该研究为明确cpsG在人类宫颈癌细胞中发生作用机制及其临床应用提供了基础资料。
