李成鹏
- 作品数：8 被引量：103H指数：5
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- 当归多糖诱导人白血病干细胞衰老与调控端粒系统机制的研究被引量：9
- 2014年
- 目的探讨当归多糖(ASP)调控人CD34+CD38-骨髓白血病干细胞(LSC)衰老的端粒与端粒酶机制。方法免疫磁性分选人骨髓CD34+CD38-LSC;CCK-8检测ASP对CD34+CD38-LSC增殖抑制能力;衰老相关β半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测细胞衰老情况;混合集落培养(CFU-Mix)检测细胞增殖能力;荧光定量RT-PCR检测端粒酶基因TERT变化;TRAP-PCR检测细胞端粒酶活性;Southern blotting检测细胞端粒长度变化。结果免疫磁性分选后人骨髓CD34+CD38-LSC纯度达(91.15±2.41)%,相差显微镜观察显示细胞形态饱满,透明度高,折光性强。ASP体外诱导CD34+CD38-LSC 48 h,能有效抑制其增殖且呈浓度依赖性(P<0.05),集落形成能力下降(P<0.01)。40μg/mL ASP作用CD34+CD38-LSC 48 h,SA-β-Gal染色阳性细胞率明显升高(P<0.01);CD34+CD38-LSC端粒酶基因TERT表达水平下降(P<0.05);端粒酶活性下降(P<0.05);端粒长度缩短(P<0.05)。结论 ASP在体外可能通过调控细胞端粒系统诱导人骨髓CD34+CD38-LSC衰老。
- 李成鹏刘俊贾道勇张梦思徐春燕张岩岩景鹏伟王璐王顺和王亚平
- 关键词：当归多糖白血病干细胞端粒端粒酶衰老
- 人参皂苷Rg1对衰老大鼠胸腺结构与功能的影响被引量：15
- 2015年
- 目的探讨人参皂苷Rg1对衰老大鼠胸腺结构与功能的影响及机制。方法 SD大鼠随机分为4组,每组10只。衰老模型组,皮下注射D-半乳糖120 mg/kg,1次/d,42 d;Rg1衰老模型组,注射D-半乳糖剂量与时间同衰老模型组,第15天起腹腔注射Rg1 20 mg/kg,1次/d,28 d正常对照组,皮下注射生理盐水1次/d,42 d;Rg1正常对照组,注射生理盐水1次/d,14 d,第15天起腹腔注射Rg1(同Rg1衰老模型组)。模型复制或药物注射完成后第2天,取胸腺测定胸腺指数,石蜡切片观察胸腺形态学;衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测胸腺细胞衰老,CCK-8检测胸腺细胞对刀豆蛋白A刺激的增殖能力,ELISA检测胸腺细胞分泌肿瘤坏死因子(TNF)-α、GM-CSF、白细胞介素(IL)-2与IL-6的能力,流式细胞术检测细胞活性氧(ROS)、胸腺细胞凋亡,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA),酶学检测超氧化物歧化酶(SOD),DTNB法测定谷胱甘肽(GSH)、氧化谷胱甘肽(GSSG)含量,Western印迹检测细胞衰老相关蛋白p21、p53、Rb的变化。结果 Rg1衰老模型组大鼠胸腺指数升高、胸腺皮质面积比例增加、胸腺细胞的增殖能力提高,凋亡率减少、SA-β-Gal阳性胸腺细胞百分率下降、TNF-α、GM-CSF、IL-2、IL-6的分泌能力明显提高、SOD活性明显提升;ROS和MDA含量下降;p53、p21、Rb蛋白表达有显著下调。结论 D-半乳糖复制的衰老模型大鼠胸腺结构与功能损伤明显,人参皂苷Rg1对其致衰损伤有明确的保护作用,其机制可能与抑制氧化损伤和下调p16-Rb、p53/p21信号通路有关。
- 冉瑞图孙嘉政张晶邵月张力恒李成鹏贾道勇张岩岩张梦思王亚平
- 关键词：人参皂苷RG1胸腺
- 体外磁场定向迁移的间充质干细胞对脊髓损伤的治疗和GAP-43的表达被引量：3
- 2014年
- 目的探讨体外磁场定向迁移尾静脉注射的SPIO标记的大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)对大鼠脊髓损伤治疗的影响以及对脊髓中生长相关蛋白-43(growth-associated protein,GAP-43)表达的影响。方法体外培养SD大鼠BMSCs,流式细胞仪检测其免疫表型,超顺磁氧化铁颗粒(superparamagetic iron oxieds,SPIO)标记BMSCs,普鲁士蓝染色测定SPIO标记率,台盼蓝染色检测标记细胞存活率,CCK-8检测标记细胞分裂增殖能力,Western blot检测标记细胞干细胞标记物Nestin及GFAP表达。建立大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)模型,尾静脉注射移植细胞,对细胞移植后大鼠进行BBB评分。普鲁士蓝染色观察脊髓组织内标记细胞,TTC染色观察脊髓缺血损伤面积,Western blot检测损伤脊髓内GAP-43表达情况。结果原代BMSCs体外能成功分离、培养、传代,且流式细胞仪检测表达间充质干细胞标记物不表达造血干细胞标记物。普鲁士蓝染色显示SPIO标记率接近100%。台盼蓝染色显示标记细胞生存率与对照组无差异(P>0.05)。CCK-8检测磁场下标记细胞增殖活性不受影响(P>0.05)。Western blot检测磁场下标记细胞表达Nestin及GFAP无差异,分化活性不受影响(P>0.05)。磁铁组大鼠BBB评分明显优于对照组(P<0.05)。普鲁士蓝染色观察磁铁组脊髓组织中BMSCs明显多于无磁铁组。TTC染色显示磁铁组缺血面积小于无磁铁组(P<0.05)。Western blot检测脊髓组织中同一时间点GAP-43表达,磁场组明显大于对照组及无磁场组(P<0.05)。结论外置磁场可以定向更多SPIO标记的BMSCs到达脊髓损伤处,使其更好地发挥修复作用且上调GAP-43的表达,利于脊髓损伤的恢复。
- 郑希李成鹏王顺和
- 关键词：骨髓间充质干细胞超顺磁氧化铁脊髓损伤迁移GAP-43
- 当归多糖调控人白血病干细胞衰老的机制研究被引量：23
- 2015年
- 目的：探讨当归多糖（Angelica sinensis polysaccharide,ASP）体外诱导人白血病干细胞衰老的相关机制。方法：免疫磁性分选法分离人急性髓系白血病患者骨髓白血病干细胞（leukemia stem cells,LSCs）;不同质量浓度的当归多糖（20~80 mg·L-1）体外诱导LSCs 48 h,CCK-8检测LSCs增殖能力;甲基纤维素半固体培养法检测LSCs形成白血病细胞集落（CFU-LC）能力;透射电子显微镜分析细胞超微结构变化;β-半乳糖苷酶（SA-β-Gal）染色检测细胞衰老;qRT-PCR分析LSCs衰老相关基因p53,p21,p16和Rb表达;Western blotting检测P16,Rb,CDK4和Cyclin E蛋白表达。结果：分选后LSCs纯度达（91.15±2.41）%,形态良好。经不同浓度当归多糖作用后,LSCs呈现明显的的浓度依赖性增殖抑制。40 mg·L-1当归多糖作用LSCs48 h,其SA-β-Gal染色阳性细胞率明显升高,CFU-LC形成能力下降;超微结构显示细胞线粒体肿胀,溶酶体数量增多,异染色质边集;衰老相关基因p53,p21,p16和Rb表达上调;衰老相关蛋白P16和Rb表达上调,CDK4和Cyclin E表达下调。结论：当归多糖在体外能诱导人LSCs衰老,推测其可能机制与当归多糖调控P16-Rb信号通路有关。
- 贾道勇刘俊李成鹏李静张梦思张岩岩景鹏伟徐春燕王亚平
- 关键词：当归多糖白血病干细胞衰老
- 人参皂苷Rg1拮抗D-半乳糖致大鼠脑衰老及机制研究
- 目的:干细胞衰老是生物体衰老的最新学说,调控干细胞衰老对延缓机体衰老和防治老年性疾病至关重要。神经干细胞（NSCs）衰老与神经系统退行性疾病密切相关。我们前期工作证明,人参皂苷Rg1是“补气”中药人参重要的抗衰老成分,有...
- 李成鹏
- 关键词：人参皂苷RG1脑衰老神经退行性疾病神经干细胞实验药理
- 当归多糖对衰老模型大鼠骨髓造血功能的影响及其机制被引量：12
- 2014年
- 目的探讨当归多糖（ASP）对衰老模型大鼠骨髓造血功能的影响及其机制。方法6～8周雄性SD大鼠40只，随机分为正常组（n=10）、ASP正常组（n=10）、衰老模型组（n=10）和ASP衰老模型组（n=10）。药物注射完成第2天，取眼球血检测外周血常规，取股骨测定每根股骨骨髓单个核细胞（BMNCs）总数；CCK8测定BMNCs增殖能力；流式细胞术检测BMNCs增殖周期与活性氧簇（ROS）含量；造血祖细胞混合集落（CFU—Mix）培养检测BMNCs形成集落能力；衰老β半乳糖苷酶（SA—B—Gal）染色观察衰老BMNCs百分率；酶学法检测细胞总抗氧化能力（T—AOC）；Western blotting检测P53和P21蛋白表达；激光扫描共焦显微镜检测P53蛋白表达及定位。结果与衰老模型组比较，ASP衰老模型组外周血红细胞、血小板和白细胞总数下降得到抑制；股骨BMNCs细胞数升高；增殖能力提高；形成CFU-Mix数增加；SA-B-Gal染色阳性BMNCs百分率显著降低；G1期细胞比例降低，S期细胞比例升高，细胞内ROS含量显著降低；T-AOC升高；P53和P21表达显著上调。结论ASP能延缓或拮抗D-半乳糖致大鼠骨髓造血细胞衰老，其机制可能与ASP抑制氧化应激，下调p53／p21通路有关。
- 张岩岩李静贾道勇张梦思徐春燕景鹏伟李成鹏王璐王顺和王亚平
- 关键词：当归多糖衰老模型骨髓单个核细胞免疫印迹法
- 外磁场作用下SPIO标记脂肪干细胞经尾静脉移植治疗急性脑缺血被引量：2
- 2013年
- 目的:观察外置磁场能否提高超顺磁性氧化铁(SPIO)标记的脂肪干细胞经静脉移植治疗SD大鼠急性脑缺血的成功率。方法:线栓法制备MCAo大鼠模型40只,随机分成缺血未干预对照组(IO组)、未磁性标记ADSCs静脉移植组(IC组),磁性标记ADSCs静脉移植组(ICS组)和磁性标记ADSCs静脉移植并加外加磁场组(ICSM组),各组在细胞移植后1天,7天分别进行行为学评分,普鲁士蓝染色观察磁标记ADSCs在大脑内的分布情况,TTC染色比较缺血体积,原子吸收光谱仪测各组大脑铁含量。结果:细胞移植后7天ICSM组动物较其他三组神经系统功能明显改善(P<0.05),ICSM组缺血区普鲁士蓝染色阳性细胞增多,缺血体积显著减小(P<0.01),铁含量显著增多(P<0.01)。结论:外磁场可以诱导SPIO标记的ADSCs在体内的定向迁移,提高尾静脉移植ADSCs治疗急性脑缺血大鼠的成功率。
- 陈晓丹郑洁李成鹏王顺和
- 关键词：磁场脂肪干细胞脑缺血超顺磁性氧化铁
- 人参皂苷Rg_1延缓脑衰老机制研究被引量：42
- 2014年
- 神经系统退行性疾病是老年患者的常见病和多发病。前期研究发现人参皂苷Rg1有明显延缓脑衰老作用,但作用机制并不完全清楚。为研究人参皂苷Rg1抗脑衰老的可能机制,40只雄性SD大鼠随机分为正常组、Rg1正常组、脑衰老模型组、Rg1脑衰老模型组,每组10只(脑衰老模型组:大鼠皮下连续42 d注射D-半乳糖(120 mg·kg-1),qd。Rg1脑衰老模型组:在脑衰老模型复制同时,16 d起开始腹腔注射人参皂苷Rg1(20 mg·kg-1)27 d,qd。Rg1正常组:大鼠皮下注射等量生理盐水,16 d起开始腹腔注射人参皂苷Rg1(20 mg·kg-1)27 d,qd。正常组:注射等时与等量生理盐水。模型复制结束或药物注射完成第2天进行相关实验。通过水迷宫实验、β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色实验、ELISA实验、酶标比色法实验、Southern blotting和PCR-ELISA实验检测各组大鼠的空间记忆能力、脑衰老情况、海马区IL-1和IL-6炎症因子变化、海马区抗氧化指标SOD和GSH变化以及海马区端粒长度和端粒酶活性变化。结果脑衰老模型组大鼠空间记忆能力减退,脑组织切片显示SA-β-Gal染色阳性颗粒增多,海马区SOD活性降低,GSH含量减少,IL-1,IL-6含量增多,端粒长度缩短,端粒酶活性降低。Rg1脑衰老模型组大鼠空间记忆能力有明显改善,SA-β-Gal染色蓝色颗粒减少,海马区SOD活性增高,GSH含量增多,IL-1,IL-6含量减少,端粒长度缩短受到阻止,端粒酶活性增高。Rg1正常组大鼠与正常组大鼠相比空间记忆能力增强,SA-β-Gal染色蓝色颗粒减少,海马区IL-1,IL-6含量减少。结果表明人参皂苷Rg1可能通过调节端粒系统、炎症因子水平和抗氧化作用发挥延缓脑衰老作用。
- 李成鹏张梦思刘俊耿珊李静朱家红张岩岩贾道勇王璐王顺和王亚平
- 关键词：人参皂苷RG1抗衰老
