李晓娟
- 作品数：10 被引量：5H指数：2
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 丁型肝炎病毒载体携带核酶在小鼠体内抑制乙型肝炎病毒复制
- 2005年
- 目的:研究用丁型肝炎病毒(HDV)作为载体携带乙型肝炎病毒(HBV)特异性的锤头状核酶所构建的重组体,在细胞体系及转染动物模型中对HBV基因表达和复制的影响。方法:将HDV核酶重组体和HBV的共表达质粒转染Huh7细胞以分析HDV核酶重组体对HBV基因表达的影响;用小鼠尾静脉快速注射法将共表达质粒转染到小鼠体内,检测重组体在动物体内对HBV基因表达和复制的抑制作用。结果:转染细胞中,重组体对HBsAg的抑制与HDV重组位点和核酶靶位都有关;水压法注射的质粒在小鼠肝内得到表达,与对照相比重组HDV核酶可有效抑制在肝和血清中HBV的基因表达以及复制,与细胞中的结果一致。结论:此项体内实验为进一步构建治疗性重组HDV病毒,发现靶向性抗病毒基因治疗手段奠定基础。
- 李晓娟戴炜况二胜杨复华乐晓华王敏周伯平
- 不明病因感染性疾病DNA病毒性病原检测方法的建立被引量：2
- 2007年
- 目的建立不明病因感染性疾病DNA病毒性病原的检测方法。方法应用DNaseI-非序列依赖的单引物扩增技术,将患者血清过滤后,经DNase I处理去除血清中内源DNA。Csp6.I酶切病原DNA,加接头分子,并以接头分子为引物非特异扩增病原DNA,测序并进行序列分析。结果DNaseI处理血清中内源DNA不会降解病毒DNA;非序列依赖的单引物扩增血清中外源DNA得到多个DNA片段;将所有PCR产物测序,序列与已知病原DNA序列完全一致。结论应用DNaseI处理及非序列依赖的单引物扩增方法可以检测DNA病毒性病原。
- 王火生张红梅李晓娟王敏徐六妹陈玉丙
- 关键词：感染性疾病病毒乙型肝炎病毒
- 丁型肝炎病毒载体携带核酶在小鼠体内抑制乙型肝炎病毒复制
- 2006年
- 目的：研究用丁型肝炎病毒（HDV）作为载体携带乙型肝炎病毒（HBV）特异性的锤头状核酶所构建的重组体，在细胞体系及转染动物模型中对HBV基因表达和复制的影响。方法：将HDV-核酶重组体和HBV的共表达质粒转染Huh-7细胞以分析HDV-核酶重组体对HBV基因表达的影响；用小鼠尾静脉快速注射法将共表达质粒转染到小鼠体内，检测重组体在动物体内对HBV基因表达和复制的抑制作用。结果：转染细胞中，重组体对HBsAg的抑制与HDV重组位点和核酶靶位都有关；水压法注射的质粒在小鼠肝内得到表达，与对照相比重组HDV-核酶可有效抑制在肝和血清中HBV的基因表达以及复制。与细胞中的结果一致。结论：此项体内实验为进一步构建治疗性重组HDV病毒，发现靶向性抗病毒基因治疗手段奠定基础。
- 李晓娟
- 关键词：乙型肝炎病毒复制锤头状核酶病毒载体小鼠HUH-7细胞
- 重组HDV-核酶在Huh-7细胞中的复制活性和对HBV的抑制作用研究
- 锤头状核酶是一类具有催化活性的RNA分子,在基因治疗领域具有良好应用前景, 目前急需解决的主要是如何将核酶高效、特异、安全地运送到靶细胞。丁型肝炎病毒 (HDV)是必需HBV辅助包装的缺陷病毒,HDV的嗜肝性特殊在它只会...
- 李晓娟况二胜戴炜杨复华
- 关键词：丁型肝炎病毒锤头状核酶
- 文献传递
- 丁型肝炎病毒的分子生物学研究进展被引量：2
- 2003年
- 丁型肝炎病毒(Hepatitis delta virus,HDV)是一种缺陷病毒,必须在嗜肝DNA病毒的辅助下才能复制并组装成有感染的病毒颗粒[1].
- 李晓娟况二胜杨复华
- 关键词：丁型肝炎病毒分子生物学转录
- HDV携带锤头状核酶有效抑制HBV复制
- 目的在细胞转染体系筛选对HBV有显著抑制效果和具有复制性能的载HBV靶向性锤头状核酶的重组丁型肝炎病毒(HDV),研究其在动物体内对HBV基因表达和复制的影响。材料和方法通过用生物信息学软件HBV全长基因组mRNA二级结...
- 李晓娟况二胜戴炜杨复华王炎生乐晓华王敏徐六妹李丽雄周伯平
- 文献传递
- 针对不同基因靶位的锤头状核酶对HBV的抑制作用研究被引量：2
- 2004年
- 前基因组mRNA是HBV(HepatitisBvirus)基因表达和复制的重要中间产物,全长的前基因组mRNA分子具有复杂易变的二级结构,是设计抑制HBV的核酶时所必须考虑的因素。我们使用多个最新的计算机软件对HBV前基因组mRNA二级结构进行模拟、分析,在全面分析核酶的可作用位点的基础上设计三个针对不同基因靶位的锤头状核酶,并对它们在细胞中对HBV的抑制作用进行研究。结果表明在HBV前基因组mRNA上存在几个高度复杂二级结构的区域,可能对核酶完全不敏感,而S、C、X基因的编码区是合适的核酶作用位点,都可达到对HBV的有效抑制,而且X基因位点的核酶对HBV的各种mRNA的抑制作用最为明显,是设计针对HBV核酶时应该优先考虑的位点。
- 李晓娟况二胜杨复华
- 关键词：HBV基因锤头状核酶乙型肝炎病毒
- 以重组丁型肝炎病毒为载体的核酶对HBV复制的抑制作用研究
- 乙型肝炎是一种严重危害人类健康的传染病,在中国每年与HBV相关的肝癌和肝硬化死者达数十万.但目前对于乙型肝炎并无确切有效的常规治疗方法.核酶(Ribozyme)是一类具有催化活性的RNA分子,可序列特异性地结合并切割靶R...
- 李晓娟
- 关键词：乙型肝炎病毒丁型肝炎病毒锤头状核酶基因治疗
- 文献传递
- HDV-核酶重组体的细胞内及动物体内抗乙肝病毒作用研究
- 戴炜周荣温淑娟周伯平余卫业李晓娟邬明禹弘乐晓华况二胜杨复华
- 该课题采用最新的计算机软件进行模拟、计算设计了三个针对HBV不同基因靶位的锤头状核酶分子。将针对HBV的特异核酶重组入完整的HDV cDNA，构建重组体克隆单体和真核表达双体。筛选正向表达双体质粒，与HBV共转染细胞。发...
- 关键词：
- 关键词：丁型肝炎病毒核酶
- 丁型肝炎病毒基因组RNA包埋锤头状核酶的活性研究被引量：1
- 2005年
- 目的 探讨用丁型肝炎病毒 (HDV)基因组来包埋HBV靶向性核酶对核酶体内外活性产生的影响。方法 用和HBV靶基因体外转录产物在不同反应条件下温育对HDV 核酶重组体的体外切割活性定量分析 ;与HBV基因组共转染Huh 7细胞以考察核酶在细胞内对HBV基因表达水平的抑制。结果 体外实验发现 ,温度及核酶和底物的二级结构对包埋于HDV序列的核酶体外切割活性均有较大的影响。提高反应温度或消除二级结构都可使HDV包埋核酶的体外活性达到明显效果 ,与相同条件的裸露核酶活性没有太大差异。而细胞实验则表明 ,活性明显优于裸露核酶 ,可以将靶基因的表达抑制到极低水平。结论 HDVRNA序列对所包埋核酶体外活性有一定的抑制作用 。
- 李晓娟况二胜戴炜杨复华王敏王火生周伯平
- 关键词：锤头状核酶丁型肝炎病毒包埋体外切割基因表达水平重组体
