李海涛
- 作品数：9 被引量：25H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 狂犬病病毒糖/核蛋白“二价”DNA疫苗田间免疫效果评定被引量：3
- 2007年
- 以狂犬病病毒糖、核蛋白'二价'DNA疫苗pVGN免疫3月龄至8岁龄家犬302条,分为2组:Ⅰ组201条,两侧股内侧肌注;Ⅱ组101条,单侧股内侧肌加单侧耳廓皮内联合注射.免疫3次,剂量为每条犬每次300μg,于试验的0d和35d分别进行.三免后21d用间接ELISA检测特异性抗体,Western-blot分析抗体组成,间接免疫荧光和小鼠中和试验测定抗体中和效价.结果显示,三免后抗体阳转率为58%,组间抗体水平差异不显著(P＞0.05),机体产生了抗糖蛋白、核蛋白2种特异性抗体,抗体稀释8～512倍后,每50μL可以中和100TCID50狂犬病病毒SRV9,个别稀释到2048倍仍具有中和作用,抗体稀释8～16倍后每15μL可中和120MICLD50狂犬病病毒CVS,少部分犬三免后抗体稀释16～32倍后能中和300MICLD50狂犬病病毒CVS.说明该疫苗具有良好的免疫原性,且诱生的抗体能发挥病毒中和作用.
- 肖跃强李海涛刘澜张守峰扈荣良
- 关键词：狂犬病DNA疫苗田间免疫间接免疫荧光
- 狂犬病病毒糖蛋白膜外区重组犬-2型腺病毒构建及免疫研究
- 通过RT-PCR扩增得到狂犬病病毒糖蛋白膜外区序列,将该序列克隆入pMD-18T中;用膜外区序列将pEGFP-C1中的绿色荧光蛋白部分取代,得到含有表达盒的pEGFP-G<,2>,用AseI和MluI双酶切可游离出此表达...
- 王永志扈荣良王莘张守峰李海涛肖跃强夏咸柱
- 关键词：狂犬病糖蛋白膜外区狂犬病病毒
- 文献传递
- 狂犬病病毒核蛋白单抗杂交瘤细胞株及荧光抗体病毒中和试验(FAVN)的建立与应用
- 目的 通过建立针对狂犬病病毒核蛋白单克隆抗体杂交瘤和制备荧光标记的单克隆抗体,建立狂犬病病毒血清中和抗体效价的快速检测方法 ,以实现狂犬疫苗免疫效果的定量评价,指导高危人群及动物种群的免疫预防并为狂犬病的相关研究提供检...
- 张守峰曹亮张菲李海涛李清竹扈荣良
- 关键词：狂犬病病毒中和抗体效价
- 文献传递
- 狂犬病病毒核蛋白基因重组犬2型腺病毒构建研究
- 本试验以SspⅠ酶切进行犬2型腺病毒全基因组E3区部分缺失,并插入由CMV启动子、狂犬病病毒SRV9株核蛋白、牛生长激素polyA构成的长2.4kb的表达盒。经AscⅠ和PvuⅠ双酶切游离重组全基因组,转染MDCK细胞,...
- 李海涛扈荣良张守峰肖跃强袁慧君涂长春
- 关键词：狂犬病病毒核蛋白犬2型腺病毒重组病毒
- 文献传递
- 狂犬病病毒核蛋白基因重组犬2型腺病毒的构建研究被引量：4
- 2005年
- 目的获得具有感染性的狂犬病病毒核蛋白犬2型腺病毒,并对重组病毒生物学和免疫学特性进行初步探讨。方法对克隆的犬2型腺病毒全基因组E3区进行部分缺失后,插入由CMV启动子、狂犬病病毒SRV9株核蛋白基因和牛生长激素polyA构成的长2392bp的表达盒,然后通过AscⅠ和PvuⅠ双酶切,游离重组全基因组,转染犬肾细胞系。结果盲传5代后,细胞产生典型病变。经鉴定,确定得到了狂犬病病毒核蛋白重组犬2型腺病毒(CAV2RN)。Westernblot检测表明,狂犬病病毒核蛋白在重组犬2型腺病毒中得到了表达。结论重组病毒可以诱导受试犬产生针对犬2型腺病毒和狂犬病病毒核蛋白的特异性抗体。
- 李海涛扈荣良张守峰肖跃强袁慧君涂长春
- 关键词：狂犬病病毒核蛋白犬2型腺病毒重组病毒
- 狂犬病病毒糖/核等结构蛋白的犬2型腺病毒重组疫苗
- 本发明涉及一种狂犬病病毒糖/核等结构蛋白的犬2型腺病毒重组疫苗，该重组疫苗是以犬2型腺病毒为载体，将犬2型腺病毒基因组E3区进行了部分缺失并克隆进了狂犬病病毒糖/核等结构蛋白的表达盒；糖/核等结构蛋白表达盒由巨细胞病毒(...
- 张守峰扈荣良李海涛王永志袁慧君涂长春夏咸柱
- 文献传递
- 狂犬病病毒核蛋白基因重组犬2型腺病毒构建研究
- 本试验以SspI酶切进行犬2型腺病毒全基因组E3区部分缺失,并插入由CMV启动子、狂犬病病毒SRV9株核蛋白、牛生长激素polyA构成的长2.4kb的表达盒.经AscI和PvuI双酶切游离重组全基因组,转染MDCK细胞,...
- 李海涛扈荣良张守峰肖跃强袁慧君涂长春
- 关键词：狂犬病病毒核蛋白犬2型腺病毒重组病毒狂犬病
- 文献传递
- 狂犬病毒核蛋白单抗和荧光抗体中和试验的建立与应用被引量：18
- 2006年
- 目的建立狂犬病毒血清中和抗体效价的快速检测方法,以实现狂犬疫苗免疫效果的定量评价,指导高危人群及动物种群的免疫预防。方法采用常规方法建立杂交瘤细胞株并制备抗狂犬病毒核蛋白单抗,以亲和层析法进行纯化,异硫氰酸荧光黄标记制备荧光抗体;以BHK-21细胞系培养狂犬病毒细胞适应株CVS-11,以染毒细胞测定荧光抗体的工作浓度后,通过荧光抗体染色法测定CVS-11细胞半数感染量(TCID50);利用狂犬病毒灭活疫苗免疫犬制备抗狂犬病毒血清,并以国际兽疫局标准品进行标定;参考世界卫生组织及国际兽疫局推荐方法,确定中和试验程序,对51份样品血清进行测定,并与国际狂犬病参考实验室的检测结果进行比较,评价其精确及可靠程度。以Kaber法公式和MicrosoftExcel软件为基础,设计被测样品中和效价计算方法。结果制备的抗狂犬病毒核蛋白单抗的亚型为IgG2a;纯化、标记后的荧光抗体工作浓度为1∶400;CVS-11株的使用量为每孔100TCID50;本研究建立的检测程序对51份人及犬血清测得的中和效价结果与国际参考实验室的测定结果一致;自行设计的计算方法操作简便,计算快捷。结论成功建立了与国际标准相当的狂犬病毒中和抗体效价测定和计算方法。
- 张守峰曹亮张菲李海涛李清竹扈荣良
- 关键词：狂犬病毒杂交瘤荧光抗体技术
- 狂犬病病毒糖蛋白膜外区重组犬-2型腺病毒构建及免疫研究
- 通过RT-PCR扩增得到狂犬病病毒糖蛋白膜外区序列,将该序列克隆入pMD-18T中;用膜外区序列将pEGFP-C1中的绿色荧光蛋白部分取代,得到含有表达盒的pEGFP-G2,用AseⅠ和MluⅠ双酶切可游离出此表达盒,在...
- 王永志扈荣良王莘张守峰李海涛肖跃强夏咸柱
- 关键词：狂犬病糖蛋白膜外区
- 文献传递
